histologie tissus epithéliaux Flashcards
qu’est ce que l’histologie ?
étude des tissus au microscope
quelle sont les étapes nécessaire pour passer d’un tissu macroscopique a microscopique ?
-Fixation du tissu
- Inclusion du tissu
- Coupe
- Coloration
- Montage des coupes entre lame et lamelle
quel est le but de la fixation du tissu ?
conserver le tissu dans un état morphologique proche de son état in vivo
Cette étape de fixation tue les cellules.
pourquoi faut il immerger le tissu cérébral dans des fixateurs ?
Le tissue cérébral se nécrose très rapidement donc pour le conserver on va l’immerger dans
des fixateurs, l’objectif de cette fixation est de former des ponts protéiques qui vont rendre
le tissue proche du vivant
citez 3 fixateurs
formol, méthanol ou acide acétique
pourquoi la fixation dépend de la taille de l’échantillon?
parce que Plus l’échantillon est petit plus vite il va se fixer
quels sont les fixateurs les plus utilisé ?
Paraformaldéhyde en recherche car il a un bon immunomarquage
Formol tamponné
quel est le but de l’inclusion du tissu ?
avoir un bloc de paraffine englobant l’échantillon pour le durcir et pouvoir faire des coupes d’épaisseur
constante.
Milieu le plus utilisé : paraffine, composé hydrophobe.
quels sont les étapes d’inclusion du tissu?
déshydrater l’échantillon en immergeant le tissu dans des solutions de concentration croissante en
éthanol.
Une fois déshydraté, on va le mettre dans une solution de xylène (composé soluble dans la paraffine)
avant
d’imbiber l’échantillon avec la paraffine liquide.
qu’utilise t’on en microscopie optique pour la coupe du tissu ?
on utilise le microtome équipé d’un couteau permettant de faire des coupes bien
régulières (entre 2 – 10 µm, moyenne 5 µm).
qu’utilise t’on en microscopie optique pour la coupe du tissu congelé ?
on utilise le Cryo microtome qui maintient une température contrôlée (-20°C).
Pour être colorées les coupes doivent être réhydratées
car les colorants sont …?
hydrophiles,
quelles sont les étapes de réhydratation du tissu ?
on va passer le tissu dans des bains successifs :
- solvant intermédiaire (xylène),
- bains d’éthanol de concentrations décroissantes pour réhydrater l’échantillon
quels sont les colorants, couramment, utilisés en histologie?
Hématoxyline : colore le noyau (acide nucléique)
- Eosine/érythrosine : colore le cytoplasme des cellules
- Jaune safran ou vert lumière : colore les fibres collagène des tissus
étapes montages des lames
déshydrater à nouveau la lame en utilisant des concentrations d’alcool croissantes
xylène
résine de montage (composé hydrophobe).