3.2-ARNi Flashcards
c’est quoi l’ARN/ADN antisens
séquence d’ARN/ADN complémentaire à la totalité/une partie d’un ARN fonctionnel (ARNm)
comment l’ARN/ADN antisens est livré dans la cellule
avec un vecteur d’expression
3 caractéristiques de l’ARN/ADN antisens
1) doit résister aux nucléases cellulaires
2) 15-24nt
3) ajout de methoxymethyl nucléotides
3 types d’ARN interférence
shARN, siARN,miARN
c’est quoi les siARN
21-23nt qui recrutent le complexe RISC pour cliver l’ARNm
c’est quoi le shARN
short hairpin ARN
application possible de thérapie avec le shARN
knockdown d’une gène avec des particules lentivirales qui contiennent des shARN
2 avantages d’utiliser le shARN comme thérapie avec les particules lentivirals
1) haute efficacité d’infection et d’integration dans le génome
2) peut identifier cellules infectées par expression de GFP
c’est quoi le mode d’action des miARN (5 étapes)
1) formation de Pri-miARN (transcrit primaire)
2) maturation du pri-miARN en pre-miARN par l’ARNase Drosha
3) exportation, capture par l’ARNase DICER (maturation du miARN)
4)chargement du complexe RISC qui sépare les brins d’ARN
5) Répression d’un ensemble d’ARNm qui sont complémentaires partiellement avec le miARN
comment le pri-miARN est maturé?
par l’ARNase Drosha en perdant les extrémités 5’ et 3’
est-ce que le miARN peut être codé par un plasmide d’expression?
oui
c’est quoi les méganucléases
petites endonucléases de 14-40pb qui sont présente dans la cellule mais doivent être modifiées pour reconnaitre une séquences spécifique
utilité spécifique des meganucléases
traiter la dystrophie musculaire de Duchenne
c’est quoi la ZFN
endonucléases qui reconnaisent des séquences spécifiques et réparent par le mécanisme d’excision-réparation ou recombinaison homologue
3 étapes du mécanisme d’action du ZFN
1) insertion dans l’hélice alpha dans le sillon majeur de l’ADN
2) doight de zinc reconnait triplet de nucléotides spécifique
3) FokI est actif et clive un brin d’ADN
difficulté pour le ZFN
difficulté dans la synthèse de doigts de zinc spécifiques
c’est quoi les ribozymes
enzymes à base d’ARN qui peut être associé à des ARNm
mode d’action du ribozyme
après la trnscription, le ribozyme se coupe pour entrainer la formation d’une ARNm défectueux et cet ARN est éliminé par la cellule
c’est quoi le riboswitch
ribozymes associés à un interrupteur (comme une drogue)
mode d’action du riboswitch
En absence de drogue (switch) l’ARNm est dégradé.
Exposition à une drogue change la conformation de l’ARN, ribozyme inactivé et la dégradation de l’ARNm cible est arrêtée
c’est quoi un aptamer
petite molécule d’ARN/ADN avec une structure particulière qui peut interagir avec un récepteur
utilité des aptamers
utilisation comme méthode de livraison de miARNou siARN hautement spécifique
mécanisme d’action des aptamers
lié à un récepteur de surface et active la voie de l’endocytose
à quoi l’aptamer peut être couplé (2 things)
1) siARN db
2) liposome contenant siARN
c’est quoi le macugen
aptamer d’ARN modifié ciblant VEGF dans le traitement de la dégénérescance maculaire
