Proteinanalytik: Rechnen

Question 1

Woraus besteht eine “Säule” in der Gelfiltrations/-chromatographie (Formel)?

Wofür stehen die einzelnen Komponenten der Formel?

Answer 1

vt = vg + vi + v0

• Vt = Gesamtfüllvolumen
• Vg = Volumen der Gelmatrix (Stationäre Phase)
• Vi = Inneres Volumen (Stationäre Phase)
• V0 = Auschlussvolumen (Mobile Phase)

oder V = π · r2 · h

Question 2

Was ist der Verteilungskoeffizient Kav in der Gelfiltration/-chromatographie?

Answer 2

Bez. Stationäre Phase = Vi+Vg

Gibt an, welcher Anteil der stationären Phase
für Substanzen einer bestimmten Größe
zur Diffusion zur Verfügung steht

Question 3

Was ist das Ve in der Gelfiltration/-chromatographie?

Answer 3

Ve = Elutionsvolumen

Volumen an Elutionsmittel, das zw. dem Auftragen und Austreten einer Substanz fließt

Question 4

Wie wird der Verteilungskoeffizient Kav in der Gelfiltration/-chromatographie berechnet?

Answer 4

Kav =
(ve - v0) / (vi + vg) =
(ve - v0) / (vt - v0)

Question 5

Wie berechnet man das Elutionsvolumen vE?

Answer 5

Ve =
vi + v0 =
vt - vg

Question 6

Bestimme vE und kd für folgendes Extrembeispiel:

Große Moleküle, die nicht in Gelporen (stationäre Phase) eindringen können (völlig ausgeschlossene Moleküle)

Answer 6

• ve = v0
• kd = 0

Question 7

Wie berechnet man den Verteilungskoeffizienten kd?

Answer 7

kd = ve-v0 / vi

Kd = -k * log(M) + c

Question 8

Was ist das Ausschlussvolumen v0?

Answer 8

Lösungsmittelraum außerhalb der Gelpartikel