Module 6

Question 1

Que signifie le terme valide?

Answer 1

« Se dit d’un test qui mesure effectivement ce qu’il est censé mesurer » ;

« Se dit de ce qui répond à des lois et à des règles, les unes et les autres étant posées préalablement » ;

« Qui satisfait aux conditions pour produire ses effets ».

Question 2

Que signifie le terme méthode d’analyse?

Answer 2

Une méthode d’analyse est la manière dont une analyse est réalisée. Chaque étape doit être décrite en détail.

Il faut décrire notamment, mais non exclusivement :

• la préparation de l’échantillon à analyser
• la préparation de l’étalon de référence et des réactifs
• l’utilisation des appareils
• la production de la courbe standard d’étalonnage (s’il y a lieu)
• l’interprétation des résultats (l’application des formules de calcul, etc.)

Question 3

Quel est le principe fondamental de la validation de méthode d’analyse?

Answer 3

Le principe fondamental de la validation de méthode d’analyse est de démontrer que la méthode détecte ou quantifie bien la substance devant être détectée, avec le minimum d’erreurs, et que les variables qui peuvent affecter l’efficacité de la méthode soient connues et analysées.

Question 4

Quelles procédure réglementaire sont légalement reconnues par les autorités réglementaires?

Answer 4

Pour évaluer les caractéristiques d’un médicament, certaines méthodes d’analyse dites réglementaires telles que les procédures analytiques de l’U.S. Pharmacopeia (USP compendial procedures) sont légalement reconnues par les autorités réglementaires.

Question 5

Vrai ou Faux

Les méthodes d’analyse proposées par le fabricant et dites alternatives doivent être validées et être aussi bien, sinon plus performantes que les méthodes réglementaires.

Answer 5

Vrai

Question 6

Les exigences minimales de validation dépendent de quoi?

Answer 6

Les exigences minimales de validation dépendent de plusieurs facteurs, incluant le stade de développement du produit à tester et surtout l’objectif de l’analyse, c’est-à-dire comment et pourquoi la méthode va être utilisée.

Question 7

Vrai ou Faux

Bien que certaines règles de base soient définies, il n’y a pas de règles clairement établies pour définir le niveau de validation requis.

Answer 7

Vrai

Question 8

Le conseil international d’harmonisation des exigences techniques pour l’enregistrement des médicaments à usage humain (CIH) divise les méthodes d’analyse en combien de types?

Answer 8

en quatre types et propose des tests de performance qui devraient être inclus dans la validation.

Question 9

Quels sont les types de méthode d’analyse à valider?

Answer 9

1. Test d’identification ; pour vérifier l’identité de la substance analysée dans un échantillon.
2. Dosage quantitatif des impuretés ; pour évaluer avec exactitude la pureté de l’échantillon.
3. Vérification d’une teneur limite des impuretés ; pour évaluer avec exactitude la pureté de l’échantillon. (La validation d’une méthode de dosage diffère d’une méthode de vérification d’une teneur limite).
4. Dosage de la partie active ou d’une ou plusieurs composantes de la substance médicamenteuse ou du produit fini.

Question 10

Au moment de choisir les tests de performance pour valider une méthode d’analyse, il est important de tenir compte de quoi?

Answer 10

De la nature de celle-ci

Question 11

Vrai ou Faux

Comme les méthodes d’analyse physico-chimiques (ex. : HPLC, spectrométrie de masse) sont reconnues comme étant plus exactes et reproductibles que les méthodes biologiques (essais avec des cellules, essais immunologiques), les critères d’acceptation en seront plus légères.

Answer 11

Faux

Comme les méthodes d’analyse physico-chimiques (ex. : HPLC, spectrométrie de masse) sont reconnues comme étant plus exactes et reproductibles que les méthodes biologiques (essais avec des cellules, essais immunologiques), les critères d’acceptation en seront plus sévères.

Question 12

Les essaies biologiques, qui font appel à des cellules, représentent quoi?

Answer 12

Un défi particulier à cause de la grande variabilité des résultats

Question 13

Qu’est-ce que les méthodes dites bio analytiques?

Answer 13

les méthodes d’analyse servant spécifiquement à quantifier des substances dans une matrice biologique telles que le sang, le sérum, le plasma et l’urine, seront évaluées de façon plus poussée pour en vérifier la stabilité des échantillons.

Question 14

Puisque les fluides biologiques sont affectés par les conditions d’entreposage, qu’est-ce qui doit être analysé?

Answer 14

la stabilité de la substance à analyser doit être évaluée sous différentes conditions d’entreposage (par exemple ; après plusieurs cycles de gel/dégel, à différentes températures ou à différents degrés d’humidité).

Question 15

Quelles sont les mesures à considérer avant d’effectuer la validation, quelle que soit la méthode d’analyse?

Answer 15

S’assurer que nos équipements sont tout d’abord bien qualifiés.

Les méthodes doivent contenir, entre autres, les informations concernant le prélèvement et la préparation de l’échantillon soumis à l’analyse.

Les méthodes doivent contenir toutes les conditions instrumentales nécessaires et le mode de préparation des réactifs et autres standards de référence. Il faut utiliser des étalons de référence bien caractérisés et de pureté connue durant toutes les étapes de la validation.

Le personnel doit être formé adéquatement pour exécuter la méthode.

Le matériel et les produits utilisés doivent respecter le degré de qualité minimal requis défini dans la méthode. Ce matériel doit être stable, entreposé adéquatement et ne doit pas être périmé au moment de l’utilisation.

Question 16

Qu’est-ce que la robustesse?

Answer 16

Capacité de la méthode à ne pas être affectée par des variations de paramètres contrôlables. La robustesse doit être vérifiée pendant l’étape de développement de la méthode. La robustesse permet de déterminer les paramètres et les intervalles critiques de la méthode.

Phase de mise au point de la méthode

Variation volontaire d’un ou plusieurs paramètres (Températures, temps d’incubation, humidité, luminosité, concentrations et quantités, volumes des réactifs, etc.).

Question 17

Qu’est-ce que la spécificité?

Answer 17

La méthode doit permettre de mesurer ou de détecter uniquement la substance à analyser en présence de tous les composants pouvant être retrouvés dans les échantillons. La substance doit pouvoir être mesurée de façon précise même sous l’effet de la matrice (ex. : sang hémolysé ou lipidique) ou l’effet des produits de dégradation. Il convient d’évaluer la spécificité des types de méthodes d’analyse suivants :

Identification de la substance à tester (et capacité de distinguer des composés ayant une structure très similaire)

Teneur et dosage des impuretés

Question 18

Qu’est-ce que la linéarité?

Answer 18

Habileté de la méthode à obtenir des résultats directement proportionnels à la concentration de la substance contenue dans l’échantillon. Pour démontrer la linéarité :

Il est recommandé de tester un minimum de cinq concentrations

Il faut déterminer le coefficient de corrélation, le point d’interception sur l’axe des ordonnées (y) et la pente de la courbe de régression.

Question 19

Qu’est-ce que la limite de détection (LDM) et limite de qualification (LQM) ou limite de dosage?

Answer 19

LDM : Quantité minimale qui peut être détectée par la méthode, sans nécessairement fournir la valeur exacte.

LQM : Quantité minimale qui peut être mesurée avec précision et exactitude.

Question 20

Quelles sont les approches pour la LDM et la LQM?

Answer 20

Examen visuel: les LDM et LQM des méthodes ne faisant pas intervenir d’instruments peuvent être évaluées par examen visuel. On analyse des échantillons contenant des concentrations connues et on détermine la concentration minimale à laquelle la substance peut être détectée de façon fiable (LDM) ou avec exactitude et précision (LQM).

Signal versus bruit de fond : Ne convient qu’aux méthodes d’analyse avec un bruit de fond. On compare le signal obtenu avec des échantillons de faibles concentrations connues avec le signal obtenu avec des blancs. On détermine la concentration la plus faible à laquelle la substance peut être détectée de façon fiable. Pour la LDM, un rapport signal/bruit de 2 ou 3 pour 1 est jugé acceptable. Pour la LQM le rapport signal/bruit est de 10 pour 1.

Déviation standard et pente: Calculés mathématiquement selon les formules suivantes :
LDM= 3,3 X SD/m
LQM= 10X SD/m
où
m = pente de la courbe d’étalonnage 
SD = écart type de la réponse.

Question 21

Qu’est-ce que l’intervalle de mesure (range) ou écart d’utilisation?

Answer 21

L’intervalle de mesure ou l’écart d’utilisation correspond à l’intervalle entre la concentration la plus élevée et la concentration la plus faible de la substance analysée pouvant être déterminé avec un degré acceptable de précision et d’exactitude. Cet intervalle est habituellement établi d’après la linéarité.

Question 22

Qu’est-ce que l’exactitude?

Answer 22

L’exactitude correspond au degré de variation des résultats par rapport à la « vraie valeur ». Il s’exprime par l’erreur relative ou le % d’écart.

• doit être vérifiée dans l’écart d’utilisation de la méthode d’analyse.
• peut être mesuré avec un matériel de référence (concentration connue).
• peut être mesuré par comparaison des résultats obtenus avec la méthode à valider avec ceux obtenus avec une autre méthode bien caractérisée.
• Fortification (spiking) d’échantillons avec au moins 3 doses dans l’écart d’utilisation de la méthode, chaque dose étant répétée au moins 3 fois.
• Peut être mesuré par déduction après avoir établi la précision, la linéarité et la spécificité de la méthode en question.

Question 22

Qu’est-ce que la précision?

Answer 22

La précision correspond au degré de variabilité entre les résultats des essais. Elle s’exprime par l’écart-type ou par le coefficient de variation (% CV). La précision peut s’évaluer à trois niveaux : répétabilité, précision intermédiaire et reproductibilité.

Question 23

Qu’est-ce que la précision intra-analyse ou répétabilité?

Answer 23

Correspond aux variations entre les essais effectués sur un même échantillon, dans les mêmes conditions de réalisation et après un court intervalle de temps. Plusieurs dosages du même échantillon doivent être effectués dans un même essai (au moins 9 mesures englobant l’écart d’utilisation de la méthode [c.-à-d. 3 concentrations avec 3échantillons chacune] ou 6 mesures d’une concentration à la teneur escomptée).

Question 24

Qu’est-ce que la précision intermédiaire?

Answer 24

Correspond aux variations entre les essais effectués dans un même laboratoire (par différents individus [inter-individus], avec différents lots [inter-lots], à différents jours [inter-jours] ou avec différents appareils [inter-appareil].

Question 25

Qu’est-ce que la reproductibilité?

Answer 25

Correspond aux variations entre les essais effectués dans différents laboratoires [inter-laboratoire].

Question 26

Qu’est-ce que la revalidation d’une méthode d’analyse?

Answer 26

Celle-ci sera plus ou moins poussée selon la nature des changements. Les cas suivants nécessitent de revalider une méthode d’analyse :
1. S’il y a un changement dans le procédé de synthèse de la substance médicamenteuse ;

2. S’il y a un changement dans la composition du produit fini ;
3. S’il y a un changement dans la méthode d’analyse.

Question 27

Quand est-ce que le plan directeur de validations est nécessaire?

Answer 27

Lorsqu’un nouveau projet de fabrication d’un produit est planifié ou lorsque de nouvelles installations sont prévues, toutes les validations, ainsi que le moment auquel chaque validation doit être effectuée, sont rassemblées dans un document appelé le plan directeur de validations.

Question 28

Qu’est-ce que le plan directeur de validation résume?

Answer 28

Ce document résume la validation des installations, des systèmes, des procédés, des équipements, des systèmes informatiques et des méthodes.

Question 29

Le plan directeur de validation sert de quoi?

Answer 29

Il sert de plan de travail et de calendrier et permet de visualiser les interactions entre les différents procédés et systèmes. Il sera alors plus facile de mesurer la charge de travail et d’établir les priorités.

Question 30

Qu’est-ce que le plan de directeur de validation doit faire en principe?

Answer 30

1. décrire le matériel, les systèmes, les méthodes et les procédés à valider, ainsi que le moment de ces validations ;
2. fournir les modèles requis pour chaque document de validation et indiquer les renseignements à fournir pour chacun d’eux ;
3. indiquer les raisons et le moment auquel il faut effectuer des revalidations ;
4. indiquer l’ordre dans lequel chaque élément de l’établissement est validé
5. inclure toute autre information nécessaire.

Question 31

La validation de procédé désigne quoi?

Answer 31

La validation de procédé est le terme utilisé pour désigner qu’un procédé a été rigoureusement examiné afin de démontrer qu’il est pratiquement garanti. Le but est de « qualifier » le procédé de manière à s’assurer que les spécifications du résultat final seront uniformément respectées. Pour y parvenir, une série d’actions et d’opérations seront effectuées afin d’obtenir un résultat particulier.

Question 32

Qu’est-ce qu’un procédé?

Answer 32

Un procédé est une série d’activités interdépendantes faisant intervenir des actions spécifiques, des équipements et du matériel pour produire un résultat défini.

Question 33

Comment valider la reproductibilité et l’uniformité d’un procédé?

Answer 33

Exécuter celui-ci au moins trois fois.

Question 34

Que doit-on avoir pour que les résultats soit dit valides?

Answer 34

Pour être dits « valides », les résultats obtenus, dans les trois cas, doivent respecter les critères d’acceptation.

Question 35

Quand n’est-il pas requis que le procédé soit validé?

Answer 35

Si le résultat du procédé est vérifiable et mesurable et que cette vérification est suffisante pour garantir que le procédé a été bien exécuté, il n’est pas requis de valider le procédé. Si cette vérification n’est pas possible, le procédé doit être validé. Dans certains cas, il peut être avantageux de concevoir d’autres options, soit pour améliorer le procédé ou pour réduire les coûts.

Question 36

Qu’est-ce qu’une validation prospective?

Answer 36

C’est le type de validation le plus courant et le plus réputé. La validation est effectuée avant la mise en application du procédé. Si les résultats de la validation ne sont pas satisfaisants, le procédé peut être rejeté ou modifié avant d’être implémenté dans les opérations routinières de production.

Question 37

Qu’est-ce qu’une validation concomitante?

Answer 37

Cette validation est effectuée au cours des opérations régulières de production. Au moins trois productions doivent être effectuées et les données recueillies pendant l’exécution du procédé sont analysées pour valider le procédé. Ce type de validation est acceptable si le procédé est très bien connu et contrôlé.

Question 38

Qu’est-ce qu’une validation rétrospective?

Answer 38

Ce type de validation est reconnu dans des circonstances spéciales, par exemple lorsque le produit est fabriqué depuis longtemps, mais que le procédé n’a jamais été validé. Il consiste à l’examen des lots de production déjà terminés. Cette validation implique que la fabrication des lots soit très bien documentée et fiable et que le procédé n’ait pas été modifié au cours des années.

Question 39

Qu’est-ce que la validation au laboratoire d’essai ou validation pilote?

Answer 39

Un autre type de validation, la validation au laboratoire d’essai ou validation pilote, peut être nécessaire lorsqu’il n’est pas possible de valider un procédé sur le site même de production. Par exemple, pour la validation de l’élimination des impuretés [faisant partie de plusieurs étapes séparées de purifications dans le procédé], l’ajout à fortes doses d’impureté à un produit afin de vérifier le procédé d’élimination ou d’inactivation de ces impuretés, peut être vérifié à plus petite échelle dans un autre laboratoire. Le procédé à petite échelle doit être représentatif du procédé à grande échelle.

Question 40

Quelle est la définition du protocole de validation?

Answer 40

Un plan écrit expliquant comment la validation sera faite et qui inclut les paramètres à tester, les caractéristiques du produit final, l’équipement utilisé et les critères d’acceptabilité aux points critiques

Question 41

Quelles sont les trois parties du protocole de validation de procédés?

Answer 41

1. qualification d’installation [QI]
2. qualification opérationnelle [QO]
3. qualification de performance [QP]

Question 42

Qu’est-ce que la qualification d’installation?

Answer 42

démontrer que le ou les équipements et les systèmes de soutien requis pour le procédé sont bien installés et au bon endroit, et fonctionnent dans les limites requises selon les recommandations du manufacturier et les besoins du procédé.

Question 43

Qu’est-ce que la qualification opérationnelle?

Answer 43

Démontrer que le procédé, lorsque répété dans des conditions préétablies, fabrique un produit répondant à des critères prédéterminés. Afin de déterminer la robustesse du procédé, il est effectué dans les conditions extrêmes simulant le « pire cas ». Les paramètres critiques du procédé sont établis.

Question 44

Qu’est-ce que la qualification de performance?

Answer 44

Démontrer que le procédé est constant dans les conditions normales d’opération. Les paramètres établis lors de la qualification opérationnelle doivent être respectés. Cette étape permet de mesurer les variations normales du procédé et d’éliminer au besoin les causes contrôlables de variation.

Question 45

Quand doit être fait une revalidation de procédé?

Answer 45

Enfin, une revalidation de procédé doit être réalisée si tout changement pouvant affecter l’intégrité du produit est introduit. Il peut s’agir d’une matière première, d’une relocalisation des activités, d’un nouvel équipement, etc.