histologie tissus epithéliaux Flashcards
qu’est ce que l’histologie ?
étude des tissus au microscope
quelle sont les étapes nécessaire pour passer d’un tissu macroscopique a microscopique ?
-Fixation du tissu
- Inclusion du tissu
- Coupe
- Coloration
- Montage des coupes entre lame et lamelle
quel est le but de la fixation du tissu ?
conserver le tissu dans un état morphologique proche de son état in vivo
Cette étape de fixation tue les cellules.
pourquoi faut il immerger le tissu cérébral dans des fixateurs ?
Le tissue cérébral se nécrose très rapidement donc pour le conserver on va l’immerger dans
des fixateurs, l’objectif de cette fixation est de former des ponts protéiques qui vont rendre
le tissue proche du vivant
citez 3 fixateurs
formol, méthanol ou acide acétique
pourquoi la fixation dépend de la taille de l’échantillon?
parce que Plus l’échantillon est petit plus vite il va se fixer
quels sont les fixateurs les plus utilisé ?
Paraformaldéhyde en recherche car il a un bon immunomarquage
Formol tamponné
quel est le but de l’inclusion du tissu ?
avoir un bloc de paraffine englobant l’échantillon pour le durcir et pouvoir faire des coupes d’épaisseur
constante.
Milieu le plus utilisé : paraffine, composé hydrophobe.
quels sont les étapes d’inclusion du tissu?
déshydrater l’échantillon en immergeant le tissu dans des solutions de concentration croissante en
éthanol.
Une fois déshydraté, on va le mettre dans une solution de xylène (composé soluble dans la paraffine)
avant
d’imbiber l’échantillon avec la paraffine liquide.
qu’utilise t’on en microscopie optique pour la coupe du tissu ?
on utilise le microtome équipé d’un couteau permettant de faire des coupes bien
régulières (entre 2 – 10 µm, moyenne 5 µm).
qu’utilise t’on en microscopie optique pour la coupe du tissu congelé ?
on utilise le Cryo microtome qui maintient une température contrôlée (-20°C).
Pour être colorées les coupes doivent être réhydratées
car les colorants sont …?
hydrophiles,
quelles sont les étapes de réhydratation du tissu ?
on va passer le tissu dans des bains successifs :
- solvant intermédiaire (xylène),
- bains d’éthanol de concentrations décroissantes pour réhydrater l’échantillon
quels sont les colorants, couramment, utilisés en histologie?
Hématoxyline : colore le noyau (acide nucléique)
- Eosine/érythrosine : colore le cytoplasme des cellules
- Jaune safran ou vert lumière : colore les fibres collagène des tissus
étapes montages des lames
déshydrater à nouveau la lame en utilisant des concentrations d’alcool croissantes
xylène
résine de montage (composé hydrophobe).
la Microscopie photonique est pour…?
paraffine
la microscopie électronique est pour…?
résine
qu’est ce que l’ultramicrotomie ?
coupe d’échantillons destinés à la
microscopie électronique : 50 à 70 nm
etapes de Etalement sur lames pour la coupe du tissu
Etalement de la coupe sur la lame de verre
* Collage et séchage sur platine chauffante
les épithélium sont qualifié de ?
avasculaires
qu’est ce que la lame basale ?
structure qui sépare les tissus épithéliaux des tissus conjonctifs Sous-jacent
quels sont les fonctions des tissus épithéliaux ?
-absorption
-sécrétion
-protection (peau)
ou est orienté de pole apical ?
vers l’extérieur ou vers la lumière
ou est orienté le pole basal ?
vers la lame basale sous-jacente.
que retrouve t’on a l’intérieur de la cellule épithélial ?
noyau
(réticulum endoplasmique rugueux)
Appareil de Golgi
Mitochondries
Vésicules
Dispositifs de jonction
composé majeurs de la lame basale
Glycoprotéines (Collagène de type IV, laminine, entactine et la fibronectine)
- Glycosaminoglycane (Héparane-sulfate)
- Autres protéines mineures non caractérisées
comment observer la lame basale par microscopie optique ?
il faut utiliser des colorations particulières telle que la coloration PAS
(Periodic Acid Schiff ou acide périodique de Schiff) permettant d’avoir une coloration rose intente.
Cette coloration
réagit avec les glycoprotéines de cette lame basale.
les imprégnations argentiques
ou en utilisant
l’immunohistochimie (anticorps dirigé contre la laminine ou le collagène de type IV).
fonction de la lame basale
Adhésion épithélium aux tissus conjonctifs
Barrière pour la migration cellulaire
exemple de pathologie de la lame basale ?
Pemphigoïde bulleuse
caractéristique de Pemphigoïde bulleuse
Maladie auto-immune
- Sécrétion d’auto-anticorps circulants dirigés contre des constituants de la
lame basale: hémidesmosomes - BPAg 1 et 2 : Antigènes de la pemphigoïde bulleuse
- Entraine un décollement cutané avec formation de bulles.
qu’est ce que le point de contact focal ?
Dispositif d’ancrage au pôle basal faisant intervenir des filaments
d’actine
