IMUNOTERAPIA Flashcards
TP
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Anticorpos monoclonais
- especificos p determinado antigenio
- permitem recohecimento mt especifico de cels cancerigenas c base no seu fenotipo molecular
definicao - produzidos por um único clone de um único linfócito B, que é clonado e imortalizado, produzindo sempre os mesmos anticorpos, em resposta a um agente patogénico
(iguais, ligam se ao mm epitopo)
evolucao dos monoclonais - Ig rato (origem murina)
- Ig quimericos (75 humano)
- Ig humanizado (95)
- Ig humano
+ frequentes - IgG 1 (subtipo com maior capacidade de promover citotoxidade mediado por anticorpos)
- iG3 (associada à ativação do complemento)
nomenclatura
(do de origem marina ate ao 100 humano)
ANTIGA - momab
- ximab
- zumab
- umab
RECENTE - tug (anticorpo monoclonal que é específico para um antigénio e não tem alterações)
- bart (mutações por eng. Genética)
- mig ( multiespecífica, consegue identificar antigénios diferentes)
- ment (fragmentos monoespecíficos da região varíavel da Ig)
E AINDA… - se tiver “tu” antes do sufixo tem um alvo tumoral, se for “i” alvo é o SI
Técnica de “Phage-display”
Uma das técnicas que mais permitiu a evolução dos anticorpos monoclonais
(CAGUEI EXPLICACAO, PG 167 NOVA)
EVOLUCAO ANTICORPOS MONOCLONAIS
Diminuir a imunogenicidade
- diminuição da porção não humana do Ac p redução dos epítopos para os linfócitos T de forma a diminuir a probabilidade de serem reconhecidos como moléculas estranhas e aumentar a interação com o braço efetor do sistema imune
Aumentar a afinidade
- ligacao dos Ig aos antigenios alvos
Modificação da sua estrutura na porção Fc
- melhorar ligacao a NK e fagocitos, aumentando ADCC e fagocitoser
- Aumentar a afinidade para os recetores FcRn, responsaveis pelo salvage (aumento semivida)
- ablacao da funcao da porca Fc, subst de Ig1 p Ig4, oq pode ser benefico, pe, tendo um papel mais importante como bloqueadores de recetores (4) e nao efeito de destruição de células (1)
Acoplar moléculas
- toxinas de plantas/bactérias, enzimas, radionuclídeos, drogas citotóxicas
- possiveis efeitos terapueticos
Anticorpos monoclonais biespecíficos
- puderam ligar a antígenos diferentes, podendo aproximar uma determinada célula com qualquer outra
(pe, aprox cel tumoral com cel T p induzir resposta imune melhor)
fragmentos fab e Ig de cadeia simples
- melhores propriedades farmacocinéticas e/ou a eficiência de penetração nos tecidos ou no tumor
- sem porção Fc são ineficazes na destruição de células e como monoterapia
- não têm mecanismos de citotoxicidade logo n indicadas no tratamento de tumores por si só
- podem ser extremamente úteis quando utilizadas com outras substâncias
Ações dos anticorpos monoclonais
(ações diferentes consoante o alvo antigénico)
Antigénio da superfície da célula
- bloqueio funcao ce
- destruicao cel
- ativacao complemento
- …
Antigénio é uma droga ou proteína plasmática
- ligar-se a essa molécula e impedir que esta se liga ao seu recetor alvo
(impedir o seu efeito)
Recetor da IgG
- recetores FcRn fundamental na recuperação e reaproveitamento de imunoglobulinas
- caso de doente q prod Ig excessivos, podemos alterar o recetor p q os Ig sejam mais facilmente eliminados e p q n haja reaproveitamento de Ig
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(efeitos dif de acordo com agente infecioso)
virus
- neutralizacao
- impedir entrada
bact
- efeito profilático ou terapêutico
Estratégias terapêuticas em imunoterapia
(pg 171 nova)
1. Inibição da resposta imunitária indesejada
Resposta aloimunes
Resposta autoimune
A: Anticorpos monoclonais
B: Proteínas de fusão IgG1
C: Inibidores da Janus -Kinase
Resposta alérgica
2. Ativação da resposta imunitária - Terapia anti-tumoral
A: Anticorpos monoclonais
B: Manipulação de células T –transformação adotiva de células T
C: Terapia dirigida a outras células do sistema imune
D: Vacinas
E: Citocinas
3. Terapia anti-plaquetas
4. Terapia anti-infecciosa
1
Inibição da resposta imunitária indesejada
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Resposta aloimune
- relacionado com a transplantação
- 1º anticorpo monoclonal aprovado foi o OKT3 (muromomab – anticorpo monoclonal murino anti-CD3)
OKT3 - marcada imunossupressão por inibir cels T
- objetivo a prevenção da rejeição de transplante de órgãos
- problemas
a) resposta imune contra os anticorpos murinos
b) depressão imunitária marcada
c) indução da libertação de citocinas pró-inflamatórias
usam se agr anticorpos com imunosupressao mais especifica
Anticorpo monoclonal quimérico/humanizado que se ligam ao receptor da IL2 (antiCD25)
- liga cels T ativados, inibindo os
Resposta autoimune
(pg 174)
corticosteróides
- ação anti-inflamatória muito inespecífica
- bastante eficaz
- efeitos secundários dos corticosteróides tais como retenção de líquidos, alopecia, etc
azatioprina, micofenolato mofetil e ciclofosfamida (mais tóxico)
- drogas citotóxicas
- a inibição da síntese de DNA em todas as células
(células com maior turnover celular serão mais afetadas: pele, mucosa, neoplasicas…)
- efeito imunossupressor em baixas doses
ciclosporina A e o tacrolimus
- maior efeito a nível celular, quer em linfócitos B quer em linfócitos T (++)
(no T, impede ativacao NFAT, n havendo expressao de IL2, dim ativacao cels T)
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A: Anticorpos monoclonais
- um Ig com cel como alvo pode ter como efeito
1) suprimir resposta imunopatologica com deplecao da cel ativada
2) bloquar cels e suas funcoes sem a sua deplecao
- temos ainda Ig q bloqueiam ou inibem ligacao de interleucinas e outros mediados inflamatorios aos seus recetores
(principais mediadores inflamatórios são o TNF-⍺, IL1 e IL6)
RITUXIMAB ANTICD20
- elimina cels B
- util em doencas autoimunes mediadas por autoanticorpos
MUROMONAB
(okt3)
- inibe ativacao cels T
Daclizumab e Basiliximab
- inibir cels T
- usados transplantes de orgaos
Omalizumab
- anti ige
- área das alergias
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B: Proteínas de fusão IgG1
- porção Fc dos anticorpos e por uma proteína com função biológica
(dif ptn q ligam ao alvo e prod o efeito)
- sufixo cept
ETARNECEPT
- receptor solúvel para o TNF inibindo a ligação do TNF ao seu receptor natural
- inibe o processo inflamatório
- complexo posteriormente eliminado
ABATACEPT
- IgG1 + porção extracelular do CTLA-4
- bloqueia recetor CD80/86, impedindo a coestimulação do CD28 com CD80/86
- T não são estimuladas e não há resposta imunológica
(cd 28 na T e cd80 na apc)
ALEFACEPT
- a ligação CD2(T)-LFA3(APC) é também uma outra via de coestimulação das células T
- porção da IgG1 com um domínio extracelular do LFA-3
- e ligue ao CD2 nos linfócitos T e impeça a ligação do CD2 dos linfócitos T com o LFA-3 das APC, inibindo a ativação das células T
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C: Inibidores da Janus -Kinase
- anticorpos monoclonais que são Inibidores das enzimas da família Janus-Cinase
- sufixo tinib
- maioria das citocinas atua em recetores tipo I e II, sinaliza atraves desta fam
- bloquear recetores impede ligacao citocinas, n havendo transcricao de genes das vias pro inflamatorias, tendo efeito imunosupressor
Resposta Alérgica
1) primeiro contacto com um determinado antigénio que levará à formação destes IgE pelos plasmócitos
2) IgE ligam-se através da sua porção Fc, essencialmente, aos basófilos e mastócitos
3) contactos posteriores com este antigénio, haverá a ligação destes aos IgE ligados às células supramencionadas e, esta ligação levará à desgranulação das mesmas
Omalizumab
- ligando-se às porções do Ige (que esta ligado a super dos basofilos e mastocitos) que se ligariam aos antigénios
- bloqueio, n contacto ige antigenio, nao ha desgranulacao, nao ha resposta alergica
2
Ativação da resposta imunitária - Terapia anti-tumoral
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A: Anticorpos monoclonais
inibicao, apoptose, complemento, adcc e fatores angiogenicos
- ligam aos próprios antigénios da cel tumoral e inibem o INIBEM O CICLO DA DIVISAO CELULAR
(recetor HER2, presente em muitas células tumorais, é um dos recetores alvo)
- ligam a recetores e PROVOCAM APOPTOSE
- facilitam os processos de ATIVACAO DO COMPLEMENTO e de mecanismos como o de ADCC
- LIGAM SE A FATORES ANGIOGENICOS, LIMITANDO-OS, limitando o tumor que nao se consegue metastizar
a) ig anti-VEGF (pe, Bevacizumab (AvastinR))
INIBIDORES CHECKPOINT
a) cel tumoral passa a expressar CD80/86, liga-se ao CTLA-4 da cel T e torna a anergica
b) cel tumoral passa a expressar PDL1, liga se a PDI na cel T e promove a sua apoptose
c) os inibidores sao Ig q ligam recetores responsaveis pela anergia (CTLA-4 e PD1 da célula T e ao PDL1 da célula tumoral) impedindo a desativacao ou apoptose
d) ex: Ipilimumab (bloqueia a ligação CTLA-4-CD80/86);
d)´ex: pembrolizumab; o nivolumab -IgG4 (Anti-PD1); e o atezolizumab(anti-PDL1)
imunoconjugados
(Ig acoplados com outra molecula)
ACOPLADOS A SUBST RADIOATIVAS
- + utilizados no tratamento do cancro
(tumores radiossensíveis e que tenham antigénios alvo disponíveis muito específicos)
- substâncias radioativas vão ter como função a morte das células tumorais (células alvo)
- resultados limitados devido a logisitica dificil, equipamentos…
ACOPLADOS A DROGAS
- acoplados c drogas citotóxicas e que estão ligadas por um linker (o linker estabiliza a droga em circulação e permite a sua libertação após internalização)
1) Ig liga se ao antigenio sendo internalizado
2) na cel, droga libertada, atuando
(para ciclo celular, leva a apoptose…)
BIOESPECIFICOS
- extremidade anti-CD3, para se ligar à célula T, e uma extremidade variável consoante o alvo terapêutico
IG LIKE
- mais estaveis
- maior tempo de vida
- emparelhamento de cadeias pesadas e leves é difícil de se fazer
NON IG LIKE
- baixa imunogenicidade
- fácil produção
- efeito terapêutico por ligação apenas ao antigénio
BiTEs (Bispecific T-cell engager antibodies)
- “braço” que se liga ao antigénio tumoral e o outro que se liga ao CD3 de uma célula efetora imune T
(2ª ligacao pouco especifica, pode ligar se a CD8, Th1, Th2 ou Treg)
- induzem erradicação tumoral mediada por resposta das T citotóxicas
Manipulação de células T –transformação adotiva de células T
- utilização de células, potencialmente modificadas, para tratamento, por exemplo, dos tumores
expansão ex vivo de linfócitos infiltrados no tumor – TILs
- linfocitos dentro do tumor reconhecem no mas mts vezees n tem ativ defesa
(talvez p ambiente imunosupressor do tumor)
- baseia se em reativar estes linfocitos p terem papel de defesa ao contactar c tumor
1) identif uma populacao de linf T assim
2) extrai los atraves de extrato tecido tumoral
3) recolher linf, adiconar meio cultura Il2 q e responsavel p ativacao
4) selecionar populacao CD8 (estas e que eliminam as cels tumorais)
5) reintroduzir T no indiv
- limitacoes
a) recolha de tumor é um procedimento invasivo
b) Local do tumor de difícil acesso conduz a maior morbilidade após a cirurgia
c) Incapacidade de fazer crescer TILs em 10-15% dos doentes de melanoma
criação de Recetores das células T geneticamente modificados
CONCEITO
- retirar células T (ao doente)
- modificar geneticamente o recetor
- nova afinidade p um determinado antigenio
(pe, tumoral)
(leva a + eficacia quando reintroduzidas)
- ou seja, introdução de genes, em linfócitos do sangue periférico, que codificam TCRs que vão reconhecer antigénios tumorais
LIMITACOES
- TCR é HLA restrito, o que limita a sua aplicabilidade em certos doentes
CAR-T cells (Chimeric Antigen Receptor T cells)
- cels retiradas do indivíduo que são submetidas a um processo de engenharia genética para modificar o recetor da célula T
- inserido recetor quimérico de antigénico específico
- fusão do domínio intracelular do TCR (CD3 e CD28) com um domínio extracelular ligante do
Antigénio (uma região Fab)
- TCR ligada a rgeiao FAB = célula T passa a puder detetar antigénios livres
(cel T normal so reconhece antigenios apresentados p MHC II)
( se forem T CD8, levar à morte de células do tumor com maior eficiência)
Terapia dirigida a outras células do sistema imune
NK
IG ANTI KIR
- recetor KIR que reconhece MHC I nas cels nucleadas, destruindo cels anormais quano apresentam baixa expressao deste
(porem alguns tumores tem alta expressao de MHC I, inibindo as NK)
- criado Ig anti KIR, cobrindo o mecanismo q NK usa p distincao, logo todas cels sao estranhas, reativando citotoxicidade contra cels tumorais
(tmb pode destuir normais)
CAR-NK
- recetor c especificidade p antigenio tumoral (=CAR T)
- Não provocam tempestades de citocinas
- Facilitam ADCC
- Mantêm a sua atividade mesmo com modificação dos antigénios do tumor com o tempo
(ao contrario das CAR T)
MACROFAGO
- M1 (pro inflmatorio, anti tumoral); M2 (oposto)
- colonizacao do tumor por M2
- M2 recrutados p CCL-2 e CSF-1
- Ig monoclonal anti CSF-1
VACINAS
Sipuleucel –T
- vacina é dada a doentes com cancro da próstata avançado
- antigenio: PAP
1) recolher leucocitos, especialmente APC
2) expor APC ao PAP + fator crescimento
3) APC sensibilizados ao antigenio
4) reintroduzir APC
5) estimulação das células APC a apresentarem os antigénios PAP às células T do doente
6) reconhecimento PAP nas células tumorais
Citocinas
IL 2
ALTA DOSE
- promove atividade citotóxica de T CD8+ e NK
- diferenciação de TCD4 em Th1 eTh2
BAIXA DOSE
- expande Treg
- inibe Th17
Interferon Alfa 2 B
- reduzir a produção de IL-1, que é uma potente interleucina pró-inflamatoria
Bacilo Calmette–Guérin (que não passa de uma Mycobacterium bovis atenuado)
- a prova da tuberculina
- instilado na bexiga, em contacto direto com o tumor, e induz uma resposta inflamatória exuberante capaz de destruir neoplasias das zonas mais superficiais da bexiga
3
Terapia anti-plaquetas
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Terapias anti-plaquetas/anti-coagulante
doentes com obstrução das coronárias ou com risco de EAM
- submetidos a dilatação das coronárias
(processo pode levar a EAM por agregação plaquetar)
- abciximab (Ig monoclonal) p impedir
doentes que tomam anticoagulantes excessivamente
- Idarucizumab (Ig mono) p contrariar efeito da sobredosagem
4
4. Terapia anti-infecciosa
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terapia anti-viral/bacteriana
Igs monoclonais
- exemplos…
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notas finais relativos aos últimos slides da aula
CD20
- LB normais e neoplásicos
- Expresso em 90% das células do linfoma não Hodgkin
Rituximab - anticorpo monoclonal quimérico anti-CD20
- usado nos linfomas não Hodgkin
- tratamento doencas malignas B
a) CD20 mt expresso nos B;
b) CD20 é resistente à internalização, persistindo à superfície do linfócito B
c) facilita mecanismos de apoptose, de ADCC e de citotoxicidade mediada pelo complemento
d) CD20 é alvo terapêutico em outras doenças como a artrite reumatoide e LES
Human epidermal growth factor receptor 2 (HER2)
- Membro da família dos recetores do factor de crescimento epitelial
- presente em 20-30% carcinomas da mama
- associado a sobrevida diminuída
Trastuzumab
- inibe diretamente o crescimento celular e estimula indiretamente mecanismos de citotoxicidade mediada pelo complemento e por anticorpos
- Indicado em doentes com metástases de carcinoma da mama
CD33
- expressa na superfície de células mieloides e células progenitoras hematopoiéticas
- expresso em quase 90% dos blastos da Leucemia mieloide aguda (LMA)
Gentuzumab
- anticorpo monoclonal anti-CD33 humanizado conjugado com antibiótico citotóxico
- Usado na LMA com CD33+
Vascular Endothelial Growth Factor
- factor de crescimento angiogénico
- aumentado nos tumores malignos
Bevacizumab
- anticorpo monoclonal humanizado anti-VEGF
TNFα
- Citocina pró-inflamatória que induz inflamação crónica e caquexia
- prod p monócitos e macrófagos
- vários anticorpos monoclonais anti-TNFα
Recetor da IL-6
efeitos
- Citocina pró-inflamatória que induz produção de reagentes da fase aguda
- indução da transformação de linfócitos T em Th17
- produção de autoanticorpos
- diferenciação de osteoclastos
(…)
PRATICA
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CTLA4
- recetor checkpoint
- superf cels T
- inibitorias, uteis quando acao T ja nao e necessaria
- liga se ao cd80/86 tal como o CD28 (2 sinal ativacao)
PD1
- recetor checkpoint
- bloqueia cels T (apoptose, inibe atividade…)´
- universal (T, B, linha mieloide…)
- expresso po, exaustao cels T ou quando, numa infecao, dim MO
imunoterapia…
- estimula a atividade de componentes específicos do sistema imune
- bloqueia recetores expressos à superfície de células cancerígenas que inibem a resposta imune
- associada a inibidores prod hormonas, quimio, raidoterapia…
inidores checkpoint sao eficazes em todas as pessoas
nao
Na imunoterapia com recurso a Transferência Adotiva
de Células, qual deste mecanismos pode ser uma
barreira associada ao uso de TILs?
conceito
- tiramos linf T do ambiente tumoral, que ja sabem quais sao os antigenios
- linf T anergicos devido ao ambiente imunosupressor do tumor
- estimulados ca fora, fatores de crescimento e cultura
- fundidos again
problemas
- linfócitos não conseguirem ultrapassar o efeito supressor induzido pelo tumor
(ao voltarem, sujeitos ao mesmo ambiente imunosupressor…)
- presença de poucos linfócitos no local capazes de erradicar o tumor
na abordagem terapêutica com transferência adotiva de TILs, temos limitacoes…
- TILs não estão presentes em todos os tumores
- requer cirurgia p obtenção de células
- protocolos de expansão das células são caros e difíceis de executar
Os conjugados Ac–Droga são produzidos associando uma droga
citotóxica a um Ac através de uma ligação química?
- V
processo
- complexo internalizado
- droga clivada nos lisossomas
- citotoxicidade intracelular
Relativamente aos resultados nos tratamentos com
Acs anti-CTLA4, escolha a opção certa?
A – a sobrevida é globalmente curta
B – a sobrevida aumentou
C – a maioria dos pacientes oncológicos apresenta boa
resposta
D – A e C
E – B e C
B
conceito
- só uma pequena percentagem dos pacientes atinge uma resposta duradoura
Os Acs biespecíficos são constituídos por fragmentos
de 2 Acs sendo que um liga a célula tumoral e o outro
liga uma célula do sistema imune?
A – V
B – F
pe, aproximar cel tumoral e cd8
Os inibidores dos checkpoint anti-PDL1, utilizados no
tratamento do cancro estão associados aos seguintes
efeitos laterais?
A - hipofisite
B - hipertiroidismo
C - hipotiroidismo
D - colite
E - todos
- acho que todos
- saber que tem efeitos colaterais
Embora as vacinas não sejam ainda uma forma
corrente de tratamento do cancro a investigação está
em curso. Qual destas vacinas em estudo mostrou
mais sucesso?
A - vacinas de antigénios
B - vacinas de células dendríticas
C - vacinas de células tumorais
D - todas
apontei cels dendriticas…
Os recetores das células CAR-T reconhecem Ags
apresentados num complexo MHC?
- falso
- TCR e que reconhece antigenios ligados a MHC
CAR T
- uso associado a toxicidade significtiva
- ligam a Ag alvo, proliferam, prod citocinas e subs toxicas p destruicao do tumor
- interesse em doencas autoimunes
(pe, CAR contra cd19/20; favoravel dooentes com LES…)
- compromete varios orgaos, vasodilatacao, choque…
O uso de INF-alfa está associado a baixa taxa de
resposta e a toxicidade:
A – V
B – F
- V
- Produzido por céls APC como as céls dendríticas plasmacitoides
- Importante na resposta anti-viral
As imunoterapias supressoras estão indicadas em
todas as situações excepto:
A - alergias
B - doenças autoimunes
C - prevenção das respostas de rejeição de orgãos
D - faringite bacteriana
d
Qual destes Acs monoclonais é simultaneamente
utilizado em imunoterapia supressora e em oncologia:
A - Ac anti - CD25
B - Ac anti - TNF alfa
C - Ac anti - R Ach
D - Ac anti - CD20
D
justificacao
A
- anti cd25 = nao IL2 = T inativas
- imunosupressor
B
- anti tnf alfa
- tnf alfa citonina pro inflamatoria
- imunosupressor
C
- anti recetor Ach
- miastenia gravis (autoimune)
D
- recetor B logo imunospressor
- linfomas cels B (oncologia)
