3.1-approches de livraison de matériel génétique

Question 1

2 méthodes de transfection

Answer 1

physique ou chimique

Question 2

4 méthodes chimiques de transfection

Answer 2

1)Coprécipitation
2)Lipofection
3)Utilisation des polycations
4) Fusion de protoplastes

Question 3

3 méthodes physiques de transfection

Answer 3

1) électroporation
2) biolistique
3)micro-injection

Question 4

c’est quoi la lipofection/transfection par liposomes

Answer 4

co incubation des liposomes avec l’ADN pour former un complexe Liposome-ADN et ajouter ce complexe aux cellules

Question 5

C’est quoi l’électroporation

Answer 5

permeabilisation de la membrane de la cellules par un courant électrique pour entrer le plasmide en formant des pores dans la membrane

Question 6

4 difficultés de la biolistique pour livrer l’ADN nu

Answer 6

1) élimination rapide par la cellule
2)présence de nucléases qui reduisent leur demi-vie
3) absence de spécificité de distribution
4) faible efficacité de capture par les cellules

Question 7

7 systèmes de transfection spécifiques non-virales

Answer 7

1) électroporation
2) biolistique
3) micro-injection
4) couplage du siARN à un lipide
5)utilisation de bactéries non pathogènes
6) Dendrimères
7) Transposons

Question 8

4 systèmes de transfection virals

Answer 8

1) Adénovirus
2) rétrovirus
3)Lentivirus
4)AAV

Question 9

c’est quoi la méthode de couplage d’ARN à un lipide

Answer 9

couplage de l’ARN à une molécule lipidique comme le cholestérol OU dans des nanoparticules de lipoprotéines

Question 10

que se passe dans la cellule après une transfection d’un complexe ARN-lipide (2 things)

Answer 10

1) la portion sens de l’ARN est dégradée
2) la portion antisens de l’ARN joint au complexe RISC et inactive une ARNm spécifique

Question 11

c’est quoi la méthode d’utilisation de bactéries non pathogènes pour transfecter(avec ARN)

Answer 11

le shARN est livré dans la bactérie qui sera converti en siARN par le complexe RISC

Question 12

Les bactéries non pathogènes sont utilisés pour quels organismes comme méthode de transfection

Answer 12

souris in-vivo ou cellules cancereuses

Question 13

c’est quoi le dendrimères

Answer 13

molécules qui peuvent former des complexes avec l’ADN plasmidique, le shARN, siARN ou les sondes ADN pour effectuer la transfection

Question 14

c’est quoi la transposase

Answer 14

une enzyme qui peut exciser n’importe quel fragment d’ADN qui est entouré de séquences répétés d’ADN à ses 2 extrémités

Question 15

3 systèmes utilisés en thérapie génique avec les transposases

Answer 15

1) sleeping beauty
2)Tol2
3)PiggyBac

Question 16

c’est quoi l’Adénovirus

Answer 16

virus qui ne s’integre pas dans le génome et infecte les cellules latentes et les cellules en division

Question 17

limites d’ADN exogène qui peut être inseré dans un adénovirus

Answer 17

36Kb

Question 18

2 limites à l’utilisation de l’adénovirus comme méthode de transfection

Answer 18

1) l’infection est non-spécifique
2) peut causer des réactions auto-immunes fatales

Question 19

c’est quoi le retrovirus

Answer 19

virus qui infecte+integre seulement les cellules en mitose, non toxique pour les cellules

Question 20

2 limites pour l’utilisation du rétrovirus comme méthode de transfection

Answer 20

1) cause insertion du matériel génétique aléatoire dans le génome
2) peut causer activation des oncogène et ainsi la leucémie

Question 21

rétrovirus vs lentivirus

Answer 21

gamma-rétrovirus=infecte et integre seulement des cellules en division

Lentivirus=infecte et integre des cellules latentes, induis rarement une réponse immunologique

Question 22

c’est quoi la limite de l’ADN exogène inseré dans un AAV

Answer 22

4.5Kb

Question 23

c’est quoi l’AAV

Answer 23

virus qui est spécifique à certains types cellulaires/tumeurs qui a besoin la présence d’infection par un virus de soutien (herpesvirus/adénovirus)