Omtenta, 2019 Flashcards

1
Q

Man kan preparera vävnadsprover på fler olika sätt, då man ska ställa en morfologisk diagnos. Vilket fixeringsmedel är det vanligaste man använder vid kemisk fixering av vävnader som ska paraffininbäddas?

A

Formalin - 4% Neutral Buffrad Formaldehyd

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Vilken koncentration och vilket pH har oftast formalin?

A

4% koncentration

pH 7.2 - 7.4

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Vilken volym ska formalin ha i relation till den volymen av den vävnad som ska fixeras?

A

10 - 20 gånger

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Finns det några hälsorisker för personal som kommer i kontakt med formalin? Om ja - vilka i så fall?

A

Formalin är cancerogent

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Varför är det viktigt att alla nytagna vävnadsprover fixeras så snabbt som möjligt?

A

Förhindrar nedbrytningsprocessen av vävnad

Autolys

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Hur gör man när man immersionsfixerar en vävnadsbit?

A

Den läggs in i fixeringsmedel så att den omsluts av medlet

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Hur gör man när man perfusionsfixerar en vävnadsbit?

A

Fixeringsmedlet injiceras in i blodkärlen så att medlet sprids jämnt

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Hur binder en polyklonal antikropp i jämförelse med en monoklonal antikropp, till ett antigens epitoper?

A
  • Monoklonal - kan binda till endast en typ av epitop, ex. IgG
  • Polyklonal - kan binda till flera olika typer av epitoper, ex. IgM
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Ibland vid immunhistokemisk visualisering av vissa antigena epitoper, har man i metoden behövt använda sif av en antigen retrieval buffer. Vad gör en antigen retrieval buffer?

A

Den bryter metylenbryggor blottar epitoperna

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

I språkbruket inom immunhistokemi använder man sig av förkortningar ibland. Vad står förkortningen LSAB-peroxidas för?

A

Labelled streptavidin biotin - peroxidas

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Under kursen har ni gjort en immunohistokemisk laboration (på patologen). Metodutförandet var enligt LSAB- peroxidas metoden. Redogör för de olika stegen vid LSAB-peroxidas-metoden:

A
  1. Blockerar endogent peroxidas med väteperoxid
  2. Blockerar proteine (hindrar ospecifik inbindning) med goat serum
  3. Tillsätter anti-human primär antikropp gjord i rabbit
  4. Tillsätter anti-rabbit sekundär antikropp gjord i goat som är biotinylerad
  5. ABC-lösning (avidin biotin complex) tillsäts
  6. Kromogen-substrat-lösning
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Du har gjort en indirekt visualiseringsmetod med immunohistokemisk inmärkning. Du har använt dig av:

  • 1 st negativt kontrollglas
  • 1 st positivt kontrollglas
  • 1 okänt provglas

Resultatet visar att alla tre glasen har fått färg. Är det en sann positiv inmärkning av ditt provglas?

A

Nej, vi har en falskt positivt analyssvar, vilket innebär att det har skett en ospecifik inbinding som ej varit önskvärd

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

Vid snittning av paraffininbäddad kloss ska man först grovsnitta och sedan finsnitta innan man tar det/de snitt man är intresserad av. Varför grovsnittar man?

A

För att komma så pass djupt in i vävnaden att alla vävnadsstrukturer kommer med på snittet

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

Varför finsnittar man?

A

Tillräckligt tunna snitt för att klart kunna se cellerna och vävnadsstrukturerna. Finsnitt är 4-6 µm

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Nämn minst två mikrotomtyper som används inom histopatologi-området för att framställa olika typer av vävnadssnitt?

A
  • Kryostat (fryssnitt)
  • Rotationsmikrotom
  • Slädmikrotom
  • Ultrotom (EM)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Ge ett förslag på en fixerings/preparerings/inbäddningsmetod som är lämplig att använda när man vill studera fettinlagring i vävnad?

A

Frys

17
Q

Vid nedfrysning av vävnad som ska snittas i fruset tillstånd, är det viktigt att nedfrysningen går snabbt. Varför?

A

Iskristaller bildas inte i vävnaden och det sker ingen förändring i vävnadsstrukturen

Förhindrar autolys

18
Q

Vid er ”frysningslabb” använde ni er av flytande kväve. Vilken temperatur har flytande kväve?

A
  • 196ºC
19
Q

Nämn fyra väsentliga risker ur arbetsmiljösynpunkt, vilka kan förekomma vid nedfrysning av färsk vävnad med hjälp av flytande kväve?

A
  • Smittorisk av bakterier / virus eftersom preparatet inte behandlats med kemiska medel
  • Klytande kväve har väldigt låg temperatur - frysskada
  • Vid förångning kan kväve tränga undan syre från luften vilket kan medföra syrebrist
  • Kontamination
20
Q

Ange hur du kan skydda dig mot dessa risker

A
  • Smittorisk - skyddskläder
  • Frysskada - använd handskar, glasögon, långarmad rock, ej sandaler
  • Syrebrist - larm som varnar om syrehalten sjunker eller ökar
  • Kontamination - byta utrustning och använda rena verktyg
  • Jobba minst 2
21
Q

Infärgning med hjälp av färgmolekyler baseras delvis på att olika färgmolekyler binder sig till olika vävnadskomponenter. Vilka olika typer av kemiska bindningar kan man se mellan färgmolekyler och vävnad?

A
  • Jonbindning
  • Kovalent bindning
  • Komplexbindning
  • Vätebindning
  • Hydrofoba / hydrofila krafter
22
Q

Vid kärnfärgning med hjälp av hematoxylin används alltid ett betmedel. Vilken funktion har detta betmedel?

A

Det är sammlänkning mellan vävnaden och färgämnet

Om färgen har för låg affinitet till vävnaden så kan den inte binda själv, därför behövs betmedel

HTX-betmedel: aluminium eller järn

23
Q

Hur går en ”succedanfärgning” till?

A

En färg i taget, efter varandra

Ex. HTX-Eosin

24
Q

Hur går en simultanfärgning till?

A

En färgblandning görs av två eller flera färgsubstanser i samma storlek

Storlek på färgmolekyl, affinitet och annat spelar roll. Den ena färgen ska inte täcka över den andra

25
Q

De två huvudtyperna av elektronmikroskopi är TEM och SEM.
Vad står förkortningen TEM för?

A

Transmissionselektronmikroskop

26
Q

Vad står förkortningen SEM för?

A

Svepelektronmikroskop

27
Q

Beskriv den huvudsakliga skillnaden mellan ett TEM och ett SEM objekt/snitt?

A
  • TEM - 2D, ljus igenom - OTOTO, objekten är nanometer, plastinbäddning + snittning med diamantkniv,
  • SEM - 3D, ljus på ytan - översiktlig bild, torkning utan skrumpning
28
Q

Hur ökar man kontrasten i ett TEM-snitt?

A

Grids med ultratunna snitt utsätts för lösningar av tungmetaller (ex. uranyl, bly, wolfram)

Även postfixering med osmium och “en bloc”-behandling med uranyl innan dehydrering och inbäddning ger en ökad kontrast

29
Q

Odlade celler kan växa på två sätt, hur / vilka?

A

Adherenta celler - fäster sig på en yta

Suspensionskulturer - skvalpar runt utan problem

30
Q

Hur definierar du en primär kultur?

A

Celler som sätts i odling, som är tagna ur en vävnad eller kroppsvätska

31
Q

Hur definierar du en cellinje?

A

Celler från primär kultur har överförts till ny odlingsbehållare, har flyttats flera gånger

32
Q

Nämn minst två källor / orsaker till kontamination av en cellkultur?

A
  • Virus
  • Bakterier
  • Prioner
  • Mykoplasma
  • Svamp
33
Q

Nämn minst två symptom vid en kontamination av en cellkultur?

A
  • Tillväxthastighet minskar
  • Färgomslag
  • Celler börjar flyta upp till ytan = är döda
  • Förändrad morfologi av celler
  • Cellprodukter - ex. förbrukar inte mediumet
34
Q

Vad är en embryonal stamcell?

A

En pluripotent stamcell - kan bli alla celler men inte placenta, inte navelsträng och inte ny individ

Kan odlas in vitro

35
Q

Vad är en adult stamcell?

A

En multipotent stamcell - kan ge upphov till en eller flera celler i en vävnad/organ

36
Q

Förklara vad reprogrammering är?

A

När man manipulerar celler till att bli någonting annat

Programmerar om en cell så att man förändrar dess terminala fenotyp

  • SCNT - somatic cell nuclei transfer
  • iPS metoden - induced pluripotent stemcells
37
Q

Namnge och beskriv minst fyra olika hanterings-/-preparationsmetoder för cytologiskt material.

A
  • Thinprep
  • DiffQuik - snabbversion av HTX-Eosin, görs vid ROSE
  • ROSE - rapid on-site evaluation - akutbedömning inom cytologi
  • Immunocytokemi
  • PAP-färg - papanikolau
  • MGG-färg - May-Grünewald Giemsa
38
Q

Vilken är den vanligaste översiktfärgningen inom cytologi området?

A
  • PAP-färg - papanikolau
  • MGG-färg - May-Grünewald Giemsa
  • DiffQuik
39
Q
A