Eukaryot transkription Flashcards
Hur många nivåer av eukaryot genreglering finns?
Sju nivåer
Hur många olika RNA-polymeraser finns i eukaryoters kärna, och vilka gener transkriberas av dessa?
4 olika
- RNA polymeras I - de flesta rRNA gener
- RNA polymeras II - alla proteinkodande gener, miRNA-gener och gener för andra icke-kodande RNA (ex. de i spliceosomer)
- RNA polymeras III - tRNA-gener, 5S rRNA gener och gener för många andra små RNA
- Mitokondriellt RNA polymeras
Vad är miRNA och siRNA?
miRNA - microRNA som reglerar genuttryck genom att blockera translation
siRNA - “small interfering RNA”, stänger av genuttryck genom riktad degradering
RNA polymeraser har flera subenheter gemensamt, men samtidigt har även subenheter specifika för sig själva.
Vilken är den viktigaste specifika subenheten, och vilket polymeras tillhör den?
CTD hos POL II
CTD - C-terminal domän
Vad består den C-terminala domänen av och vad gör den?
En heptapeptid repeat (52 gånger)
Tyr - Ser - Pro - Thr - Ser - Pro - Ser
Inbindning till CTD katalyserar RNA polymeras II post-transkriptionella modifieringar
Hur många subenheter har eukaryot polymeras?
12 stycken
Vad är uppgiften för RNA polymeras II?
Den ansvarar för syntesen av mRNA
Vad behöver RNA-polymeras för att binda till rätt promotor?
Generella transkriptionsfaktorer (GTF)
Ge exempel på generella transkriptionsfaktorer och dess roll i transkriptions-initiering av RNA polymeras II?
TFIID, har subunits TBP (1) och TAF (11)
- TBP känner igen TATA-boxen
- TAF känner igen andra DNA-sekvenser nära transkriptionens startpunkt och reglerar DNA-bindning av TBP
TFIIB - känner igen BRE-element i promotorn. Accurately placerar RNA polymeras i transkriptionens starting site
TFIIF stabiliserar RNA polymeras-interaktionen med TBP och TFIIB. Hjälper även att locka till TFIIE och TFIIH
TFIIE attraherar och reglerar TFIIH
TFIIH virar upp DNA vid transkriptionens startpunkt, fosforylerar Ser5 från RNA polymerasets CTD. Frigör även RNA polymeras från promoton
Vilket är det första steget i RNA-polymerasets inbidning till operonet?
OFTAST är det inbindningen av den generella transkriptionsfaktorn TBP (TATA-bindande proteinet) till TATA boxen, tillsmmans med TFIID
Vad händer, gällande RNA-polymerasets inbindning till operonet, efter att TBP och TFIID bundit in?
TFIIB binder sedan in till TBP/TFIID-komplexet, som rekryterar RNA polymeras II / TFIIF + TFIIE och TFIIH binder in till promotorn
Vad är TATA boxen?
En DNA-sekvens dit TBP och TFIID binder in på operonet
Denna sekvens ligger 30 nukleotider uppströms från transkriptionens startställe
Vad är preinitiation complex och vad är dess funktion?
- Komplex av RNA polymeras II och 6 st generella transkriptionsfaktorer: TFIIA, TFIIB, TFIID, TFIIE, TFIIE och TFIIH.
- Komplexet positionerar RNA-polymeras vid gene transcription start sites, denaturerar DNA och positionerar DNA:t som ska transkriberas i RNA-polymeras II aktiva säte
Vilka två viktiga funktioner har TFIIH?
- Har helikas-aktivitet som skapar en transkriptionsbubbla vid startstället så att template-strängen exponeras och vi får ett “open complex”. Detta kräver ATP
- Fosforylerar CTD-svansen på RNA-polymeras II som då lossnar från de andra transkriptionsfaktorerna och genen börjar transkriberas
Vilka tre faktorer behövs när TFIIH fosforylerar CTD så att elongeringsfasen i transkriptionen kan börja?
- Capping-faktorer
- Splicing-faktorer
- Polyadynelering-faktorer - faktorer som processar 3’-änden