Koagulasjonsinstrumentering Flashcards
Hva funksjonell og kvantitativ måling?
Kvantitativ: måler mengde protein
Funksjonell: måler fx/aktivitet (eks PT-INR, som er et forholdstall)
Hva er manuell teknikk for PT-INR?
Gullstandard. Tilsetter prøve og reagens i kyvette som settes i vannbad 37 grader. Kyvetten vippes opp og ned til clot oppdages.
Prinsipp for mekanisk klotdeteksjon. Hvilke instrumenter benytter dette prinsippet? Interferens?
Benytter en kyvette med en stålkule som kan vandre frem og tilbake i kyvetten ved hjelp av magneter på hver side av kyvetten. Når det dannes et klot i kyvetten vil kulen møte motstand. Jo mer klot, jo større motstand. Dette monitorenes ved hjelp av et kamera. Infrarødt lys begrenser påvirkning av innkommende lys i det ikke helt lystette prøvekammeret.
Interfereres ikke av hemolyse, ikterus og lipemi.
Instrumenter: STA-R evolution, STA satellite, STart Max
Prinsipp optisk klotdeteksjon. Fordel og ulemper?
Måler transmittert lys til en tilstrekkelig endring nås. Denne tiden registreres som koagulasjonstiden.
Tilsetter prøvemateriale i ei liggende kyvette med ei stålkule i. Kyvetten vippes til stående posisjon, slik at løsningen blandes, og det måles transmittert lys i stående kyvette.
Fordel: kan få reaksjonskurve
Ulempe: følsom for HIL siden det vil påvirke løsningens farge og tetthet. Begrenser problemet ved å måle ved flere bølgelengder.
Prinsipp immunologisk metode for D-dimer (STA Satellite)
Måler fotometrisj ved 405 og 540nm. Gjør to målinger; en referanse og en gjennom kyvetten. Dette for å ihensynta strølys. Referansemålingen måler kun strølyset, så ved å trekke denne fra målingen gjennom kyvetten, vil man få et resultat korrigert for strølys.
Fargeendring i metoden: latex mikropartikler coatet med Ab, som ved dannelse av Ab/Ag kompleks øker absorbasen.
Prinsipp nefleometrisk metode
Både til klotdeteksjon og kvantitering.
Måler lightscatter (spredt lys) ved 90 grader, eller både 90 og 180 grader.
Klotdeteksjon; timer stopper når lightscatter har en bestemt verdi. Dannelse av Ab/Ag kompleks øker turbiditet, som fører til økt lydspredning.
Prinsipp kromogen substrat metode (AT3) på STA satelite
Fotometrisk måling, lik måling som ved immunologisk metode. Fargeendring er, avhengig av hva vi måler, direkte proporsjonal (direkte måling) eller indirekte proporsjonal (indirekte måling) med analyttens aktivitet.
Kromofor (pNA) og substrat (syntetisk oligopeptid med aminosyrestruktur som matcher målproteasen for analytten vi ønsker å måle (direkte), eller som vi bruker som indikator for analytten (indirekte)). Designer altså et protein som ligner målproteinegt til enzymet vi ønsker å måle aktiviteten til.
Gi et eksempel på indirekte måling med kromogen substrat metode (Trombin)
Hva er viktig å tenke på ved valg av avlesningsbølgelengde ved kromogen substrat metode?
Må ta hensyn til hvor målingen kan gi signal fra substratet, og hvor signalet helt sikkert kommer fra pNA (kromoforen). Velger punkt hvor det ikke vil være signal fra substrat, men fortsatt være signal fra pNA.
