Visualiseringsmetoder och färgningsmetodik Flashcards

Visualisering, färgmolekyler, metaller, DNA-prober

1
Q

Vilka Hematoxylin-färgningar finns det och vilka betmedel har respektive färgning?

A
  • Mayer (aluminium)
  • Erlich (aluminium)
  • Harris (aluminium)
  • Weigert (järn)
  • Heidenlhain (järn)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Vad beror permeabiliteten hos vävnaden på?

A
  • Täthet av vävnad
  • Ev. förbehandling
  • Tid
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Vad används oftast som lösningsmedel för färglösningar?

A

Dest. vatten eller alkohol av olika koncentrationer

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Vad är skillnaden på översiktsfärgning och specialfärgning?

A
  • Översiktsfärgning - cellkärnor kontra cytoplasma
  • Specialfärgning - en mer detaljerad bild av vävnadens uppbyggnad (bindväv, elastiska fibrer, viruspartiklar, svamp, etc.)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Ge exempel på kromofora grupper

A
  • -N=N- (azogrupp)
  • -N=O (nitrosogrupp)
  • -NO2 (nitrogrupp)
  • >C=C< (alkengrupp, aromat)
  • >C=O (oxogrupp)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Vilka två typer av färgämnen finns det?

A

Naturliga och syntetiska

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Vad är detta för färgning?

Vilken färg färgas respektive delar?

A

Masson’s Trikrom

  • Keratin och muskler färgas röda
  • Kollagen och ben färgas blå/grön
  • Cytoplasma färgas ljust rött/rosa
  • Cellkärnor färgas bruna/svarta
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Vad har auxokromer för egenskaper?

A
  • Absorberar ej själv ljus utan binder till kromofort system
  • Ändrar ljusabsorptionen mot längre våglängd
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Färgningsmetodik indelning B - efter hur färgämnet får rätt styrka?

A
  • Progressiv metod
  • Regressiv metod
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Vad beror färgmolekylers affinitet till vävnad på?

A
  • Reaktiva grupper hos färgmolekyl och vävnad
  • Diffusionshastigheten hos färgmolekylen
  • Permeabiliteten hos vävnaden
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Vad ska du göra för en lång hållbarhet när det gäller färglösningar?

A
  • A- och B-lösning ska förvaras avskilt
  • Filtrera tillbaka
  • Förvara i mörk flaska i kylskåp
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Vilka blåningslösningar finns till översiktsfärgningar?

A
  • Ammoniakvatten
  • Litiumkarbonat
  • Kranvatten
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

Vad är definitionen för “äkta betmedel”?

A

En polyvalent (många valenselektroner) metalljon vilken bildar komplex med vissa färgämnen

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

Vilka metaller förekommer i vävnad?

A

Naturlig förekomst: Ca, Mg, Fe, Zn, Na, K

Patologisk förekomst: Pb, Hg, Ag, Th, Cd, Au, Cu

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Färgningsmetodik indelning A - hur färgämnet fäster till vävnaden?

A
  • Direkta/substantiva metoder
  • Reducerande/oxiderande metoder
  • Indirekta/adjektiva metoder
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Vad ska du använda för färgämne vid histokemi?

A
  • Aromatiskt eller heteroaromatiskt ämne
  • Löslig i vatten eller i polära lösningsmedel
  • Har en förmåga att binda sig till andra ämnen
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
17
Q

Vad har färglösningar oftast för koncentration?

A

0.1 - 2 %

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
18
Q

Vilka är användningsområdena för ISH?

A
  • Sökande efter genetiska förändringar
  • Kromosom-mapping
  • Infektiösa sjukdomar
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
19
Q

Vad betyder in-situ hybridisering (ISH, FISH)?

A
  • In-situ* - på platsen
  • Hybridysering* - enkelsträngad DNA-probe binder till framställt enkelsträngat DNA i vävnaden
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
20
Q

Ge exempel på översiktsfärgning

A

Hematoxylin-Eosin

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
21
Q

Vilka reaktiva grupper finns i vävnad?

A
  • Nukleinsyra (DNA, RNA): =PO4-
  • Sura heteropolysackarider och proteiner: -COO-​
  • Proteiner: -O-, -S-, -NH3+
  • Sura heteropolysackarider: -SO4-
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
22
Q

Vad är detta för färgning?

Vilken färg färgas respektive delar?

A

Hematoxylin-Eosin

  • HTX färgar cellkärnor blå/lila
  • Eosin färgar cytoplasman svagt rosa
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
23
Q

Vad är simultanfärgning?

A

En färgblandning av två eller flera färgsubstanser i samma färglösning

Storlek på färgmolekyl och affinitet spelar stor roll här. Den ena färgen ska inte täcka över den andra

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
24
Q

Vad är reducerande/oxiderande färgningsmetod?

A

Där medel behövs innan färglösningen

Exempel - Grokott; kromsyra oxiderar vävnaden innan silver

25
Q

Hur ska du märka en färglösning?

A
  • Ämne
  • Koncentration
  • Till vilken färgmetod det används
  • Namn
  • Datum
  • Ev. farosymbol / piktogram
26
Q

Vad är ett färgämne?

A

Ett ämne som absorberar elektromagnetisk strålning i det synliga området av spektrat (400 - 750 nm), och därmed ger färg

27
Q

Ge exempel på vanliga inmärkningar av DNA/RNA-prober (IHC)

A
  • Isotoper
  • Biotin
  • Fluorescerande ämnen
28
Q

Vad är syntetiska färgämnen framställda av?

A

Stenkolstjära

29
Q

Färgningsmetodik indelning C - hur anbringas de olika färgerna till vävnaden?

A
  • Succedanfärgning
  • Simultanfärgning
30
Q

Ge exempel på katjonfärger och berätta vad de färgar?

A

Ex. metylgrönt, metylenblått, toludinblått, basisk fuschin

Färgar sura vävnadskomponenter som:

  • proteiner med karboxylgrupp
  • cellkärnor
  • bakterier
  • brosk
  • slem
  • nerver
31
Q

Ge exempel på anjonfärger och berätta vad de färgar?

A

Ex. eosin, pikrinsyra, syrafuschin, anilinblå

Färgar basiska vävnadskomponenter som:

  • proteiner med fria aminogrupper
  • cytoplasma
  • muskel
  • kollagen
  • bindväv
  • erytrocyter
    *
32
Q

Sätt ut kromofor, auxokrom och kromogen i bilden

A
  1. Auxokrom
  2. Kromofor
  3. Kromogen
33
Q

Färgämnens indelning - efter sätt att binda till vävnaden?

A
  • Katjonfärgämnen (basiskt) - har pos. laddning och gillar syra vävnadskomponenter
  • Anjonfärgämnen (surt) - har neg. laddning och gillar basiska vävnadskomponenter
  • Amortera färgämnen (neutrala) - har både pos. och neg. laddning, ex. indikatorfärgämnen
  • Indifferenta färgämnen (varken pos. eller neg. laddning) - färgegenskapen beror på löslighet och dessa löser sig direkt i cell- eller vävnadsdelarna
34
Q

Ge exempel på specialfärgning

A
  • Ziehl-Neelsen för TBC-bakterier
  • Grocott, för upptäckt av svamp
35
Q

Vad är detta för färgning?

Vilken färg färgas respektive delar?

A

Grocott’s methenamine silver

  • Svamp och protozoer färgas svart/brunt
  • Bakgrunden blir grön
36
Q

Vilka intermolekylära bindningar finns det?

A
  • Van der Waals krafter (svaga, tillfälliga, dipol-dipol-bindningar)
  • Dispersionskrafter (elektrostatiska attraktiva krafter)
  • Dipol-dipol bindning (dipol är en molekyl där den ena änden är mera negativt laddad än den andra)
  • Vätebindning (mellan vätemolekyler)
37
Q

Vilka bindningar finns det mellan atomer i molekyler?

A
  • Jonbindning (stark) -
    • Katjoner (+) för basiska färger → metylenblått
    • Anjoner (-) för sura färger → eosin
  • Kovalent bindning (stark)
  • Komplexbindning (mellan en jon och en metalljon)
  • Hydrofoba / hydrofila krafter
38
Q

Vad är betmedlets uppgift?

A

Betmedlet gör att färgen fäster bättre om färgämnet har en dålig affinitet till vävnaden; är en förmedlande länk mellan färgmolekyl och vävnad

39
Q

Vilka är de vanligaste betmedlen + andra mindre vanliga?

A
  • Aluminium (3 valenselektroner)
  • Järn (3 valenselektroner)

Andra betmedel - krom, kalcium, bly, wolfram, molybden, beryllium

40
Q

Vilka metaller eller metallsalter är vanligast att använda vid visualisering?

Vilka andra metalljoner kan vara användbara?

A

Vanligast: Al3+, Fe3+, Fe2+, Cr3+

Andra användbara metalljoner: silver, guld, bly, uranyl

41
Q

Vad är visualiseringsprincipen / syftet med visualisering?

A

Syftet med visualisering är att skapa kontrast i den mikroskopiska bilden genom att ändra ljusbrytningen

42
Q

Vad innebär direkt/substantiv färgningsmetod?

A

Då färglösningen ej behöver några tillsatser

Exempel - Eosin

43
Q

Vad är indirekt/adjektiv färgningsmetod?

A

Där ett betmedel fodras som förmedlande länk mellan färgmolekyl och vävnad: innan färglösningen eller blandat med färglösningen

Exempel - HTX: betmedel blandat med färg

44
Q

Vad är kromoforer för något?

A
  • Grupper av atomer som får färgämnet att absorbera ljus
  • Flera kromofora grupper krävs för absorption i det synliga området
45
Q

Vad är kromogen?

A

Ett färgmedel, oftast en aromatisk förening

46
Q

Vad är regressiv metod?

A

En överfärgning sker. Överskottet av färg löses bort (differentierar) tills optimal färgnyans erhålles (selektiv differentiering).

Oftast då färglösningen innehåller flera färger, där olika färmolekyler har olika storlek - ex. trikrom

47
Q

Vad är detta för färgning?

Vad färgar den?

A

Hematoxylin-vanGieson

Färgar elastiska fibrer i vävnad / skapar kontrast mellan elastiska fibrer och övrig vävnad (ex. kärl i hud)

48
Q

Vad kallas ett färgämnes färgbärande respektive färgbindande grupp?

A
  • Färgbärande = kromofor
  • Färgbindande = auxokrom
49
Q

Ge exempel på indifferenta färger och berätta vad de färgar?

A

Ex. Sudan III, IV, Sudan svart B, Oljerött som Oil ned O

Färgar då:

  • fettsubstanser (neutralfett)
50
Q

Ge exempel på auxokroma grupper

A
  • -OH (hydroxylgrupp)
  • -NH2 (aminogrupp)
  • -SH (mercapto)
51
Q

Vad är progressiv metod?

A

Färgningen avbryts då bästa optimala färgnyans erhållits

52
Q

Vad kan diffusionshastigheten hos färgmolekyler bero på?

A
  • Molekyl/aggregat-storlek
  • Lösningsmedel
  • Koncentration
  • pH
  • Temperatur
53
Q

Vad kan man påvisa med hjälp av metalljoner?

A

Om det finns reduktorer och oxidatorer i vävnaden

54
Q

Vad är succedanfärgning?

A

Flera färglösningar efter varandra

55
Q

Om färgämnet har dålig affinitet till vävnaden används betmedel. Ge exempel på betmedel.

A
  • Forformolybden
  • Fosforwolframsyra
  • Järnklorid
  • Kalialun = kalium + aluminiumsulfat
  • Ammoniumalun = ammonium + aluminiumsulfat
  • Järnalun = ferri + ammoniumsulfat
  • Kromalun = krom + kaliumsulfat
56
Q

Ge tre exempel på naturliga färgämnen, och berätta vad de är gjorda av

A
  • Hematoxylin - trädbark från Kampeschträd
  • Saffranin - krokus
  • Karmin - sköldlus
57
Q

Bokstavskodning används inom färgsubstanser. Vad står bokstavskoden M, S, W respektive Y för när det gäller färglösningar?

A
  • M = blandning / mix
  • S = lättlöslig / spritlöslig / soluble
  • W = vattenlöslig
  • Y = gulaktig / yellowish
58
Q

Ge exempel på neutrala amfortera färger och berätta vad de färgar?

A

Mest känd är en kombination av metylenblått/azur och Eosin

Färgar då:

  • parasiter i blodet
  • blodkropper
59
Q

Vilka prober/reagenser används vid IHC?

A
  • DNA-prober
  • RNA-prober