Enzimas Flashcards
Características generales de las enzimas
Catalizadores Aceleran la velocidad de la reacción Condiciones de acción: <45°C, pH 7, 1 atm Velocidad de reacción: 10^6 - 10^12 ms Alto grado de especificidad
Enzimas
Proteínas catalíticas
No son consumidas en la reacción
Mediadoras de las reacciones del organismo
Otras características de las enzimas
Muy especificas
Actúan a temperatura ambiente
Muy activas (algunas consiguen aumentar la velocidad más de 1 millón de veces)
Peso molecular muy elevado
Tipos de enzimas
Enzimas estrictamente proteicas
Holoenzimas (formadas por una parte proteica, apoenzima, y una fracción no proteica, cofactor o coenzima)
Tipo de enlace entre el sustrato y la enzima
Covalente
Forman el sitio activo (dominio)
Aminoácidos juntos por plegamiento
Sitios que presentan las enzimas
Sitio de unión (complementario) y sitio activo (catalítico)
Reconocimiento
Se da por 3 puntos de contacto (específico) enzima-sustrato
Mecanismos de especificidad enzima-sustrato
Llave-cerradura: Fisher, la enzima tiene una conformación fija, posición rígida, complementaria al sustrato
Ajuste inducido: Koshland, al interaccionar con el sustrato, la enzima cambia su conformación y genera el sitio activo
Coenzima
Estrechamente ligadas: grupos prostéticos (FADH2+, Complejo II)
En forma laxa: actúan como cosustratos, se unen y se liberan de la enzima junto con el sustrato (NADH, biotina, piridoxal)
Cinética enzimática
Informa sobre: velocidad de la reacción, afinidad de las enzimas por los sustratos, efectos de los inhibidores sobre las enzimas
Estado de transición
E + S ES ES# -> EP E + P
EP#: enlaces del sustrato parcialmente rotos, enlaces del producto parcialmente formados
Diferencia energética
Determina la velocidad de la reacción
ΔG#: energía de activación ΔG°
< V de reacc.
>ΔG# = > V de reacc.
K1, K-1, K2 = ?
K1: constante de asociación (energía necesaria para que el sustrato entre a la enzima)
K-1: constante de disociación (energía necesaria para que el sustrato salga de la enzima)
K2: poder catalítico (energía necesaria para hacer el producto y liberarlo)
K-2: no existe porque la reacción ES -> E + P no es reversible
Km = ?
Constante de Michaelis-Menten Km = (k-1 + k2)/k1 Refleja la afinidad de la enzima por el sustrato >Km: menor afinidad (> E+S) ES)
Ecuación Michaelis-Menten
V= (Vmax*S)/(Km+S)
Vmax = k2*E
Ecuación lineal Lineweaver-Burke
1/V0 = Km/Vmax * (1/S) + 1/Vmax
Intercepción en y: 1/Vmax
Pendiente: Km/Vmax
Intercepcion en x: -1/Km
Factores que influyen en la cinética enzimática
Cantidad de sustrato presente (S)
Afinidad de la enzima por el sustrato (Km)
Cantidad de la enzima presente (E)
El poder catalítico de la enzima (K2)
Un incremento en la temperatura = ?
Mayor (<) cinética de las moléculas
Efecto del pH en las enzimas
pH alto o bajo: actividad enzimática pequeña (un pH muy alto o muy bajo puede desnaturalizar a la enzima)
pH óptimo: concentración intermedia de H+, en la cual la enzima en estado activo predomina
Inhibición enzimática
Iones o moléculas, distintas al ligando, interactúan con la enzima y disminuyen su actividad catalítica
Tipos de inhibición enzimática reversible
Competitiva: el I y el S buscan el sitio activo, afecta la afinidad del complejo ES
No competitiva: ambos I y S se asocian a la enzima en sitios distintos, afecta la velocidad de la reacción, no se revierte
Acompetitiva: el I interacciona con el ya formado ES, afecta la afinidad y la velocidad de la reacción
Inhibidores irreversibles
Forman enlaces covalentes y al unirse con al enzima le hacen perder su actividad catalítica
Cooperatividad positiva
Cuando la unión de un ligando facilita la unión del siguiente (hemoglobina)
Cooperatividad negativa
Cuando un ligando disminuye la afinidad de la unión del siguiente ligando
Sitios alostéricos
Sitios diferentes al sitio activo, donde se unen otras moléculas (cofactores y coenzimas)
