Morfologisk cytologi Flashcards
Vad är det man diagnosticerar vid cytologi?
Gynekologiska prover, exfoliativ cytologi, aspirationscytologi, finnålspunktion
Vad finns det för olika provtyper som kommer in till cytologin?
- Exsudat: (pleura)
- sköljvätska: (tex från urinblåsa)
- Borstprov: (tex från lunga)
- punktioner: (tex bröst eller pankreas)
- spermier.
- sputum: (djupt upphostningsprov)
vad finns det för olika färgningsmetoder ?
- ofixerat
- etanol
- met/ätt
- cytolot
- glas(luft/etanol)
Hur transporteras dessa prover på bästa sätt?
Bland annat i cytolyt:
- transport/förvarings medium bevarar morfologin i upp till 8 dagar i rumstemperatur
- Lyserar röda blodkroppar
- Förebygger protein precipitation
- Löser upp mucus
En annan är preservcyt
- Fixering (rumstemperatur)
Hur fungerar och vad åstadkommer fixering med etanol?
- Olika procent av etanol (för att man vill avbryta nedbrytning vill bevara cellkärnan- för att denna kollar man på under diagnos)
- Cytolyt 20% buffrad etanol
- preserve 40% metanol
- Förhindrar nedbrytning av vävnad
- Kärnmembranet blir skarpt tydliga detaljet i kärnan.
Ge exempel på vad som händer med proverna efter fixering ? Vilka prover går vart ?
- Ofix vätska, Met/ättika, cytolytrör–> är alla prover som kan gå vidare till PAP.
- Ofix vätska och luft glas kan gå till MGG utstryk+mm
- Cytolytrör, spritfix vätska och spritfix glas kan alla gå via HTX färgning
Vad är det första steget ovadsätt prov?
Centrifugering
Vad får vi ut av att centrifugera prover ?
- De är utstryk av cellmaterial från vätskefas görs efter att materialet koncentrerats.
- Vid centrifugering är det viktigt att inte cetrifugera provet för hastigt, då pelleten som bildas kan bli för hård för bearbetning.
- olika program beroende på provtyp
Vad ska tillsättas om pellet är osynlig ?
vätska från prevervcyt till provröret. vortexa mycket för att få en homogen lösning av pellet, häll tillbaka till prevervcyt burken
Vad ska göras om pellet är klar och mer än 1 ml?
Överför 2 droppar av pellet till prevervcyt burken.
Hur kan pellet se ut?
- pellet är vit, belk rosa, beige eller osynlig.
- pellet är mörk röd eller brun
- pellet är mjölkig eller slemmig (inte vätska)
Vad är cytolyt tvättat prov?
De görs speciellt vid blodiga prover för att rena–> inte säkert att de blir bättre efter tvätt
Hur går metod lysering (tvätt) till?
- Tillsätt cytolyt solution till blodig pellet
- Centrifugera
- Häll av supertant och vortexa för att blanda pellet
- Max 2 cytolyt tvätt
Detta görs bland annat för att bli av med erytrocyterna
Vad menas med en ring i objektsglaset ?
Det tyder på att cellerna läger sig i kanten
Vad är viktigt vid avhällning av superntant ?
Att man blir av med så mycket superntant som möjligt men att man häller ut de försiktigt.
När används DTT och varför ?
Används vid övreluftvägarna för att få bort bronk, borstprov mm. Det bryter svavelbindningarna i mucinet, utan att förstöra cellers struktur.
Vad gör DTT med provet ?
Dem tar bort det trådiga i provet som gör att cellerna inte längre missas. Får då en ren bakgrund
Hur fungerar visualisering på cytologen?
Rutin färgningar på cytologen:
- papanikolaou (PAP)
- May- Grunewald Giemsa (MGG)
- Diffquik (DQ)
Specialfärgningar/önskemål
- hematoxylin(HTX) och esoin
- ZN (syre…)
- PAS (viss typ av malignitet)
- IHC (massa andra typer)
Vad är May-grundwald Giemsa för färgning?
- Kombination av may grundwald (eosin, metylenblått och metanol) och geimsa (Azur B, eosin Y, glicerin och metanol)
- Färgar cytoplasma (ffa granula) samt cellkärnor.
- sura och basiska färger –> nyans rikt resultat
- Används på luftfixerade glas
Vad är PAP-färgning ?
Består av kärnfärg hematoxylin (blå/lila) cytoplasmafärg (OG och EA)-(röd/rosa).
Vad går preparatet igenom vid PAP-färgning?
- Rehydrering –> förbereder cellmaterialet för bindning av kärnfärg
- Kärnfärgning med hematoxylin
- Differentiering –> tar bort överflödet av hematocylin
- Blåning–> återställer ett alkalisk pH, rött-blått
- Cytoplasmafärgning–> eosin
- Dehydrering–> differentering av cytoplasmafärgen
- montering
Vad är hematoxylin och eosin färgning ?
Översiktsfärgning för alla paraffin inbäddade preparat.
- hematoxylin= kärnfärgning -> röd
Blåning= cellkärnorna som var röda blir -> blå
- Eosin= cytoplasma färg
Vad är ROSE (rapid on sight evaluation) ?
- Punktioner assisterade av cytodiagnostiker
- Morfologisk bedömning samt en uppskattning av adekvat cellmaterial
- Går ner i halsen med kamera och nål för att sticka i tumör
Hur fungerar Diffquik?
Detta används vid ROSE 1. Fixering i 5 sekunder (abs.) 2. färgning med eosin i 5 sekunder 3. kärnfärgning med HTX i 5-10 sek 4. sköljning i destellerat vatten i 10 sek progressiv kärnfärgning
vad gör immunohistokemi?
- -> komplement till morfologisk diagnostik
- odifferentierad malignitet
- subtypning tex lymfom
- tumörens ursprung
- prognos och behandling
Vad är cellblock ?
- celler i suspension centrifugeras ned till en pellet
- peller dehydreras och prepareras till en paraffinkloss
- snittning
- FISH, IHC
- -> dem påverkas inte något av detta. Det som bleks är själva färgningen
