Chapitre 1: introduction Flashcards

1
Q

Quel est le but de la pathologie dans la pratique médicale?

A
  • élaborer un diagnostic
  • préciser le pronostic
  • mettre en évidence marqueurs (thérapie)
  • évaluer l’effet des thérapies
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2
Q

Quels sont les types de prélèvement?

A

-cytologies
=> frottis d’un organe
=>par ponction
=> par centrifugation de recueil de liquide cytologique

-prélèvements tissulaires
=> biopsies endoscopiques ou sous repérage radiologique/écho/RMN
=> par analyse des pièces opératoires
=> par autopsie

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3
Q

En quoi consiste la technique d’étalement des cellules sur lames?

A
  • par frottis ou ponction d’un organe
  • déposé sur le bord de lame
  • étalé par clinicien
  • on peut fixer ou non
  • coloration
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4
Q

Quels organes peuvent-être ponctionnés?

A
  • ganglions lymphatiques/adénopathies
  • thyroïde
  • sein

sous repérage échographique

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5
Q

En quoi consiste la technique de centrifugation d’un liquide récolté ou après ponction?

A

-liquide généralement trop volumineux pour être étalé
=> centrifugation
-placé dans tubes
-matériel centrifugé sur lame (culot-spot) généralement au centre
-coloré

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6
Q

En quoi consiste la cytologie monocouche dite aussi cytologie en couche mince ou cytologie en milieu liquide?

A

-principe d’aspiration et filtration
-très utilisée dans détection du cancer du col utérin
-après frottis, matériel dans flacon fixateur alcoolique dûment numéroté avec coordonnées patientes
-matériel dispersé, filtré, aspiré et transféré sur lame par automate
-avantage: matériel résiduel restant dans le flacon de fixateur
=> techniques complémentaires (recherche HPV)

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7
Q

Quelle est l’avantage de la cytologie?

A
  • rapide
  • peu couteuse
  • résultat fiable si interprétée par un pathologiste averti
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8
Q

Pourquoi l’examen cytologique ne fournit que des renseignements partiels voir incertains?

A

-certaines anomalies cyto-nucléaires ne sont pas spécifiques
=> certaines atypies rencontrées dans l’inflammation peuvent mimer un cancer lors de l’examen cytologique

-ne donne pas d’architecture tissulaire (on ne sait différencier un cancer in situ d’un invasif)

=> examen de dépistage et d’orientation
=> contrôle histologique (biopsie)e presque toujours nécessaire

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9
Q

Quels sont les éléments qui conditionnent la qualité du diagnostic pathologique?

A
  • pièces doivent être dûment identifiées avec renseignements cliniques adéquats
  • fixation des pièces opératoires doit être rapide, si possible congelé et stockage dans biobanque
  • examen macroscopique
  • techniques permettant la réalisation des coupes
  • compte rendu doit être précis
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10
Q

En quoi consiste l’encodage?

A
  • chaque pièce arrive avec une feuille de demande avec coordonnées du patient et renseignements cliniques adéquats
  • numéro individuel et code barre au labo
  • si la pièce est “fraîche”, elle doit arriver le plus rapidement possible
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11
Q

En quoi consiste l’examen microscopique et fixation?

A
  • pièces pesées, mesurées, orientées, leurs marges/berges de résection (limite d’exérèse) sont tatouées à l’encre de chine et découpées (tranchées)
  • congelation
  • pièce opératoire fixée le plus rapidement possible
  • utilisation FORMOL à 10% tamponne à pH neutre ou légèrement alcalin
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12
Q

Quelles sont les règles pour une bonne fixation?

A

-avant fixation organes creux, ils doivent être ouverts
-organes pleins tranchés en fines tranches de 3 à 10 mm au max
-volume fixateur suffisant (10 fois le volume de la pièce)
-fixation doit être longue (formol fixe au max 1mm d’épaisseur de tissu par heure
=> durée fixation minimale de 2 à 5h
=> 24/48h pour une pièce opératoire
-attention à la sous-fixation et sur-fixation

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13
Q

Pourquoi utiliser de l’encre de chine?

A
  • visualisation des berges d’exérèse

- fournit au chirurgien l’information que l’exérèse de la tumeur est complète ou non

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14
Q

En quoi consiste la déshydratation et la mise en paraffine?

A

-coupes histologiques classiques sont obtenues à partir de bloc paraffinés
-tissus humains abondants en eau
-déshydratation
=> dans automates par passage des bains d’alcools de gradients (concentration) progressifs (70,95,100%)
-alcool éliminé par xylène(qui dissout aussi les graisses dont adipocytes optiquement vide)
-processus qui prend 6 à 12h
-échantillons sont inclus dans la paraffine à 56°C

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15
Q

Comment se font les coupes et coloration de routine à l’hematoxyline/éosine?

A
  • bloc découpé au microtome
  • coupes mesurent 3 à 5 microns
  • “ruban” de différents niveaux de coupes
  • lame préalablement numérotée et vont être colorées
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16
Q

De quelles natures sont des colorants utilisés?

A
  • aqueux ou alcooliques
  • pour dissoudre la paraffine
  • réhydrater
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17
Q

Quel est le colorant le plus couramment utilisé?

A

hématoxyline-éosine

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18
Q

Qu’est-ce que l’hématoxyline?

A
  • couleur bleu/mauve
  • colorant basique
  • va se fixer sur composants naturellement acide de la cellule (ADN/ARN)
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19
Q

Qu’est-ce que l’éosine?

A
  • couleur rose/rouge
  • colorant acide qui va se fixer sur les composants naturellement basique de la cellule et en particulier le cytoplasme qui est naturellement basique
20
Q

Que colore le safran?

A

colore collagène en jaune

21
Q

Comment se fait le processus de déparaffinage?

A
  • réhydratation
  • coloration lames
  • 1h
  • automates de coloration
22
Q

Citez les techniques morphologiques particulières.

A
  • examen extemporané
  • coloration spéciales
  • examens immunohistochimiques
  • techniques de biologie moléculaire
23
Q

Qu’est-ce que l’examen extemporané?

A
  • rapide, moins de 30 min
  • tissus frais, non fixés
  • encodage et examen macroscopique
  • congélation dans cryostat à moins 20°C
24
Q

Quelles sont les limites de l’examen extemporané?

A

-congélation altère la morphologie
-examen extempo n’est pas aussi fiable qu’un examen effectué dans un processus technique classique
-on n’effectue qu’un ou deux prélèvements d’une lésion tumorale.
=> parfois tumeur volumineuse alors examen tempo ne donne qu’un reflet partiel de la lésion

=>n’est pratiqué que si le diagnostic qu’il apporte est susceptible de modifier le déroulement chirurgical

25
Q

Dans quelles conditions pratique-t-on l’examen extemporané?

A
  • déterminer la nature bénigne (par exemple une lésion inflammatoire peut mimer cliniquement ou à l’imagerie une tumeur) d’une lésion qui n’a pas pu être effectuée par les techniques classiques
  • s’assurer que la lésion enlevée par le chirurgien est bien représentative
  • s’assurer que les limites de résection sont saines (pas nécessairement effectuer un prélèvement congelé)
  • tissus calcifiés ne peuvent être “techniqués et coupés” en extemporané
26
Q

Vrai/Faux
Le diagnostic fourni en extempo est un diagnostic de présomption qui doit toujours être confirmé par les techniques classiques par fixation, inclusion et mise en paraffine.

A

Vrai

27
Q

Que mettent en évidence les colorations spéciales?

A
  • constituants particuliers de la cellule (mucus, glycogène..)
  • composants de la matrice extra-cellulaire (collagène, amyloïde..)
  • agents infectieux (champignons, mycobactéries..)
28
Q

Que colore le PAS?

A
  • glycogène
  • champignons
  • membrane basale
  • mucine (mucus) colorés en rouge
29
Q

Que colore le bleu Alcian?

A

Mucines acides colorés en bleu

30
Q

Que colore le rouge Congo?

A

Amyloïde colorée en rouge brique

31
Q

Que colore le Perls?

A

Fer coloré en bleu

32
Q

Que colore le Fontana?

A
  • mélanine

- lipofuschine coloré en brun/noir

33
Q

Que colore le trichrome de Masson?

A
  • collagène coloré en bleu ou vert

- muscle en rouge/brun

34
Q

Que colore l’Oil Red?

A

Lipides colorés en rouge

35
Q

Que colore le Ziehl?

A

MYCOBACTERES COLOREES EN ROUGE

36
Q

Que colore Ag de Grocott?

A

Champignons en noir/argenté

37
Q

Vrai/faux

L’amyloïdose est biréfringente lorsque l’on examine en lumière polarisée.

A

Vrai

38
Q

En quoi consistent les examens immunohistochimiques?

A
  • mettre en évidence diverses protéines
  • considérées comme antigènes ATG
  • présentes dans les tissus (noyau, cytoplasme ou membrane cytoplasmique)
  • à l’aide d’Ac (ATC)
39
Q

A quoi peut s’appliquer la techniques immunohistochimiques?

A
  • préparations cytologiques
  • coupes paraffinées
  • coupes effectuées à partir de tissus frais-congelés (certains AG suite à la fixation en effet ne peuvent être détectés)
40
Q

Qu’est-ce qui est indispensable dans les techniques immunohistochimiques?

A

-sur tissus fixés, une fixation adéquate est indispensable
-sous-fixation ou sur-fixation (protéines/ATG se recroquevillent)
=> sites antigéniques masqués
=> résultats faussement négatifs

41
Q

Quelles sont les indications des techniques immunohistochimiques?

A
  • intérêt diagnostique (tumeurs ou protéines virales)
  • intérêt pronostique: mise en évidence certains marqueurs indice de prolifération par exemple
  • intérêt thérapeutique: cibles thérapeutiques
42
Q

Expliquez le fonctionnement de la technique d’immunohistochimie.

A

si on veut mettre en évidence une protéine particulière comme la cytokérltine (CK):
-considérée comme un ATG
-on va la détecter avec un ATC spécifique
=> ATC primaire de souris
-ATC se fixe sur ATG-CK (si CK présente)
-ajout ATC secondaire antisouris couplé à un polymère lié à une peroxydase
=> va se fixer sur ATC primaire
=> réaction oxred qui précipite le polymère
=> chromogène (brun/jaune ou rouge) visible

43
Q

Quels sont les 4 grands types de marquages immunohistochimiques?

A
  • marquage nucléaire
  • marquage cytoplasmique
  • marquage membranaire
  • marquage mixte membrano-cytoplasmique
44
Q

Que permettent les techniques de biologie moléculaire?

A
  • mise en évidence de mutations spécifiques
  • recherches de clonalité (lymphomes)
  • génotypage de certaines tumeurs
45
Q

En quoi consistent les techniques d’hybridation in situ?

A
  • mise en évidence sur coupe de séquences d’ARN ou ADN
  • sondes d’acides nucléiques complémentaires
  • couplées à un traceur radioactifs (sonde chaude) ou enzyme (sonde froide) ou fluorochrome (sonde fluorescentes)
  • met en évidence séquences virales, délétions ou amplification gènes…
  • dénature par la chaleur les 2 brins d’ADN du noyau à l’endroit où on cherche le gène cible
46
Q

Que doit comporter les résultats d’analyse anatomopathologique?

A
  • écrit et signé
  • conclusion synthétique
  • donner un diagnostic lésionnel ou hypothèses
  • terminologie actualisée et comprise par clinicien
  • comporter des éléments de pronostic (surtout en pathologie tumorale)
  • tenir compte de la prise en charge pluridisciplinaire du patient
  • répondre aux critères d’assurance qualité