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BIO2162 - compléments biocell > 6 - croissance et division cellulaire 1 > Flashcards

6 - croissance et division cellulaire 1 Flashcards

1
Q

phases du cycle de division celR (CDC) (3)

A
  • pour synthèse ADN (phase S)
  • pour séparation chr (mitose, phase M)
  • phases G1 et G2 -> croissance celR
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Q

phase G1 (gap)

A

taille de cell atteint seuil critique, décide si fait phase S ou G0 (quiescence) selon envt

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3
Q

phase S (synthèse)

A

réplication ADN

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4
Q

phase G2 (gap)

A

taille de la cell double

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Q

phase M

A

duplication cytoplasme + génome, répartis en 2 parts égales (phases PMAT)

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6
Q

def temps de génération (3)

A
  • temps nécessaire pour terminer cycle celR (G1+S+G2+M)
  • pr 1 ind/pop
  • cells humaines = 24h VS E. coli = 20 min
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7
Q

détermination longueur de chq phase (3)

A
  • pr 1 pop aléatoirement distribuée à travers ≠ phases du CDC : 2 façons
  • 1) proportion de chq phase ds 1 pop
  • long de phase proportionnelle à sa fraction ds la pop
  • 2) cytométrie en flux (avec marqueurs de comptage)
  • utilisation de tricium-thymidine et autoradiographie / BrdU, anti-BrdU, DAPI et microscopie de fluorescence
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8
Q

détermination longueur de la phase avec 3H-thymidine (3)

A
  • marquage des cells pour voir nvelle réplication ADN
  • remplacement de thymine endogène par 3H-thymidine
  • grains argent exposés à radioactivité visibles
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9
Q

détermination longueur de la phase avec BrdU, anti-BrdU, DAPI (2)

A
  • BrdU = Ac utilisé en combi avec anti-BrdU -> fluorescence
  • DAPI montre noyaux cells, quelles cells en phase S
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10
Q

analyse par cytométrie en flux (3)

A
  • coloration avec DAPI -> mesure Qt ADN/cell par fluorescence (FL)
  • mesure ampliture FL pr det phase (FL proportionnelle à phase)
  • mesure pr chq cell indL -> aperçu de pop
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11
Q

cultures synchronisées pout analyses biochimiques (4)

A
  • par exploitation forme cells en culture
  • par trieuse de cells (FACS = fluorescence activated cell sorter)
  • forme ≠ des cells en culture pdt phase M (confo ronde fibroblastes en phase M)
  • FACS : tag cells avec Ac puis séparation cells
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12
Q

de quoi dépend division celR chez cells animales (3)

A
  • de facteurs externes
  • facteurs de croissance
  • dépendance d’ancrage
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13
Q

qd les cells se divisent-elles

A

qd conditions favorables

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14
Q

facteurs de croissance (GF) (3)

A
  • GF (growth factors) = mitogènes
  • influence de division ds sérum (produit par coagulation) mais pas ds plasma (produit par centrifugation)
  • coagulation sang -> lib° PDPF (facteur de croissance dérivé des plaquettes)
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15
Q

facteurs de croissance : PDPF (4)

A
  • act° 1 RTK (récepteur tyrosine kinase) -> stimulation division cells entourant vaisseaux (=boost multiplication celR pr régération tissus)
  • act° Ras par RTK -> act° cascade MAPK aboutissant sur FT E2F
  • cibles de E2F -> gènes encodant prot pr entrée en phase S
  • Myc -> act° FT E2F pr faire entrer cell ds phase de division
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16
Q

dépendance d’ancrage et RTK (6)

A
  • dépendance ancrage donnée par la MEC
  • cells aplaties -> bcp + jonctions cell-matrice (=point de contact focal)
  • jonctions avec MEC = points contacts focaux + hémidesmosomes
  • liens avec MEC -> utilisation intégrines
  • intégrines -> confo active ou inactive
  • liaison intégrine actine avc α et β subunits -> liaison avec talin (prot acc) + vinculin (adaptateur)
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17
Q

point de contact focal (4)

A
  • extrémités des filaments actine liés aux intégrines
  • contiennent pTyr -> act° voies signalisation par MEC
  • FAK (focal adhesion kinase) = tyrosine kinase recrutée aux points de contact focaux
  • autophosphorylation de FAK + liaison de prot kinase Src
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18
Q

que peuvent faire tyrosines kinases Src (2)

A
  • autophosphorylation
  • act° voie de signalisation Ras via prot à domaines SH2
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19
Q

qu’activent les 2 voies (mitogènes et points de contact focaux)

A

même voie signalisation avec même résultat : cascade MAPK

20
Q

que régulent les composantes cytoplasmiques (2)

A
  • initiation phase S
  • phase M
21
Q

que forme fusion de 2 cells

A

hétérocaryons (fusion par utilisation agents mitogènes, électrofusion)

22
Q

activateur de phase S (SPF) (2)

A
  • début immédiat de phase S par noyau en G1
  • SPF actif seulement ds cells en G1
23
Q

activateur de phase M (MPF) (2)

A
  • induit condensation chr
  • MPF actif avec ttes phases de croissance celR (G1, S, G2)
24
Q

inhibiteur de formation du MPF (2)

A
  • montré par fusion G2/S -> présent ds cells en phase S
  • noyau G2 entre jamais en phase M si autre noyau en phase S
25
Q

que permettent act° de SPF et MPF

A

passage “points de contrôle” par cell, passage 1 phase à 1 autre

26
Q

3 points de contrôle du CDC (5)

A
  • entrée dans phase S
  • entrée dans phase M
  • sortie de phase
  • act° MPF après phase S, 1 seule fois pdt CDC (sauf méiose)
  • act° SPF après phase M, 1 fois ds CDC
27
Q

que sont MPF et SPF

A

des kinases cycline dépendante (CDK), dimères d’1 kinase et cycline dont niveaux celR dépendent de phase du CDC

28
Q

identification du MPF (7)

A
  • à partir d’1 facteur promoteur de maturation (MPF) chez oeufs de grenouille
  • division rapide chez grenouille
  • MPF actif ds cells en métaphase II + progression croissance celR de prophase I à métaphase II (méiose)
  • facteur actif de mitose provoque maturation oeufs
  • détection présence de MPF
  • MPF compo de 2 prot -> p34 et p56
  • id° fractions actives
29
Q

prot p56 de MPF (3)

A
  • p56 = cycline
  • act° MPF aux C° élevées
  • synthèse pdt interphase et dégradation pdt mitose
30
Q

prot p34 de MPF (4)

A
  • p34 = serine/thréonine kinase
  • inact° sans cycline (qd pas ds 1 phase de pic) -> blocage site actif de prot par boucle T
  • act° p34-cycline par CAK (CDK activating kinase)
  • MPF -> kinase cycline dépendante (CDK)
31
Q

rôle hélice PSTAIRE

A

liaison kinase avec cycline

32
Q

structure de cycline (4)

A
  • 2 grpes de 5 hélices
  • motif MRAIL -> liaison CDK à certains substrats seulement
  • sans MRAIL, liaison autre grpe de substrats
  • définit affinité de kinase à 1 type de prot
33
Q

action de liaison avec cycline (2)

A
  • élément essentiel pr act° kinase p34
  • enlève boucle T du site actif de kinase
34
Q

que fait MPF activé par sa cycline (2)

A
  • phosphorylation prot nécessaires pr entrée en phase M
  • 3 substrats de MPF : condensines + lamines nucléaires (H1) + MAPs
35
Q

substrats de MPF : condensines (3)

A
  • α-condensine 1 et 2
  • implication ds condensation chr
  • act° condensines par phosphorylation
36
Q

substrats de MPF : lamines nucléaires (2)

A
  • α-lamine + DAPI + α-phosphoHistone H1
  • phosphorylation lamines nucléaires (FI ds noyau) nécessaire pr désassemblage
37
Q

substrats de MPF : MAPs (2)

A
  • aug° instabilité dynamique (catastrophine > MAP)
  • phosphorylation prot acc aux MT (MAPs) -> aide remodelage du réseau
38
Q

fin phase M : inact° MPF (3)

A
  • inact° MPF par ubiquitine ligase -> APC (Anaphase Promoting Complex) -> ciblage cycline pr dégradation
  • act° APC ds phase M par liaison avec sous-unité Cdc20
  • synthèse Cdc20 en G2 + liaison seulement à 1 APC phosphorylée par MPF
39
Q

qu’activent les cyclines (2)

A
  • cyclines G1/S + cyclines phase S activent 1 kinase cycline dépendante (CDK) + changement gamme de substats phosphorylés
  • régulation complexes de kinase -> det début-fin chq phase
40
Q

par quoi diffèrent substrats de S-CDK et M-CDK (2)

A
  • site phosphorylation SPXK est entre site actif de kinase
  • motif RXL pr liaison patch hydrophobe (MRAIL) sur cycline de phase S
41
Q

prot rétinoblastome (Rb) (2)

A
  • 1 des subtrats de G1/S-CDK
  • inhibiteur FT E2F = inhibition division celR
42
Q

prot Cdc6 (4)

A
  • subtrat de S-CDK
  • essentielle pr initiation réplication ADN
  • synthèse Cdc6 en G1 seulement
  • après phosphorylation, Cdc6 = cible de ubiquitine ligase SCF
43
Q

ubiquitine ligase SCF (3)

A
  • dégradation cyclines G1/S qd phosphorylées par S-CDK + cyclines S qd phosphorylées par M-CDK
  • SCF = Skp/Cullin/F-box
  • dégradation cibles phosphorylées uniquement
44
Q

levure fissipare VS bourgeonnante

A
  • levure fissipare : 1 CDK + 1 cycline S + 1 cycline M
  • levure bourgeonnante : 1 CDK + 3 cyclines G1/S + 2 cyclines S + 4 cyclines M
45
Q

survol cycle CelR au niv moléculaire (7)

A
  • 1) taille de cell active G1/S-CDK
  • 2) act° synthèse de S-cyclines par G1/s-CDK
  • 3) dégradation G1/S-cyclines phosphorylées par S-CDK par SCF
  • 4) act° transcription M-cyclines par S-CDK
  • 5) act° M-CDK + phosphorylation S-cyclines et APC
  • 6) dégradation S-cyclines phosphorylées par SCF
  • 7) dégradation M-cyclines par APC

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