3.2-ARNi

Question 1

c’est quoi l’ARN/ADN antisens

Answer 1

séquence d’ARN/ADN complémentaire à la totalité/une partie d’un ARN fonctionnel (ARNm)

Question 2

comment l’ARN/ADN antisens est livré dans la cellule

Answer 2

avec un vecteur d’expression

Question 3

3 caractéristiques de l’ARN/ADN antisens

Answer 3

1) doit résister aux nucléases cellulaires
2) 15-24nt
3) ajout de methoxymethyl nucléotides

Question 4

3 types d’ARN interférence

Answer 4

shARN, siARN,miARN

Question 5

c’est quoi les siARN

Answer 5

21-23nt qui recrutent le complexe RISC pour cliver l’ARNm

Question 6

c’est quoi le shARN

Answer 6

short hairpin ARN

Question 7

application possible de thérapie avec le shARN

Answer 7

knockdown d’une gène avec des particules lentivirales qui contiennent des shARN

Question 8

2 avantages d’utiliser le shARN comme thérapie avec les particules lentivirals

Answer 8

1) haute efficacité d’infection et d’integration dans le génome
2) peut identifier cellules infectées par expression de GFP

Question 9

c’est quoi le mode d’action des miARN (5 étapes)

Answer 9

1) formation de Pri-miARN (transcrit primaire)
2) maturation du pri-miARN en pre-miARN par l’ARNase Drosha
3) exportation, capture par l’ARNase DICER (maturation du miARN)
4)chargement du complexe RISC qui sépare les brins d’ARN
5) Répression d’un ensemble d’ARNm qui sont complémentaires partiellement avec le miARN

Question 10

comment le pri-miARN est maturé?

Answer 10

par l’ARNase Drosha en perdant les extrémités 5’ et 3’

Question 11

est-ce que le miARN peut être codé par un plasmide d’expression?

Answer 11

oui

Question 12

c’est quoi les méganucléases

Answer 12

petites endonucléases de 14-40pb qui sont présente dans la cellule mais doivent être modifiées pour reconnaitre une séquences spécifique

Question 13

utilité spécifique des meganucléases

Answer 13

traiter la dystrophie musculaire de Duchenne

Question 14

c’est quoi la ZFN

Answer 14

endonucléases qui reconnaisent des séquences spécifiques et réparent par le mécanisme d’excision-réparation ou recombinaison homologue

Question 15

3 étapes du mécanisme d’action du ZFN

Answer 15

1) insertion dans l’hélice alpha dans le sillon majeur de l’ADN
2) doight de zinc reconnait triplet de nucléotides spécifique
3) FokI est actif et clive un brin d’ADN

Question 16

difficulté pour le ZFN

Answer 16

difficulté dans la synthèse de doigts de zinc spécifiques

Question 17

c’est quoi les ribozymes

Answer 17

enzymes à base d’ARN qui peut être associé à des ARNm

Question 18

mode d’action du ribozyme

Answer 18

après la trnscription, le ribozyme se coupe pour entrainer la formation d’une ARNm défectueux et cet ARN est éliminé par la cellule

Question 19

c’est quoi le riboswitch

Answer 19

ribozymes associés à un interrupteur (comme une drogue)

Question 20

mode d’action du riboswitch

Answer 20

En absence de drogue (switch) l’ARNm est dégradé.
Exposition à une drogue change la conformation de l’ARN, ribozyme inactivé et la dégradation de l’ARNm cible est arrêtée

Question 21

c’est quoi un aptamer

Answer 21

petite molécule d’ARN/ADN avec une structure particulière qui peut interagir avec un récepteur

Question 22

utilité des aptamers

Answer 22

utilisation comme méthode de livraison de miARNou siARN hautement spécifique

Question 23

mécanisme d’action des aptamers

Answer 23

lié à un récepteur de surface et active la voie de l’endocytose

Question 24

à quoi l’aptamer peut être couplé (2 things)

Answer 24

1) siARN db
2) liposome contenant siARN

Question 25

c’est quoi le macugen

Answer 25

aptamer d’ARN modifié ciblant VEGF dans le traitement de la dégénérescance maculaire