3.7-Anticorps et thérapie génique Flashcards
c’est quoi les anticorps et comment ils sont produits
c’est des immunoglobulines qui sont produites par les lymphocytes B après leur activation par un antigène spécifique
structure des anticorps (4 composantes)
1) deux chaines légères
2) deux chaines lourdes
3) sites de fixation à l’antigène variables
4) domaine constant (Fc) qui lie aux cellules immunitaires( phagocytes) et protéines du sérum (complément)
pourquoi les anticorps sont variables
à cause de leurs casettes V et D qui subissent des mutations pendant la recombinaison VDJ
la recombinaison VDJ est médiée par quelle 2 protéines
RAG1 et RAG2
4 étapes pour l’immunité humorale et sélection clonale des lymphocytes B
1) liaison Ag-récepteur
2) sélection clonale
3) prolifération
4) différentiation en plasmocytes (produisent Ac) ou en cellules mémoires
c’est quoi les anticorps polyclonaux
un ensemble d’anticorps dirigés contre différents épitopes d’un antigène. produits par un ensemble de clones de lymphocytes B suit à l’inoculation d’un animal par un antigène. Ac purifié du sérum
c’est quoi les anicorps monoclonaux
anticorps dirigés vers un seul épitope pour un antigène, produit par un seul clone de lymphocytes B.
Produit par lignée cellulaire hybride (lymphocyte B+cellule cancereuse de myélome)
comment la qualité varie entre un Ac polyclonal vs monoclonal
qualité variable d’un lot à l’autre pour polyclonal.
Qualité constante d’un lot à l’autre pour Ac monoclonal
étapes de la production d’anticorps monoclonaux
1) immuniser souris avec un antigène (injection)
2) fusion des cellules (lympho B+cell. myélome) avec polyéthylène glycol
3) hybridomes individuels sont évalués pour la production d’Ac
4) clone désiré est amplifié en culture cellulaire
5) purification de l’Ac à partir du milieu de culture
c’est quoi une alternative à la production d’Ac monoclonaux chez la souris
utiliser l’E.coli pour produire les Ac
c’est quoi l’ELISA
méthode de détection qui utilise des anticorps poly/monoclonaux.
Ag-Ac1-Ac2-lavages et détection
comment améliorer la spécificité et la sensibilité du test diagnostique ELISA
en utilisant les Ac monoclonaux au lieu de polyclonaux
comment les anticorps monoclonaux peuvent être humanisés (2 ways)
1) production d’Ac chimériques (Fc humain, avec Fv souris)
2) anticorps humanisé (CDRs souris et le reste humain)
**CDR=complementary determining regions
c’est quoi les souris xéno
création des souris qui sont seulement capables de produire des Ac humains
3 étapes pour la production des souris Xéno
1) inactivation de la machinerie de production d’Ac chez la souris
2) integration des loci pour les immunoglobulines humaines dans un chromosome de la souris
3) souris produit seulement Ig humaines
