Caracterização, Classificação e Identificação

Question 1

Célula

Answer 1

Unidade básica de qualquer microrganismo

Question 2

Capacidade dos seres vivos

Answer 2

1. Utilização de alimentos como fonte de energia
2. Síntese de substâncias e formação de estruturas celulares
3. Excreção
4. Resposta a estímulos exteriores e alterações do ambiente
5. Multiplicação
6. Mutação

Question 3

Principais características dos microrganismos

Answer 3

• Culturais: nutrientes e condições físicas que proporcionam o crescimento
• Morfológicas: forma e dimensão da célula, agrupamento, diferenciação e identificação de culturas
• Metabólicas: conjunto de processos químicos vitais pelos microrganismos
• Composição química: identificação dos principais constituintes químicos da célula microbiana
• Ecológicos: ocorrência no meio ambiente e relações com outros organismos
• Genéticos: hereditariedade e variabilidade

Question 4

Taxonomia

Answer 4

Ciência que se ocupa da classificação (arranjo), nomenclatura (denominação), e identificação (descrição e caracterização)

Question 5

Classificação dos seres vivos – Carl Linnaeus

Answer 5

Animalia: protozoários, animais superiores
Plantae: bactérias, fungos, algas, plantas

Question 6

Classificação dos seres vivos – Ernest Haeckel

Answer 6

Animalia: animais
Plantae: plantas e algas pluricelulares
Protista: bactérias, algas, protozoários, bolores e leveduras

Question 7

Classificação dos seres vivos – Robert Whittaker

Answer 7

Monera: bactérias
Protista: protozoários e algas unicelulares
Fungi:bolores e leveduras
Plantae: plantas e algas prluricelulares
Animalia: animais

Baseou-se no modo de nutrição

Question 8

Teoria da Simbiogénese

Answer 8

Segundo esta teoria, as mitocôndrias tiveram origem nas bactérias aeróbias (proteobactérias) e os cloroplastos a partir das cianobactérias

Question 9

Classificação dos seres vivos – Carl Woese

Answer 9

Domínio Archaea: bactérias produtoras de metano, halófilas e termófilas
Reino Bacteria: restantes bactérias
Domínio Eucarya: protozoários, algas, fungos, plantas, animais

Baseou-se valor filogenético das sequências nucleotídicas de rRNA de várias bactérias e dos eucariontes

Question 10

Domínios – Eucarya

Answer 10

Engloba os organismos eucarióticos com membranas lipídica constituída por diésteres de glicerol e com rRNA eucarióticos

Question 11

Domínios – Bacteria

Answer 11

Contém células procariotas com rRNA bacteriano e lípidos membranares que são glicerol diacil diésteres

Question 12

Domínios – Archaea

Answer 12

Composto por procariontas que contêm isoprenoite glicerol diéter ou diglicerol tetraeter nas suas membranas e rRNA archaea

Question 13

Classificação prática

Answer 13

Animais
Plantas
Fungos
Algas
Protozoários
Bactérias

Question 14

Classificação estrutural

Answer 14

Eucariontes
Procariontes

Question 15

Classificação molecular

Answer 15

Eucariontes
Bactérias
Arqueobactérias

Question 16

Grupos taxonómicos

Answer 16

1. Domínio
2. Filo
3. Classe
4. Ordem
5. Família
6. Género
7. Espécie

Question 17

Sistema binomial de nomenclatura de Linnaeus

Answer 17

Este sistema é adotado em bacteriologia
- O organismo é designado pela combinação de nome e género e da espécie
- O grupo taxónico básico em sistemática bacteriana é a espécie
- Uma espécie bacteriana pode ser considerada como uma coleção de estirpes que têm em comum muitas características
- Uma estirpe é constituída peoas descendentes de um único isolado em cultura obtida, geralmente através de uma sequência de culturas oriundas de uma única célula
- Estipe tipo ou conceito populacional de espécie

Question 18

Estirpe em bacteriologia

Answer 18

Conjunto de microrganismos bacterianos da mesma espécie e que partilham as mesmas características

Question 19

Meios de cultura

Answer 19

Nutrientes necessários ao crescimento e as condições físicas do ambiente que proporcionam o crescimento
Critério:
- Estado físico:
* líquido
* sólido
- Composição química:
* complexos
* definido
- Objetivo:
* simples
* seletivo
* diferencial
* enriquecido

Question 20

Cultura pura

Answer 20

Todas as células na população são, por princípio, idênticas uma vez que foram originadas a partir de uma só célula

Question 21

Meio definido

Answer 21

Conhece-se a quantidade exata de cada composto
A composição varia de acordo com as exigências nutricionais do microrganismo
Ex: Escherichia coli

Question 22

Meio complexo

Answer 22

Contem todos os compostos necessários para o crescimento de um determinado microrganismo, mas não se conhecem as quantidades exatas de cada composto
Ex: Escherichia coli e Lauconostoc mesenteroides

Question 23

Modo seletivo

Answer 23

O crescimento de determinado grupo é privilegiado (selecionado) através de substâncias que inibem o crescimento de outros microrganismos distintos dos de interesse
Ex: Salmonella

Question 24

Modo diferencial

Answer 24

Permite a distinção do microrganismo de interesse através das características bioquímicas
Ex: Principio do funcionamento do meio seletivo e diferencial Salmonella e Shigella Agar

Question 25

Meio sólido/líquido

Answer 25

Para obtenção de meio sólido, adiciona-se agar a 1,5% (p/v) ao meio líquido
O agar funde-se a partir de 90-95ºC e e solidifica-se a partir de 45ºC, e é extraído de algas marinhas vermelhas da classe Rodophyta

» A utilização do agar é mais vantajosa que da gelatina pois ele solidifica a temperaturas mais elevadas e não é utilizado pelos microrganismos

Question 26

Isolamento de culturas

Answer 26

Obter uma colónia com origem numa única célula, cultura pura
Inoculação refere-se ao ato de introduzir microrganismos ou suspensões de microrganismos. As bactérias podem ser inoculadas em:
- meio líquido
- meio sólido:
* riscado (4 zonas de risco: zona 1 mais concentrada; zona 2 menos concentrada, numa posição quase perpendicular à zona 1; zona 3 menos concentrada , numa posição quase perpendicular à zona 2; zona 4 com colónias isoladas, numa posição quase perpendicular à zona 3)
* espalhamento (vidro ou descartável; espalhar uma diluição apropriada da amostra na superfcie do meio sólido)

Question 27

Método por Incorporação

Answer 27

A amostra diluída é pipetada diretamente sobre a placa de Petri e só depois é adicionado o meio de cultura sólido apropriado, no estado liquefeito.
Neste método obtêm-se colónias à superfície e no interior do agar.
Em todos os métodos, as placas devem ser incubadas em posição invertida
A temperatura e tempo de incubação dependem do microrganismo em causa

Question 28

Método de Conservação

Answer 28

• Refrigeração a 4ºC (cultura de trabalho)
• Congelação a -80ºC (adição de um agente crioprotetor como, por exemplo, glicerol 25%) (cultura de manutenção)
• Conservação em azoto líquido (-196ºC)
• Liofilização: processo de desidratação em que o meio é congelado sob vácuo e o gelo formado, sublimado (-20ºC) (melhor a longo prazo)

Question 29

Características morfológicas

Answer 29

• Descrição da colónia
• Reação Gram
• Tamanho da célula
• Flagelo
• Produção de esporos
• Presença de corpos de inclusão (PHB, vesículas de gás, magnetosomas,…)
• Mobilidade (imóvel, por deslizamento, flagelar,…)

Question 30

Métodos Genotípicos

Answer 30

Distinguir bactérias.
- Hibridação DNA-DNA
- Perfil de DNA
- Multilocus sequence typing
- Teor de GC

Question 31

Métodos Genotípicos – Hibridação DNA-DNA

Answer 31

Análise comparativa ao nível das semelhanças ao nível das semelhanças do genoma total
Útil na distinção de espécies dentro de um género

Question 32

Métodos Genotípicos – Perfil de DNA

Answer 32

Ribotipagem, AFLP, rep-PCR
Métodos rápidos para distinguir as espécies e as estirpes dentro de uma espécie

Question 33

Métodos Genotípicos – Multilocus sequence typing

Answer 33

Tipagem das estipes através das sequências de DNA múltiplos genes.
Elevada resolução, útil na distinção de estirpe relacionadas

Question 34

Métodos Genetípicos – Teor de GC

Answer 34

Percentagem de guanina mais citosina presente no genoma
É menos usada em taxonomia devido à sua menor resolução.
Se a taxa de GC em 2 organismos difere >5% então não têm uma relação próxima, e organismos com um teor semelhante ou mesmo idêntico de GC podem não ser de todo relacionados