Labbhandledning 1

Question 1

Hur stora får vävnadsbitar vara?

Answer 1

15 x 15 x 4 mm

Question 2

Vad ska man lägga märke till vid utskärning?

Answer 2

Patologiska förändringar, randområden mellan patologiska förändringar och normalvävnad, längdsnitt, tvärsnitt

Question 3

Vad är dehydrering?

Answer 3

Avlägsnande av vatten från vävnad

Question 4

Vad sker vid infiltrering av vävnad (utförs av dehydreringsapparat)?

Answer 4

Ett inert ämne (ex. paraffin) infiltrerar vävnaden, och därefter hårdnar och stabiliserar vävnaden

Question 5

Hur tjocka ska snitten vara vid snittning?

Answer 5

2-6 µm

Question 6

I vilken värme och tid bränns snitten fast på objektsglasen?

Answer 6

60°C, i 15-30 minuter

Question 7

När används nedfrysning och fryssnitt av vävnad?

Answer 7

Vid snabbdiagnostik och vid känslig vävnad

Question 8

Vad fryses vävnad i inför fryssnitt?

Answer 8

Flytande kväve, -200°C

Question 9

Vilken maskin används för fryssnitt?

Answer 9

En kryostat

Question 10

Vilken tjocklek har fryssnitten?

Answer 10

4-6 µm

Question 11

Vad finns det för risker vid hantering av fryssnitt?

Answer 11

Smittorisk, eftersom vävnaden inte är behandlad med några kemiska medel

Question 12

Vad är betmedel?

Answer 12

En länk mellan vävnaden och färgen

Question 13

Vad har Mayers Hematoxylin för betmedel?

Answer 13

Mayers HTX är en basisk metallkomplexfärg, med betmedel = aluminium

Question 14

Vad menas med deparaffinering?

Answer 14

Paraffinet avlängsnas med hjälp av xylen. Detta gör att färgmolekyler kan tränga in i vävnad

Question 15

Vad menas med rehydrering?

Answer 15

Vatten återförs till vävnaden (genom sjunkande koncentrationer av alkohol)

Question 16

Vad menas med dehydrering?

Answer 16

Vatten avlägsnas med hjälp av stigande koncentration av alkohol innan montering

Question 17

När sker visualiseringen/färgningen?

Answer 17

Efter rehydreringen

Question 18

Är Hematoxilyn basiskt eller surt?

Answer 18

Basiskt

Question 19

Vad färgar HTX och vilken färg?

Answer 19

Negativt laddade nukleinsyror (kärnor och ribosomer) färgas blåa

Question 20

Är Eosin basiskt eller surt?

Answer 20

Surt

Question 21

Vad färgar Eosin och vilken färg?

Answer 21

Eosin färgar proteiner och övrig vävnad i en röd/rosa färg

Question 22

Vad färgas och vilken färg i HTX-Eosin?

Answer 22

• Kärnor - blå
• Erytrocyter och eosinofila granula - ros till röd
• Cytoplasma - varierande nyanser av rosa
• Muskelfibrer - djupt rosaröd

Question 23

Vad är principen för Grocott?

Answer 23

Polysackarider oxideras till aldehyder. Silvernitrat reduceras till metalliskt silver

Question 24

Vilka felkällor finns vid grocott?

Answer 24

• Silvernitratlösningen filtreras och förvärms
• Föroreningar kan orsaka störande fällningar i snittet. Använd rena utensiler, rent vatten, rena kemikalier och plastpincett
• Ofärgat snitt - glömt kromsyra
• Inget silver syns - glömt natriumtiosulfat som gör att silvret kan fastna på snittet

Question 25

Vad händer om du inte ser någon färg på Grocott?

Answer 25

Du har glömt kromsyra och då har polysackariderna inte har oxiderats till aldehyder

Question 26

Vad har hänt om du inte ser något silver på preparatet vid Grocott?

Answer 26

Du har glömt natriumtiosulfat som gör att silvret kan fästa på snittet

Question 27

Hur färgar Grocott?

Answer 27

• Svamp och protozoer - mörkbruna eller svarta
• Bakgrund - grön

Question 28

Vad är principen för visualisering med indirekt metod (IHC)?

Answer 28

Question 29

Beskriv hur täckglas-montering går till

Answer 29

Glasen monteras från xylen. En liten sträng Mountex monteringsmedel (Xylen-baserat) anbringas på objektsglaset

Täckglaset läggs på objektsglaset

Tryck försiktigt bort eventuella luftbubblor

Torka bort överflödigt monteringsmedel

Question 30

Varför stannar man ibland i destvatten och ibland i 70%-etanol vid deparaffinering?

Answer 30

Allt beror på vad mina färger/metoder är baserade på

Question 31

Varför blånar man?

Answer 31

Det sker en pH-förändring, vilket gör att kärnorna får en mer intensiv färg. Går från rödaktig till blå

Question 32

Hur tjocka ska snitten vara fryssnittning respektive paraffinsnittning?

Answer 32

• Frys: 4-6 µm
• Paraffin: 2-5 µm

Question 33

Du sitter och monterar, din montering blir bra, du ser inga luftbubblor. När du sedan kommer tillbaka ser du att de kommit luftbubblor under tiden du varit borta. Vad kan detta bero på?

Answer 33

Detta kan bero på att ditt snitt är tjockt och att du använt för lite lim