Pruebas primarias y secundarias del diagnóstico bacteriológico Flashcards
Qué son las pruebas primarias? Cuáles son?
Sirven para identificar el género bacteriano.
Potasa, catalasa y oxidasa
Qué es la prueba de potasa?
Sirve para confirmar la tinción Gram, se basa en la capacidad de la potasa para disolver las paredes de las Gram -.
Poners bacterias en porta y le agregas KOH.
Si la solución se vuelve viscosa es Gram -, potasa +
Si la solución no se vuelve viscosa es Gram +, potasa -
Qué es la prueba de la oxidasa?
Determina la presencia de C-oxidasa (enzima de bacterias aerobias).
Se pone en una placade petri un disco de filro y extendemos una colonia, se agrega el reactivo.
Si es +, se tiñe de violeta. ej Pseudomona
Si es -, no hay color. Ej. Salmonella, E. coli.
Permite diferenciar Pseudomona de enterobacterias.
Qué es la prueba de la catalasa?
La catalasa descompone el peróxido de hidrógeno y lo transforma en agua y oxígeno. Es una enzima presente en bacterias aerobias y anaerobias facultativas.
1. Gota de peróxido de hidrógeno en el porta
2. Transferís una ansada del centro de una colonia
3. Emulsionas
Si es positivo, se ven burbujas. Ej. Staphylococcus aureus
Si es negativo queda igual. Ej. Streptococcus.
Pruebas secundarias que son y cuales?
Permite identificar especies entre los géneros. Coagulasa, IMVIC, TSIA, SIM.
Qué es la prueba de la coagulasa?
Se usa para diferenciar especies de Staphylococcus. Se basa en la presencia de la coagulasa.
- Tocar la colonia con el ansa
- Sembrar en el tubo con el plasma de conejo raspando contra el vidrio asegurándose que el inóculo quede en el tubo. No
agitar. - Incubar en baño de agua a 37°C
- Mirar el tubo periódicamente y hasta 24 hs
Si es positivo indica que es S. aureus.La prueba da coagulasa positiva al dar vuelta el tubo se observará un coagulo en el fondo del tubo. Se considera que la prueba es positiva si el plasma es coagulado en 3 a 4 horas, aunque
algunas cepas sólo coagulan el plasma después de 24 horas de
incubación.
Qué es el IMVIC?
I - INDOL
M - ROJO METILO
V - VOGES - PROSKAUER
C - CITRATO
Qué es la prueba de indol?
Se usa para saber si la bacteria tiene triptofanasa que rompa el triptofano y formar indol.
Se pone una ansada de colonia en caldo triptofano y se incuba 24 - 48hs. Se revela con reactivo de Kovaks
Si es + hay un anillo rojo en la superficie. Ej. E. coli
Si es negativo el anillo es amarillo. Ej. Salmonella
Qué es la prueba rojo metilo y VP?
Son dos pruebas complementarias.
Diferenciación entre dos vías de fermentación que realizan las enterobacterias.
Ansada de colonia se incuba en caldo RMVP. Saco dos tubos.
VP - 4 gotas de KOH, si es + se ve el tubo con rojo arriba y amarillo abajo, si es negativo se ve amarillo. Se ve si se fermenta la vía butanodiolica
RM - se revela con 5 gotas de rojo metilo. Si es positivo se tiñe de rojo, ej Salmonella, E. coli. Si es negativo queda amarillo, ej. Enterobacter, Klebsiella. Usa la vía ácido - mixta.
Si es + RM y - VP usa ácido mixta
Si es - RM y + VP usa la butonadiolica.
Si es negativo en las dos no fermenta
Si las dos son positivas no es válida.
Cuál es la prueba de citrato?
Se basa en si puede o no usar el citrato.
Ansada y sembras en citrato e incubas por 24hs.
Si la bacteria usa citrato se liberan iones amonio y alcaliniza el pH. Se ve azul, +. Ej. Salmonella
Si no usa queda verde, es - E. coli
Resultado IMViC E. Coli
I +
M +
V -
C -
Resultado IMViC Salmonella
I -
M +
V -
C +
Qué es le TSIA?
Triple azúcar (glucosa, sacarosa y lactosa) hierro.
Capacidad de fermentar cierto tipo de azúcares, producir ácido sulfhídrico y CO2.
Se saca una ansada y se cultiva.
Si el tubo queda amarillo - hay fermentación de todos los azúcares
Si hay burbujas o desprendimiento del medio hay producción de gas (CO2)
Si queda negro hay producciónde ac. sulfhídrico.
Si queda roja no fermenta azúcares.
SI queda amarillo y rojo puede ser por degradación de peptonas o fermentación de glucosa.
Que es la SIM
Sulfhídrico indol, motilidad.
Determina la capacidad de producir gas sulfhidrico, degradar triptofano y moverse.
Ansada e incubas 24hs. Se siembra por punción.
Motilidad - si queda turbio es +, si solo en el sitio de punción es -.
-,+,+ E. coli
+,-,+ Salmonella
+,+,+ Proteus
