Hibridoma Flashcards
¿Qué son los hibridomas?
Células que han sido diseñadas para producir un anticuerpo en grandes cantidades
¿Cómo se produce el hibridoma?
Fusionando linfocitos B de un animal inmunizado para el antígeno de interés con células de un mieloma múltiple
En la producción de anticuerpos monoclonales utilizando la tecnología de hibridoma ¿Qué células se fusionan con las células B para formar hibridomas?
Cel B o plasmáticas
Células del mieloma
Son regiones reconocidas por anticuerpos
epitope
Son anticuerpos monovalentes que se unen a un mismo epítope y son producidos por una clona de linfocitos B
Anticuerpos monoclonales
¿Qué hacen los anticuerpos policlonales?
Reconocen y atacan a muchos epítopos de un único antígeno
Reconoce un antígeno distinto o diferentes epítopes de un mismo antígeno
Anticuerpos policlonales
¿Qué reconocen los anticuerpos monoclonales?
Un solo epítope del mismo antígeno con la misma afinidad
mutación de cel del mieloma
Es la incapacidad para generar ac nucleicos
-> Ellas por si solas no generan ac. nucleicos, ocupan estar en medio de cultivo que les proporcione esto
-Sin ac. nucleico NO se pueden reproducir y mueren
¿Cómo se genera el anticuerpo monoclonal?
-Vamos a fusionar cel del mioloma mutadas y cel plasmáticas (No todas se fusionan y algunas si lo harán)
- Seleccionamos aquellas que NO se fusionaron
-A mi medio de cultivo le pongo todo ese mix de cel fusionadas y las que no
-cel del mieloma que no están fusionadas NO pueden vivir por la falta de ac. nucleicos
-cel plasmáticas que no están fusionadas tmbn mueren
-solo viven aquellas que están fusionadas -> las tengo en mi medio de cultivo -> voy a agarrar solo una célula y la pongo en otro medio de cultivo y que se reproduzca ella solita generando AM´s
¿Qué es un mieloma múltiple?
Tumor de células plasmáticas que provienen de los linfocitos B
Síntesis de anticuerpos monoclonales in vitro
Tecnología del ribosoma display
Tecnología del Ribosoma Display
En un medio pongo ribosomas + RNAm y a.a -> y hacen proteínas
Estructura básica de los anticuerpos
4 cadenas unidas por puentes disulfuro
* 2 cadenas ligeras
* 2 cadenas pesadas
Partes de las cadenas ligeras y pesadas
Región variable y Región constante
¿Cuál es el sitio de unión del antígeno?
Regiones variables
Es la producción de anticuerpos monoclonales en los que la región variable es murina
Quimerización -> parte ratón (25%) y la mayor parte humana se llaman anticuerpos monoclonales quiméricos
Solo las regiones hipervariables de las cadenas ligeras y pesadas son murinas
Humanización -> cuando hay regiones hipervariables de ratón (10%) y todo lo demás es humano
-momab
Monoclonal antibody
Anticuerpos murinos
0% humanos 100% ratón
-> Potencial inmunológico alto
-ximab
Anticuerpos quiméricos
66-75% humanos y 25% ratón
Potencial inmunológico intermedio
-zumab
Anticuerpos humanizados
90% humanos - 10% ratón (o 25% ratón)
Potencial inmunológico bajo
-mumab
Anticuerpos humanos
100% humanos (0% ratón)
-> Potencial inmunológico muy bajo
Función de anticuerpo monoclonal
Anticuerpo monoclonal se unen a los epítopes -> se unen a receptores impide unión de ligando
-O se une al ligando y no es reconocido por receptor
-Se une a proteína de superficie para que otra cel la reconozca como extraño y la destruya
-Puede irse a otra proteína para fomentar que se una con otras células
Mecanismo de acción de los anticuerpos monoclonales
Unión de los anticuerpos monoclonales a:
* Receptores de superficie de membrana
* Proteínas
* Proteínas circulantes
* Causando un efecto directo o indirecto sobre la función de un tejido
Aplicación de anticuerpos monoclonales (3)
Uso en investigación
Determinan la concentración de proteínas (pruebas de embarazo)
Tratamiento para cáncer
“voy por mi biológico” en caso de alergias
Vía de administración de los anticuerpos monoclonales (3)
Vía intravenosa
Subcutánea
Intramuscular
Células de origen canceroso usadas en la creación de hibridomas por su capacidad de proliferación indefinida
Células del mieloma
Técnica que implica la fusión de dos diferentes tipos de células para formar una única célula con propiedades combinadas
Hibridoma
