Brightfield microscopy Flashcards
On the objective lens some information is written. What does “plan” tell us?
It is the corrected field curvature e.g. plan/NA
What is field curvature?
Det er et optisk problem, hvor flade objekter kun er skarpe ved nogle områder i billedet. Dette skyldes den runde form på optiske elementer, som derved projicerer billedet tilbage som rundt i stedet for flat.
How does the field curvature get corrected?
By the use of field flattener
Chromatic aberration can also be corrected. What are these correction called?
Acromatic
Apochromatic
Fluorite/semi apochromat
What is chromatic aberration?
Et fænomen hvor linsen ikke kan fokuserer på alle bølgelængder af lyset på samme tid, som skyldes at linsen har forskellige refractive index for forskellige bølgelængder af lys
Hvad korrigerer achromatic lens for?
For to farver: rød og blå
Hvad korrigerer fluorite/semi apochromat lens for?
For tre farver: rød, blå og grøn
Hvad korrigerer apochromat lens for?
Alle farver: rød, blå, grøn og infrarød
Hvad er diffraction?
Det er en bølgelængdes evne til at diffract i forskellige retninger.
Hvad er interference?
Når man har to bølgelængder fra samme kilde, som pulserer samtidig vil man kunne få interference af disse to bølgelængder.
De kan derved lave dobbelt amplitude eller halv amplitude
Hvad er constructive interference?
Når amplituden er dobbelt så stor som den rigtig skulle have været
Hvad er destructive interference?
Når amplituden er nærmest flad, end den rigtig skulle have været
Hvad viste Thomas Youngs two split experiment?
Lysets interference mønstre. Når bølgelængder fra samme kilde peges mod en boks med 2 huler, vil lyset diffract gennem disse to. dette vil skabe mørke (destructive interference) hvor bølgelængderne er flade og lyse områder (constructive interference), hvor bølgelænderne er større.
Hvad bruges diaphragm til?
Bestemmer hvor meget lys der lukkes igennem. Man ønsker en åbning på ca. 80 %
Where is the focal point?
Punktet, hvor transmitterede lys fra linsen mødes.
Et mikroskop består af linser og filtre, der betegnes som conjugate planes, hvad kan man der dele conjugate planes op i?
Conjugate illumination planes
Conjugate images planes
Hvilke linser og filtre består conjugate illumination planes af?
Diaphragm
Objective back focal plane
plane outside the Eyepiece
Hvilke linser og filtre består conjugate images planes af?
Field diaphragm Condenser lens Specimen plane Eyepiece diaphragm Film plane
Hvad fokuserer Conjugate illumination planes?
Lyset
Hvad fokuserer Conjugate images planes?
Specimen
Beskriv stepsene for Köhlers princip i korrekt placering af lyskilden.
Fokuser på prøven Luk field diaphragm Juster condenseren så lyset er skarpt Centrer condenseren i midten af billedet Åben field diaphragm
Hvad betyder optical resolution?
Evnen til at vise detaljer af et objekt på et billede.
Beskriv hvad phase contrast microscopy er
Er et skift i fase som konventeres ind til en ændring i amplitude ad lys
Hvilke to elementer er der ekstra tilføjet i phase contrast microscopy?
Phase constrast ring
Annular diaphragm ring
Hvad er annular diaphragm ring?
Er en ring der sidder i condensoren
Hvad er phase constrast ring?
En ring der sidder i objectivet
Når lyset fra et phase constrast microscopy hits the specimen vil lyset være skiftet i fase og blive refracted i forskellige retninger. Hvilken farve vil det refracted lys, som rammer phase constrast ringen i objektivet være?
Mørk
Når lyset fra et phase constrast microscopy hits the specimen vil lyset være skiftet i fase og blive refracted i forskellige retninger. Hvilken farve vil det refracted lys, som ikke rammer phase constrast ringen i objektivet være?
Lyst
Hvilke specimens kan man se i et phase contrast microscopy?
Transperente specimens:
Levende celler, mikroorganismer, væv, fibrer, cellulærer organeller osv.
Fordele ved phase constrast microscopy?
Man kan se ufarvede prøver og marine organismer
Ulemper ved phase constrast microscopy?
Mørke billeder er ofte usikre og ukorrekte.
Hvad er en DIC microscopy?
En teknik hvor konstrast bliver forstærket i ufarvede, transparente prøver.
Beskriv kort princippet i DIC microscopy
Lyset føres igennem en polarize prism condencor, som deler bølgelængderne i to beams, som føres igennem condensoren og specimens og objektet for at blive samlet i en ny prism der samler de polariserede bølgelængder og udelukker direkte bølgelængder. Billedet dannes ud fra forskellen mellem de to beams (retardation difference)
