Mycobacterium Flashcards
Habitat
- As micobacterias são ubíquas
- Encontram-se maioritariamente no solo, mas podem ser isoladas de água (rio e mar)
- Estamos em permanente contacto com as micobactérias (inalação ou ingestão)
- Consequente colonização (temporária ou permanente) do trato respiratório ou digestivo
- Podem ser detetadas na pele e nas fezes de indivíduos saudáveis
Morfologia, Estrutura e Fisiologia
- Bacilos aeróbios estritos que tendem a agrupar-se
- Genoma com elevado conteúdo em G+C (60-70%)
- Organismos não móveis e não formadores de esporos
- Gram-positivo empiricamente (não coram pelo Gram)
- Bacilos ácido-resistentes (resistem à descoloração com soluções de álcool e ácido)
- Parede celular rica em lípidos complexos e ácidos micólicos (60%)
- Coram de magenta escuro — coloração Ziehl-Neelsen (ZN)
- Crescimento variável (media 2 - 60 dias, depende da espécie)
Estrutura da Parede Celular
Composição da parede celular (lípidos, ácidos micólitos) responsável por grande parte das propriedades características dos isolados deste género bacteriano
Características
- Crescimento lento (M. tuberculosis)
- Resistência ao frio e ao calor (mas não a elevadas temperaturas)
- Resistência à desidratação
- Resistência a biocidas, antibióticos e outros antimicrobianos e à resposta imune do hospedeiro
- Antiginenicidade
- Durante o processo de infeção ocorre uma elevada biossíntese de ácidos micólicos que permite uma maior sobrevivência da bactéria
Crescimento
- O crescimento em forma de cordão serpenteado está associado a uma agregação das células tipo lado a lado e ao entrelaçamento das longas cadeias de bacilos
- Este tipo de crescimento deve-se ao glicolípido, o fator cordão (6,6’-dimicoliltrealose)
- Ativa os macrófagos facilitando a formação de granulomas
Mycobacterium
- As micobactérias são aeróbias obrigatórias
- Energia a partir da oxidação de compostos simples de carbono
- Crescimento lento: Td cerca de 18h
Pigmentação
Algumas micobactérias produzem pigmentos amarelos (carotenóides):
- Fotocromógeneos: somente quando expostos à luz
- Escotocromógeneos: mesmo quando expostos à ausência de luz
- Não-cromógeneos: nunca produzem
Mycobacterium — Espécies e Significado Clínico
- Espécies com relevância clínica
- 4 grupos principais:
» Complexo Mycobacterium tuberculosis (MTBC) — ex.: M. tuberculosis, M. bovis, M. bovis BCG, M. africanum (causam infeções tuberculosas)
» Mycobacterium leprae (agente causador da lepra)
» Mycobacterium ulcerans
» Micobactérias Não-Tuberculosas — M.N.T (várias espécies)
Tuberculose
É uma doença causada pela bactéria Mycobacterium tuberculosis, um bastonete delgado, aeróbio obrigatório. Essa bactéria é ácido resistente, pois a sua parede celular é rica em lípidos, apresentando, também, resistência a desinfetantes e muitos antibióticos
Tuberculose — Uma Perspetiva Global
Maior incidência da doença está maioritariamente nos países em desenvolvimento como a Índia, Paquistão, Indonésia, África Subsaariana, e parte da Europa Oriental e China
Mycobacterium tuberculosis — Transmissão
Os humanos são o único reservatório natural.
M. tuberculosis é transmitida pelo contacto próximo pessoa a pessoa pela via respiratória através da inalação de aerossóis transportadores de partículas infeciosas
Risco elevado de transmissão
- Portadores do HIV
- Fatores sociais (ex.: multidões, sem abrigo)
- Prisões, hospitais
- Emigrantes e migrantes de áreas endémicas
- Viagens
Mycobacterium tuberculosis — Transmissão: Relação direta
- Extensão da propagação da infeção no pulmão
- Quantidade de bacilos libertados (aerossóis/gotículas no ar)
- Frequência de tosse
- Tempo de exposição
- Estado imunológico do indivíduo em risco
No entanto: - Micobactérias: sensíveis à luz ultravioleta (UV)
- Maioria dos doentes não é contagioso 2 semanas após o início do tratamento
Tuberculose — Progressão da Doença
Indivíduos não portadores de HIV: a doença afeta principalmente os pulmões em 80% dos casos
Indivíduos portadores de HIV — até 66% dos pacientes com M. tuberculosis: comprometimento de outros órgãos além dos pulmões
Mycobacterium tuberculosis — Fisiopatologia da Infeção
No período de exposição a bactéria entra nas vias respiratórias e alcança os alvéolos sendo digeridas pelos macrófagos alveolares
M. tuberculosis impede a fusão do fagossoma com os lisossomas, ao inibir a molécula de união específica, o antigénio endosomal específico 1
O fagossoma funde-se com outras vesículas intracelulares facilitando o acesso da bactéria aos nutrientes e a sua replicação no interior do vacúolo
Mycobacterium tuberculosis — Progressão da Tuberculose Latente a Infeção Ativa
TB Latente: a maioria das pessoas não tem sintomas de TB. Não transmitem as micobactérias a outras pessoas. Pode progredir para infeção ativa (raro)
TB Ativa: a maioria das pessoas apresenta sintomas inespecíficos. Transmitem as micobactérias
Mycobacterium tuberculosis — Diagnóstico
Exame físico: radiografia (evidência de doença pulmonar)
Deteta Infeção Latente:
- Imunodiagnóstico:
» teste de tuberculina: derivado purificado da proteína
» ensaios de libertação de interferão-γ
Deteta Infeção Ativa:
- Microscopia:
» coloração de Ziehl-Neelsen (método a quente)
» coloração Kinyoun (método a frio)
» coloração pela auramina-rodamina de Truant
- Cultural:
» meios cultura sólidos
» meios cultura sup/ ovo
» meios líquidos
» métodos culturais automáticos
Mycobacterium tuberculosis — Microscopia
(A) Com dois fluorocromos frequentemente utilizados, auramina O e auramina-rodamina — fluorescência de amarelo a laranja. Uma das desvantagens dos métodos de fluorescência é que alguns dos microrganismos de crescimento rápido podem não corar. Por esta razão, recomenda-se um novo contraste coma coloração de Ziehl-Neelsen ou Kinyoun quando houver suspeita de microrganismos de crescimento rápido
(B) Após incubação em meio líquido, M. tuberculosis forma grandes cordões em serpentina
Mycobacterium tuberculosis — Biologia Molecular
Sistemas moleculares:
- ensaios amplificação de DNA (ex.: Cepheid Xpertt® MTB/rif polymerase chain reaction (PCR))
- sondas (ex.: 16S rRNA, secA)
Sequenciação Genómica Total
- laboratórios de referência: deteção rápida de M. tuberculosis + deteção de genes de resistência a ntibióticos (ex.: rifampicina, isoniazida)
Mycobacterium tuberculosis — Classificação de Resistências
- A aquisição de resistência em M. tuberculosis ocorre devido a mutações espontâneas a cerca de 10^8 divisões celulares
- Mudanças em nucleótidos individuais (point mutations) resultam em resistência a drogas individuais
- A acumulação sequencial destas mutações resulta no aparecimento de multiresistências (TB-MR)
- Para um isolado ser considerado TB-MR tem de ser resistente à RPM e INH
- Atualmente muitas estirpes TB-MR mutaram e tornaram-se mais agressivas evoluindo para o tipo tuberculose extensivamente resistente (TB-XDR)
- As TB-XDR são resistentes a um dos antibacilares de segunda linha injetáveis (amicacina - AM, canamicina - KM e capreocimina - CAP) e a uma fluoroquinilona (FQ)
