Elektronmikroskopi "EM" Flashcards
Vad används em till ?
Inom biologi, medicin, industriell och för diagnostik
Skillnad mellan TEM (transmissionselektronmikroskopi) och SEM (svepelektronmikroskopi) ?
TEM= genomstrålning av tunna obejekt --> 2D bilder SEM= ljuset går bara på yta
Varför EM?
- Ljusmikroskopi: ger en översiktsbild av vävnaden eller av hundratals celler
- TEM: visar en detaljerad bild av celler och dess organeller (ser inuti)
- SEM: visar ytstrukturen på celler och vävnader
Vad är viktigt vid upplösning/förstoring?
Viktigt! minsta distans mellan två punkter som kan ses åtskilda.
LM- 200nm
EM- 0.1 nm
mikroskopets förstoring gör dess upplösningsförmåga synlig för vårt öga.
Vad är upplösningsförmågans definiering?
minsta möjliga avstånd när två objekt kan ses som skilda, snarare än som ett enda sammanflytande
Vad ger bilden på de olika mikroskopen ?
LM= glödlampa, fotoner. Våglängd ca 500nm. EM= Elektroner. Våglängd 1000ggr. (denna ger en mycket större förstoring.
Hur fungerar elektronkanon? förkara vad anoden och wehneltcylinder…
Elektronkällor i form av:
- Glödtråd, wolframtråd upphettas
till vitglödning; e- lossnar och det bildas ett elektronmoln
- LaB6
- FEG
Wehneltcylindern: sitter runt glödtråden, samlar elektronerna och låter dessa strömma genom ett litet hål mot anoden.
ANODEN: en smal cylinder mot emot katoden, som är starkt positivt laddad, liksom resten av instrumentet.
Varför behövs spänning framför allt “högre” vid EM?
Elektroderna är i sig själva ganska energifattiga och har därför dålig förmåga att genomstråla ett objekt.
- Starkt spänning, nödvändig för att öka elektronernas rörelsehastighet
- Ju högre spänning desto högre energi och desto högre hastighet.
Hur fungerar vakuumsystem ?
Har högvakuum för att att undvika kollision mellan elektroner och luftmolekyler, vilket leder till minskad rörelseenergi hos elektroner och bildning av fotoner
Hur fungerar linssystemet?
Linserna i ett EM består av elektromagnetiska fält. Med hjälp av elström, som genomströmmar en spole med en kärna av järn, riktas eletronen mot en bestämd punkt.
Hur uppför sig elektroner i ett elektromagnetiskt fält
- Elektronerna som ej är i rörelse påverkas inget alls av de.
- Elektroner som rör sig parallelt med magnetfältet påverkas inte heller.
- Elektroner som passerar vinkelrätt igenom ett magnetfält påverkas så att de kommer att röra sig i en spiralbana runt magnetfältets axel och kommer att korsa axeln i en bestämd punkt= fokalpunkten
Vad har fokalpunkten med förstoring att göra?
- Fokalpunktens läge i förhållande till linsområde är viktigt för förstoringsgraden.
- Ju kortare fokal avstånd desto högre förstoring.
- För att nå högupplösning behöver man hög accelerationshastighet på elektroner, vilket leder till stor fokallängd. Detta kompenseras genom att man ökar magnetfältsstyrkan.
Hur fungerar objektkammare ?
- Objektkammare ligger under kondensor -linsen, isolerad från omvärlden och kolonnen genom ett vakuumlås
- Kammaren fungerar som en sluss. Med hjälp av vakuumpumpar erhålles tillräckligt vakuum innan man för objektet vidare in i kolonnen.
Vad är elektronens påverkan av atomerna i preparatet ?
Ett visst antal elektroner penetrerar preparatet nästan opåverkade, ju tunnare preparat desto minder påverkan.
–> dessa elektroner ger bakgrunds ljus
Vad händer med elektroner som kolliderar/attraheras av en atomkärna i preparatet?
Elektroner som kolliderar eller attraheras av atomkärnor i preparatet genomgår en sk. elastisk spridning utan högre energiförlust- Ju högre atom vikt desto starkar avlänkning.
–> I TEM sorteras dessa bort vilket leder till kontrast i bilden. För att öka metall behandlas preparaten med tungmetaller
