Visualiseringsmetoder och färgningsmetodik Flashcards
Visualisering, färgmolekyler, metaller, DNA-prober
Vilka Hematoxylin-färgningar finns det och vilka betmedel har respektive färgning?
- Mayer (aluminium)
- Erlich (aluminium)
- Harris (aluminium)
- Weigert (järn)
- Heidenlhain (järn)
Vad beror permeabiliteten hos vävnaden på?
- Täthet av vävnad
- Ev. förbehandling
- Tid
Vad används oftast som lösningsmedel för färglösningar?
Dest. vatten eller alkohol av olika koncentrationer
Vad är skillnaden på översiktsfärgning och specialfärgning?
- Översiktsfärgning - cellkärnor kontra cytoplasma
- Specialfärgning - en mer detaljerad bild av vävnadens uppbyggnad (bindväv, elastiska fibrer, viruspartiklar, svamp, etc.)
Ge exempel på kromofora grupper
- -N=N- (azogrupp)
- -N=O (nitrosogrupp)
- -NO2 (nitrogrupp)
- >C=C< (alkengrupp, aromat)
- >C=O (oxogrupp)
Vilka två typer av färgämnen finns det?
Naturliga och syntetiska
Vad är detta för färgning?
Vilken färg färgas respektive delar?
Masson’s Trikrom
- Keratin och muskler färgas röda
- Kollagen och ben färgas blå/grön
- Cytoplasma färgas ljust rött/rosa
- Cellkärnor färgas bruna/svarta
Vad har auxokromer för egenskaper?
- Absorberar ej själv ljus utan binder till kromofort system
- Ändrar ljusabsorptionen mot längre våglängd
Färgningsmetodik indelning B - efter hur färgämnet får rätt styrka?
- Progressiv metod
- Regressiv metod
Vad beror färgmolekylers affinitet till vävnad på?
- Reaktiva grupper hos färgmolekyl och vävnad
- Diffusionshastigheten hos färgmolekylen
- Permeabiliteten hos vävnaden
Vad ska du göra för en lång hållbarhet när det gäller färglösningar?
- A- och B-lösning ska förvaras avskilt
- Filtrera tillbaka
- Förvara i mörk flaska i kylskåp
Vilka blåningslösningar finns till översiktsfärgningar?
- Ammoniakvatten
- Litiumkarbonat
- Kranvatten
Vad är definitionen för “äkta betmedel”?
En polyvalent (många valenselektroner) metalljon vilken bildar komplex med vissa färgämnen
Vilka metaller förekommer i vävnad?
Naturlig förekomst: Ca, Mg, Fe, Zn, Na, K
Patologisk förekomst: Pb, Hg, Ag, Th, Cd, Au, Cu
Färgningsmetodik indelning A - hur färgämnet fäster till vävnaden?
- Direkta/substantiva metoder
- Reducerande/oxiderande metoder
- Indirekta/adjektiva metoder
Vad ska du använda för färgämne vid histokemi?
- Aromatiskt eller heteroaromatiskt ämne
- Löslig i vatten eller i polära lösningsmedel
- Har en förmåga att binda sig till andra ämnen
Vad har färglösningar oftast för koncentration?
0.1 - 2 %
Vilka är användningsområdena för ISH?
- Sökande efter genetiska förändringar
- Kromosom-mapping
- Infektiösa sjukdomar
Vad betyder in-situ hybridisering (ISH, FISH)?
- In-situ* - på platsen
- Hybridysering* - enkelsträngad DNA-probe binder till framställt enkelsträngat DNA i vävnaden
Ge exempel på översiktsfärgning
Hematoxylin-Eosin
Vilka reaktiva grupper finns i vävnad?
- Nukleinsyra (DNA, RNA): =PO4-
- Sura heteropolysackarider och proteiner: -COO-
- Proteiner: -O-, -S-, -NH3+
- Sura heteropolysackarider: -SO4-
Vad är detta för färgning?
Vilken färg färgas respektive delar?
Hematoxylin-Eosin
- HTX färgar cellkärnor blå/lila
- Eosin färgar cytoplasman svagt rosa
Vad är simultanfärgning?
En färgblandning av två eller flera färgsubstanser i samma färglösning
Storlek på färgmolekyl och affinitet spelar stor roll här. Den ena färgen ska inte täcka över den andra