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bioCH > 12 AS (1) > Flashcards

12 AS (1) Flashcards

1
Q

Inhibiteurs du centre peptidyltransferase

A

Chloramphenicol et Linezolid

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Q

Comment fonctionne des inhibiteurs du centre peptidyltransferase

A

Elle se place sur l’ARNt au site A et empêche la liaison du peptide de l’ARNt au site P vers celui en site A

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3
Q

C’est qui l’inhibiteur de l’élongation dans la traduction
-Quelle est sa caractéristique?

A

Puromycine:
Elle ressemble à un ARNt (similaire à l’adénosine à l’extrémité 3’ du tyrosyl ARNt) donc il peut se placer dans le site A
-le peptidyl sera transféré à la puromycine
Cela termine prématurément la traduction + libération d’un peptide avec puromycile attachée à son extrémité C-terminale

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4
Q

Que fait la chloramphénicol

A

S’attache à 50S
Inhibe la formation de lien peptidique

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5
Q

Que font les macrolides, clindamycines & streptogramins

A

bloque le tunnel de sortie de la polypeptide sur 50S et empêche l’élongation

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6
Q

Que font les Tetracyclines

A

Se lie à 30S de façon réversible et bloque liaison entre ARNt et site A

(inhibe la petite sous-unité)

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7
Q

Que font les Aminoglycosides

A

Se lie à 30S et cause la mauvaise lecture de l’ARNm. Interagit avec 30S, 50S et l’ARNm

(inhibe la petite sous-unité)

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8
Q

Qu’est-ce qu’une molécule d’ADN recombinant

A

Molécule d’ADN crée en laboratoire à partir de plusieurs sources

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9
Q

Quelles sont les différentes parties du clonage

A

-Préparation du vecteur
-Préparation de l’ADN à insérer
-Réalisation d’un recombinant : ligation
-Incorporation à l’hôte: transformation

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10
Q

ADN recombinant vs ADN recombiné

A

ADN recombinant est formée de facon artificielle
ADN recombiné est prélevé d’un organisme, modifié, et est introduit dans un autre organisme

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11
Q

Quelles sont les utilités du clonage

A

Produire des prot pour le traitement d’une maladie génétique ou pour des vaccins

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12
Q

Les plasmides ont-ils besoin de quelquechose d’autre pour faire la réplication

A

Non

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13
Q

Quelles sont les caractéristiques des plasmides

A

Taille réduite
Peuvent accepter jusqu’à 10kb d’ADN exogène
Confère résistance à 1 ou + antibiotiques = marqueur de sélection
Capable de réplication autonome (origine de réplication)

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14
Q

C’est quoi les marqueurs de selection

A

Les gènes que l’on va utiliser pour savoir si la bactérie a accepté le vecteur plasmidique

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15
Q

Comment fait-on pour insérer des fragments d’ADN dans le vecteur
Que font-ils?

A

Enzymes de restriction
-ils protègent les bactéries contre les phages

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16
Q

Quelle est la différence entre une coupure cohésive et franche

A

Franche = coupe de manière égale
Cohésive = coupe de manière à que ce soit complementaire

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17
Q

Les enzymes de restriction coupe pour cb dans des régions de cb de nucleotides

-De quoi sont consitués les enzymes de restrictions?

A

entre 4 et 12

Protéine homodimérique et chaque s-u reconnait un des 2 brins d’ADN

18
Q

Quelle est la caractéristique des sites de restriction

A

Ce sont des palindromes
-site de reconnaissance pour enzyme de restriction

19
Q

Que permet la ligase
Comment?

A

Lie de façon covalence 2 molécules d’ADN pour en faire une seule
-Transforme 2 ATP en 2 AMP + 2PPi pour briser les liaisons P et OH et créer des liaisons entre les brins

-peuvent aussi Réplication et Réparation

20
Q

Qu’est-ce qu’un polylinker

A

Gène de résistance à un antibiotique comme marqueur de sélection

21
Q

Types de vecteurs?

A

Plasmide
Phage lambda
Cosmide
Phage 1
BAC
YAC

Construit à partir du plasmide F

22
Q

À quoi servent les régulateurs de réplication sop A et B

A

À maintenir un faible nombre de copies pour le polylinker

23
Q

Comment on introduit un ADN recombinant dans un procaryote

A

Par transformation : L’ADN est introduit dans les bactéries qui sont traitées par choc thermique/électrique

24
Q

Qu’est-ce qu’une bactérie compétente

A

Quand elle est capable de recevoir un vecteur plasmidique

25
Q

D’ou vient l’insuline

A

De l’ADN recombinant et est le 1er a avoir été fait grâce à ca

26
Q

Quelles sont les 3 types de banques d’ADN

A

Banque génomique
Banque de cDNA
Banque d’expression

27
Q

Qu’est-ce que la banque génomique
À quoi sert-elle?

A

-Couvre l’ensemble du génome
-Clonage facilite manipulation de vecteur et leur multiplication ainsi que leur conservation à long terme
-Permet d’isoler des gènes d’intérêt/définir cartographie du génome

28
Q

C’est quoi banque cDNA
-Particularité?

A

ARNm qui ont fait de la rétrotranscription pour redevenir de l’ADN

-Elle est spécifique à un tissu

29
Q

C’est quoi banque d’expression

A

Banque dont le vecteur porte des signaux transcriptionnels ce qui permet à n’importe quelle vecteur avec un marqueur de sélection cloné de produire un ARNm et ensuite protéine

30
Q

Qu’est-ce qui permet la rétrotranscription dans l’ARNm

A

Amorcée par un Oligonucléotide complémentaire à la queue poly-A = nommés adaptateurs
-ADNc simple brin est converti àADNc double-brin

31
Q

Comment le VIH se réplique

A

Par retro-transcription
-à l’aide de l’enzyme reverse transcriptase

32
Q

Qui a découvert PCR

A

Kary Mullis

33
Q

Qu’est-ce qu’une prot recombinante
-Comment doivent-elle être utiles?

A

Une prot faite à partir d’un ADN recombinant exprimé dans une cellule hôte
-Elles doivent garder leur activité
-Empecher leur immunogénicité chez l’homme

34
Q

Qu’est-ce qu’a fondé Genetech

A

Des protéines recombinantes:
-insuline
-Facteur 8 de la coagulation dans l’hémophilie A
-interférons
-hormones de croissance

35
Q

Quelle est la chose la plus importante à choisir quand on veut utiliser une protéine recombinant

A

L’organisme d’expression le mieux adapté

36
Q

Les meilleurs organismes hôtes pour les prot recombinantes sont

A

bactérie
insecte
levure
cellules de mammifères
plantes et animaux et transgéniques

37
Q

Cb de g/L d’insuline E. coli modifié peut produire

A

1g/L

38
Q

Quelle est le problème des levures lors de l’utilisation de protéines recombinantes

A

économique, mais glycolsylation des protéines est complètement différente de l’être humain donc elles peuvent être immunogène pour l’humain

39
Q

Quelle est le problème des cellules d’insectes pour la production de prot recombinantes

A

Milieu de culture couteux
Glycolisation différente des êtres humains
Cellules bactériennes peuvent être contaminés par des baculovirus modifiés afin d’exprimer la protéine recombinante

40
Q

Quelle est le problème des bactéries pour la production de prot recombinantes

A

protéines recombinantes sont souvent mal repliées et manquent la glycolysation (modification requise pour repliement)
-DONC, certaines protéines produites perdent leur fonction

bioCH (12 decks)

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