Inför immunologisk laboration

Question 1

Vad finns det för vanliga prostata sjukdomar ?

Answer 1

• Benign prostatahyperplasi (BPH)
• Prostatit– bakteriell eller kronisk
• Maligna förändringar: prostatacancer, vanligt hos äldre män. (vanligaste elakartade cancer hos män över 65år)=döden.

Question 2

Vad är prostataspecifikt antigen= PSA?

Answer 2

• Är ett enkelkedjat glykoprotein
• Produceras i prostatans körtelepitel
• Finns normalt i prostatgångarna, det PSA som finns i blodet är bara det lilla som läcker ut.
• PSA- halten varierar under dygnet (marginellt)

Question 3

Vart finns PSA normalt ?

Answer 3

Det finns i sädesvätskan och i blod. Koncentrationen ökar med ökande ålder.

Question 4

Vad ska finnas på en PAD-remiss?

Answer 4

INFO

1. PSA-värde
2. T-stadium: klinisk bedömning hur prostata känns (T1= normal T2= tumör T3=tumör +penetrerar kapseln T4= tumör som invaderar runt om vävnaden)
3. övrig information: kort klinisk info, ibland körtelstorlek.

Question 5

Vad får vi in som material till patologen ?

Answer 5

TURP= transurethral Resection of the prostate

Question 6

Vad är Adenocarcinom ?

Answer 6

En elakartad (malign) tumör av typen carcinom

Question 7

Vad pågår inom forskningen för prostatasjukdomar?

Answer 7

• Nya biomarkörer som ger mer information än PSA, Cirkulerande tumörceller (CTC)
• screeningstudie

Question 8

Hur går visualiseringen med immunologisk metod till här?

Answer 8

• Deparaffinering
• Rehydrering
• Ak. i ett el. flera steg
• ”Framkallning” av färg
• Dehydrering
• Montering av täckglas
• Mikroskopering

Question 9

Vad behövs det för material ?

Answer 9

paraffinkloss, glaskyvett, paraffinsnitt, automatpipett, “färgbord”, TURP

Question 10

Vad kan streptavidin göra?

Answer 10

protein som saknar sockerenheter vilka man tror kan ge falsk positiv inmärkning. Extraheras ur mediet efter odling av bakterien ”Streptomyces avidini”.

Question 11

Vad finns det för makörer på antikropparna ?

Answer 11

• Enzymer (peroxidas)
• Fluorokromr (rodamin)
• Metaller (guld)
• isotoper
• Biotin (vitaminH)

Question 12

Varför blir det falskt positivt analyssvar?

Answer 12

–> Antikroppen binder till fel epitoper eller flera olika epitoper (dålig specificitet)

Question 13

Varför blir det falskt negativt analyssvar?

Answer 13

• ->Prepareringen har förstört epitoperna
• -> Epitoperna är maskerade
• ->Glömt ak./annat vid visualiseringsmetoden
• -> För svag koncentration på antikropparna
• -> Paraffin kvar på snittet

Question 14

Hur sker de olika fixerings metoderna här?

Answer 14

• -> Denaturerande fix. medel (ex. aceton, etanol, metanol) förändrar proteinernas form (proteinerna bryts upp o tvärbinder med andra proteiner).
• -> Gelerande fix. medel (ex. formaldehyd, glutaraldehyd) bibehåller strukturen.

Question 15

Vad gör antigen- retrieval ?

Answer 15

Antigen retrieval frilägger epitoper som blivit gömda.

Question 16

Vad för kontroller finns vid denna analys?

Answer 16

• Negativa kontroller: Utelämna primärantikropp- utelämna alla antikroppar
• Positiv kontroller: Positiv testvävnad, graderas, endast viss styrka på inmärkningen godkänns.

Question 17

Vad är viktigt att veta kring Väteperoxid?

Answer 17

Att den är starkt oxiderade och kan ge frätskador.

Question 18

Vad är DAB?

Answer 18

Cancerogent ämne, Handskar och annan skyddsutrustning krävs.