Controlo Microbiano Flashcards
Conceitos Básicos no Controlo do Crescimento Microbiano
- Esterilização: destruição/remoção de todas as formas de vida (incluindo vírus, viróides e esporos)
- Desinfeção: não é eliminação, mas inibição da taxa de crescimento. Os desinfetantes são agentes químicos utilizados em objetos inanimados e não asseguram a esterilização, pois os esporos podem permanecer
- Antissético: mesma função do desinfetante, porém aplicável em agente in vivo (tecidos vivos)
- Germicida: destrói microrganismos patogénicos mas não necessariamente endósporos
- Agentes antimicrobianos: substâncias que matam ou inibem o crescimento de microrganismos. Os microbiostáticos inibem o crescimento e os microbiocidas matam
Eficiência do agente antimicrobiano
Depende:
- do tamanho da população
- composição da população
- concentração
- duração da exposição
- temperatura
- ambiente circundante
Normalmente, quando as populações bacterianas são tratadas com substâncias antimicrobianas, elas morrem numa taxa constante. Por exemplo, se num minuto morre 90% da população, no próximo minuto morrerá mais 90% da população restante
Eficiência do agente antimicrobiano — Tamanho da população
Quanto maior a população, mais difícil a eficácia
Eficiência do agente antimicrobiano — Composição da população
Células na fase exponencial é mais fácil. As células jovens são mais suscetíveis do que as células da fase estacionária (são mais resistentes, pois estão a detetar produtos tóxicos e a falta de nutriente, então tem tempo para sintetizar enzimas qua as vão proteger). Existência de endósporos também dificulta
Eficiência do agente antimicrobiano — Concentração
Maior a concentração do agente, mais eficiente ele é. Mas há um ponto de saturação.
Há agentes que são mais eficazes em menor concentração — álcool a 70 é mais eficiente do que a 90%
Eficiência do agente antimicrobiano — Duração da exposição
Entretanto, se deixarmos em demasiado, podemos acabar criando células resistentes
Eficiência do agente antimicrobiano — Ambiente circundante
A gordura é um dos fatores mais protetores das células.
Com tratamento térmico em conjunto com agente acidificante (ácido orgânico), é mais eficiente
Controlo por agentes
Físicos:
- Calor
- Filtração
- Radiações
- Dessecação
Parâmetros
Químicos:
Antibióticos
Quimioterápicos
Bacteriocinas
Antivirais
Antifúngicos
Controlo por agentes Físicos — Calor
TDP (Ponto de morte térmica): mais baixa temperatura para a qual os microrganismos em suspensão são mortos em 10 min
TDT (Tempo de morte térmica): mais curto intervalo de tempo necessário para matar os microrganismos em suspensão, a dada temperatura e sob condições específicas
Tempo de redução decimal. tempo necessário para matar 90% dos microrganismos ou esporos numa amostra a uma temperatura específica
- Calor húmido
- Pasteurização
- Tindalização
- Calor seco
- Incineração
Controlo por agentes Físicos — Calor (Calor húmido)
Saturação da água. Através de pressão. Destrói os ácidos nucleicos e desnatura as enzimas e outras proteínas essenciais, além de destruir as membranas citoplasmáticas
Controlo por agentes Físicos — Calor (Pasteurização)
Tratamento através de temperaturas abaixo do ponto de ebulição (HTST - 72ºC por 15s, UHT - 150º por 1 a 3s).
Elimina microrganismos patogénicos e reduz os microrganismos a fim de retardar a decomposição
Controlo por agentes Físicos — Calor (Tindalização)
O material a ser esterilizado é aquecido entre 90º e 100º durante 30 minutos em três dias consecutivos e incubado durante os intervalos a 37ºC. O primeiro aquecimento destrói as formas vegetativas. Durante a incubação, os esporos germinarão e serão destruídos nos próximos aquecimentos. Há eliminação das formas de endósporos
Controlo por agentes Físicos — Calor (Calor seco)
O material é submetido a temperaturas de 170ºC por 2 a 3 horas (pois o calor seco é menos penetrante do que o húmido). A morte dos microrganismos ocorre por oxidação dos constituintes celulares e desnaturação dos proteínas. A vantagem é que não provoca corrosão do material e é aplicado a vidraria
Controlo por agentes Físicos — Calor (Incineração)
Destruição dos microrganismos por combustão. É aplicado em agulhas, ansas e bisturis
Controlo por agentes Físicos — Filtração
- Utilizada para remover microrganismos em soluções que não possam sofrer tratamentos térmicos, como antibióticos
- Filtração do ar por filtros HEPA: câmaras de fluxo laminar (modelo horizontal protege o material em manipulação, enquanto que o modelo vertical protege o material e o manipulador)
Controlo por agentes Físicos — Radiações
» Não ionizantes — ultravioleta: é letal, mas superficialmente. Provoca ligações anormais no DNA. Possui comprimento de onda entre 220 e 300 nm
» Ionizantes — X e gama: excelente agente e penetra profundamente. Provoca a separação das cadeias do DNA e desnaturação das proteínas. Possui um comprimentos de onda mais curto, transportando mais energia. A radiação gama de uma fonte de cobalto 60 é utilizada para esterilizar antibióticos, hormonas e materiais descartáveis como seringas
Controlo por agentes Físicos — Dessecação
Remoção de água a fim de evitar o crescimento e reprodução de microrganismos (apenas deles permanecerem viáveis). Processo utilizado na conservação da carne, peixe e frutos
Controlo por agentes —Parâmetros
Concentração mínima inibitória (MIC): concentração mínima do agente em que inibimos o crescimento do microrganismo alvo
Concentração mínima bactericida (MBC): concentração mínima do agente em que eliminamos as células (para eliminar o crescimento do microrganismo alvo)
Controlo por agentes — Químicos
- Fenol: inativa e interage com o DNA
- Álcool: desnaturação de proteínas e dissolução dos lipídeos
- Halogénios: iodo e cloro são agentes oxidantes. O cloro forma o ácido hipocloroso, que altera componentes celulares. As cloraminas são compostos orgânicos de cloro — são estáveis e libertam cloro durante períodos mais prolongados do que os hipocloritos (de cálcio e sódio)
- Metais pesados (mercúrio, chumbo, zinco, prata e cobre): ligam-se as enzimas e impedem a sua atividade (ação oligodinâmica). O cobre é altamente bactericida (por isso não são detetados microrganismos nas moedas, por exemplo). Mercúrio também é um bom desinfetante
- Detergentes: compostos anfipáticos tensio-ativos. Ele rompe a tensão superficial da água, tornando-a “mais molhável”. A parte não polar se ligará às gorduras
» Aniónicos ou catiónicos (mais utilizados). Eles também inativam as proteínas e rompem a membrana citoplasmática, pois se ligam as proteínas transmembranares
Agente Microbiano ideal
Deve:
- Ser eficaz a baixas concentrações
- Ter um largo espectro de ação
- Ser solúvel
- Ter estabilidade mesmo por períodos longos à temperatura ambiente
- Ter toxicidade reduzida ou inexiste para o homem e outros animais
- Ter homogeneidade, tendo uma composição uniforme
- Ser capaz de sofrer inatividade consoante à combinação com outros produtos
- Ter capacidade de penetração, pois a ação superficial pode ser ineficaz
- Não ser corrosivo nem corante
- Ser inodoro ou com cheiro leve
- Capacidade detergente, auxiliando na remoção mecânica dos microrganismos da superfícies
- Económico
Controlo por agentes — Antibióticos
São produzidos por via biológica (microrganismos que em pequenas doses inibem ou matam outros microrganismos). O objetivo da produção de antibióticos produzidos por uma bactéria é a proteção do nicho
» Nos antibióticos, o alvo é a parede celular
» A penicilina atua melhor nas bactérias gram-positivas. A penicilina apresente um anel β-lactâmico e impede a ligação entre os peptidoglicanos, o que interfere na construção da parede celular. Não tem ação nas gram-negativas, pois a camada de peptidoglicano é mais fina
Controlo por agentes — Quimioterápicos
São via síntese. São mais específicos do que os antibióticos, apresentando toxicidade seletiva (inibem o agente patogénico, mas são inofensivos para o hospedeiro)
Controlo por agentes — Bacteriocinas
São produzidas para defender o nicho e tem natureza peptídica, que inibem a parede celular. Tem ação antimicrobiana dirigida contra organismos da mesma espécie.
As bactérias lácticas são as melhores fontes de bacteriocinas
Controlo por agentes — Antivirais
Capacidade de inibir diretamente uma das fases de replicação dos vírus ou de estimular resposta imunológica ou induzir um estado antiviral na célula não infetada (interferão). O interferão (IFN) é um conjunto de proteínas produzido pelas células em resposta a uma infeção por um vírus
» Aciclovir impede a replicação do DNA do vírus. Utilizado em tratamento contra varicela e herpes labial
Controlo por agentes — Antifúngicos
Tem ação limitada devido à possível toxicidade.
Métodos de avaliação microbiana:
- Método de macrodiluição: observa-se o meio límpido
- Kirby-Bauer ou Difusão em agar
- Teste “ípsilon”: quanto maior o halo de inibição mais eficaz é o composto
- Microrganismo suscetível versus resistente
