Morfologisk cytologi

Question 1

Vad är det man diagnosticerar vid cytologi?

Answer 1

Gynekologiska prover, exfoliativ cytologi, aspirationscytologi, finnålspunktion

Question 2

Vad finns det för olika provtyper som kommer in till cytologin?

Answer 2

• Exsudat: (pleura)
• sköljvätska: (tex från urinblåsa)
• Borstprov: (tex från lunga)
• punktioner: (tex bröst eller pankreas)
• spermier.
• sputum: (djupt upphostningsprov)

Question 3

vad finns det för olika färgningsmetoder ?

Answer 3

• ofixerat
• etanol
• met/ätt
• cytolot
• glas(luft/etanol)

Question 4

Hur transporteras dessa prover på bästa sätt?

Answer 4

Bland annat i cytolyt:

• transport/förvarings medium bevarar morfologin i upp till 8 dagar i rumstemperatur
• Lyserar röda blodkroppar
• Förebygger protein precipitation
• Löser upp mucus

En annan är preservcyt
- Fixering (rumstemperatur)

Question 5

Hur fungerar och vad åstadkommer fixering med etanol?

Answer 5

• Olika procent av etanol (för att man vill avbryta nedbrytning vill bevara cellkärnan- för att denna kollar man på under diagnos)
• Cytolyt 20% buffrad etanol
• preserve 40% metanol
• Förhindrar nedbrytning av vävnad
• Kärnmembranet blir skarpt tydliga detaljet i kärnan.

Question 6

Ge exempel på vad som händer med proverna efter fixering ? Vilka prover går vart ?

Answer 6

• Ofix vätska, Met/ättika, cytolytrör–> är alla prover som kan gå vidare till PAP.
• Ofix vätska och luft glas kan gå till MGG utstryk+mm
• Cytolytrör, spritfix vätska och spritfix glas kan alla gå via HTX färgning

Question 7

Vad är det första steget ovadsätt prov?

Answer 7

Centrifugering

Question 8

Vad får vi ut av att centrifugera prover ?

Answer 8

• De är utstryk av cellmaterial från vätskefas görs efter att materialet koncentrerats.
• Vid centrifugering är det viktigt att inte cetrifugera provet för hastigt, då pelleten som bildas kan bli för hård för bearbetning.
• olika program beroende på provtyp

Question 9

Vad ska tillsättas om pellet är osynlig ?

Answer 9

vätska från prevervcyt till provröret. vortexa mycket för att få en homogen lösning av pellet, häll tillbaka till prevervcyt burken

Question 10

Vad ska göras om pellet är klar och mer än 1 ml?

Answer 10

Överför 2 droppar av pellet till prevervcyt burken.

Question 11

Hur kan pellet se ut?

Answer 11

1. pellet är vit, belk rosa, beige eller osynlig.
2. pellet är mörk röd eller brun
3. pellet är mjölkig eller slemmig (inte vätska)

Question 12

Vad är cytolyt tvättat prov?

Answer 12

De görs speciellt vid blodiga prover för att rena–> inte säkert att de blir bättre efter tvätt

Question 13

Hur går metod lysering (tvätt) till?

Answer 13

• Tillsätt cytolyt solution till blodig pellet
• Centrifugera
• Häll av supertant och vortexa för att blanda pellet
• Max 2 cytolyt tvätt
  Detta görs bland annat för att bli av med erytrocyterna

Question 14

Vad menas med en ring i objektsglaset ?

Answer 14

Det tyder på att cellerna läger sig i kanten

Question 15

Vad är viktigt vid avhällning av superntant ?

Answer 15

Att man blir av med så mycket superntant som möjligt men att man häller ut de försiktigt.

Question 16

När används DTT och varför ?

Answer 16

Används vid övreluftvägarna för att få bort bronk, borstprov mm. Det bryter svavelbindningarna i mucinet, utan att förstöra cellers struktur.

Question 17

Vad gör DTT med provet ?

Answer 17

Dem tar bort det trådiga i provet som gör att cellerna inte längre missas. Får då en ren bakgrund

Question 18

Hur fungerar visualisering på cytologen?

Answer 18

Rutin färgningar på cytologen:

• papanikolaou (PAP)
• May- Grunewald Giemsa (MGG)
• Diffquik (DQ)

Specialfärgningar/önskemål

• hematoxylin(HTX) och esoin
• ZN (syre…)
• PAS (viss typ av malignitet)
• IHC (massa andra typer)

Question 19

Vad är May-grundwald Giemsa för färgning?

Answer 19

• Kombination av may grundwald (eosin, metylenblått och metanol) och geimsa (Azur B, eosin Y, glicerin och metanol)
• Färgar cytoplasma (ffa granula) samt cellkärnor.
• sura och basiska färger –> nyans rikt resultat
• Används på luftfixerade glas

Question 20

Vad är PAP-färgning ?

Answer 20

Består av kärnfärg hematoxylin (blå/lila) cytoplasmafärg (OG och EA)-(röd/rosa).

Question 21

Vad går preparatet igenom vid PAP-färgning?

Answer 21

1. Rehydrering –> förbereder cellmaterialet för bindning av kärnfärg
2. Kärnfärgning med hematoxylin
3. Differentiering –> tar bort överflödet av hematocylin
4. Blåning–> återställer ett alkalisk pH, rött-blått
5. Cytoplasmafärgning–> eosin
6. Dehydrering–> differentering av cytoplasmafärgen
7. montering

Question 22

Vad är hematoxylin och eosin färgning ?

Answer 22

Översiktsfärgning för alla paraffin inbäddade preparat.
- hematoxylin= kärnfärgning -> röd
Blåning= cellkärnorna som var röda blir -> blå
- Eosin= cytoplasma färg

Question 23

Vad är ROSE (rapid on sight evaluation) ?

Answer 23

• Punktioner assisterade av cytodiagnostiker
• Morfologisk bedömning samt en uppskattning av adekvat cellmaterial
• Går ner i halsen med kamera och nål för att sticka i tumör

Question 24

Hur fungerar Diffquik?

Answer 24

Detta används vid ROSE
1. Fixering i 5 sekunder (abs.) 
2. färgning med eosin i 5 sekunder 
3. kärnfärgning med HTX i 5-10 sek
4. sköljning i destellerat vatten i 10 sek
 progressiv kärnfärgning

Question 25

vad gör immunohistokemi?

Answer 25

• -> komplement till morfologisk diagnostik
• odifferentierad malignitet
• subtypning tex lymfom
• tumörens ursprung
• prognos och behandling

Question 26

Vad är cellblock ?

Answer 26

• celler i suspension centrifugeras ned till en pellet
• peller dehydreras och prepareras till en paraffinkloss
• snittning
• FISH, IHC
• -> dem påverkas inte något av detta. Det som bleks är själva färgningen