12 AS (1)

Question 1

Inhibiteurs du centre peptidyltransferase

Answer 1

Chloramphenicol et Linezolid

Question 2

Comment fonctionne des inhibiteurs du centre peptidyltransferase

Answer 2

Elle se place sur l’ARNt au site A et empêche la liaison du peptide de l’ARNt au site P vers celui en site A

Question 3

C’est qui l’inhibiteur de l’élongation dans la traduction
-Quelle est sa caractéristique?

Answer 3

Puromycine:
Elle ressemble à un ARNt (similaire à l’adénosine à l’extrémité 3’ du tyrosyl ARNt) donc il peut se placer dans le site A
-le peptidyl sera transféré à la puromycine
Cela termine prématurément la traduction + libération d’un peptide avec puromycile attachée à son extrémité C-terminale

Question 4

Que fait la chloramphénicol

Answer 4

S’attache à 50S
Inhibe la formation de lien peptidique

Question 5

Que font les macrolides, clindamycines & streptogramins

Answer 5

bloque le tunnel de sortie de la polypeptide sur 50S et empêche l’élongation

Question 6

Que font les Tetracyclines

Answer 6

Se lie à 30S de façon réversible et bloque liaison entre ARNt et site A

(inhibe la petite sous-unité)

Question 7

Que font les Aminoglycosides

Answer 7

Se lie à 30S et cause la mauvaise lecture de l’ARNm. Interagit avec 30S, 50S et l’ARNm

(inhibe la petite sous-unité)

Question 8

Qu’est-ce qu’une molécule d’ADN recombinant

Answer 8

Molécule d’ADN crée en laboratoire à partir de plusieurs sources

Question 9

Quelles sont les différentes parties du clonage

Answer 9

-Préparation du vecteur
-Préparation de l’ADN à insérer
-Réalisation d’un recombinant : ligation
-Incorporation à l’hôte: transformation

Question 10

ADN recombinant vs ADN recombiné

Answer 10

ADN recombinant est formée de facon artificielle
ADN recombiné est prélevé d’un organisme, modifié, et est introduit dans un autre organisme

Question 11

Quelles sont les utilités du clonage

Answer 11

Produire des prot pour le traitement d’une maladie génétique ou pour des vaccins

Question 12

Les plasmides ont-ils besoin de quelquechose d’autre pour faire la réplication

Answer 12

Non

Question 13

Quelles sont les caractéristiques des plasmides

Answer 13

Taille réduite
Peuvent accepter jusqu’à 10kb d’ADN exogène
Confère résistance à 1 ou + antibiotiques = marqueur de sélection
Capable de réplication autonome (origine de réplication)

Question 14

C’est quoi les marqueurs de selection

Answer 14

Les gènes que l’on va utiliser pour savoir si la bactérie a accepté le vecteur plasmidique

Question 15

Comment fait-on pour insérer des fragments d’ADN dans le vecteur
Que font-ils?

Answer 15

Enzymes de restriction
-ils protègent les bactéries contre les phages

Question 16

Quelle est la différence entre une coupure cohésive et franche

Answer 16

Franche = coupe de manière égale
Cohésive = coupe de manière à que ce soit complementaire

Question 17

Les enzymes de restriction coupe pour cb dans des régions de cb de nucleotides

-De quoi sont consitués les enzymes de restrictions?

Answer 17

entre 4 et 12

Protéine homodimérique et chaque s-u reconnait un des 2 brins d’ADN

Question 18

Quelle est la caractéristique des sites de restriction

Answer 18

Ce sont des palindromes
-site de reconnaissance pour enzyme de restriction

Question 19

Que permet la ligase
Comment?

Answer 19

Lie de façon covalence 2 molécules d’ADN pour en faire une seule
-Transforme 2 ATP en 2 AMP + 2PPi pour briser les liaisons P et OH et créer des liaisons entre les brins

-peuvent aussi Réplication et Réparation

Question 20

Qu’est-ce qu’un polylinker

Answer 20

Gène de résistance à un antibiotique comme marqueur de sélection

Question 21

Types de vecteurs?

Answer 21

Plasmide
Phage lambda
Cosmide
Phage 1
BAC
YAC

Construit à partir du plasmide F

Question 22

À quoi servent les régulateurs de réplication sop A et B

Answer 22

À maintenir un faible nombre de copies pour le polylinker

Question 23

Comment on introduit un ADN recombinant dans un procaryote

Answer 23

Par transformation : L’ADN est introduit dans les bactéries qui sont traitées par choc thermique/électrique

Question 24

Qu’est-ce qu’une bactérie compétente

Answer 24

Quand elle est capable de recevoir un vecteur plasmidique

Question 25

D’ou vient l’insuline

Answer 25

De l’ADN recombinant et est le 1er a avoir été fait grâce à ca

Question 26

Quelles sont les 3 types de banques d’ADN

Answer 26

Banque génomique Banque de cDNA Banque d’expression

Question 27

Qu’est-ce que la banque génomique À quoi sert-elle?

Answer 27

-Couvre l’ensemble du génome -Clonage facilite manipulation de vecteur et leur multiplication ainsi que leur conservation à long terme -Permet d’isoler des gènes d’intérêt/définir cartographie du génome

Question 28

C’est quoi banque cDNA -Particularité?

Answer 28

ARNm qui ont fait de la rétrotranscription pour redevenir de l’ADN -Elle est spécifique à un tissu

Question 29

C’est quoi banque d’expression

Answer 29

Banque dont le vecteur porte des signaux transcriptionnels ce qui permet à n’importe quelle vecteur avec un marqueur de sélection cloné de produire un ARNm et ensuite protéine

Question 30

Qu’est-ce qui permet la rétrotranscription dans l’ARNm

Answer 30

Amorcée par un Oligonucléotide complémentaire à la queue poly-A = nommés adaptateurs -ADNc simple brin est converti àADNc double-brin

Question 31

Comment le VIH se réplique

Answer 31

Par retro-transcription -à l'aide de l'enzyme reverse transcriptase

Question 32

Qui a découvert PCR

Answer 32

Kary Mullis

Question 33

Qu’est-ce qu’une prot recombinante -Comment doivent-elle être utiles?

Answer 33

Une prot faite à partir d’un ADN recombinant exprimé dans une cellule hôte -Elles doivent garder leur activité -Empecher leur immunogénicité chez l’homme

Question 34

Qu’est-ce qu’a fondé Genetech

Answer 34

Des protéines recombinantes: -insuline -Facteur 8 de la coagulation dans l’hémophilie A -interférons -hormones de croissance

Question 35

Quelle est la chose la plus importante à choisir quand on veut utiliser une protéine recombinant

Answer 35

L’organisme d’expression le mieux adapté

Question 36

Les meilleurs organismes hôtes pour les prot recombinantes sont

Answer 36

bactérie insecte levure cellules de mammifères plantes et animaux et transgéniques

Question 37

Cb de g/L d’insuline E. coli modifié peut produire

Answer 37

1g/L

Question 38

Quelle est le problème des levures lors de l’utilisation de protéines recombinantes

Answer 38

économique, mais glycolsylation des protéines est complètement différente de l’être humain donc elles peuvent être immunogène pour l’humain

Question 39

Quelle est le problème des cellules d’insectes pour la production de prot recombinantes

Answer 39

Milieu de culture couteux Glycolisation différente des êtres humains Cellules bactériennes peuvent être contaminés par des baculovirus modifiés afin d'exprimer la protéine recombinante

Question 40

Quelle est le problème des bactéries pour la production de prot recombinantes

Answer 40

protéines recombinantes sont souvent mal repliées et manquent la glycolysation (modification requise pour repliement) -DONC, certaines protéines produites perdent leur fonction