Untersuchung von Gen-Funktion Flashcards
13. Vorlesung
Wie wird die Gen-Aktivität kontrolliert?
- Chromatin-Packung
- Transkriptions-Initiation
- Prozessing/Export/Lokalisierung
- mRNA-Stabilität, Translation
- Protein-Aktivität bzw. Stabilität
Wodurch kann man die Transkription regulieren?
- Polymerase
- Transkriptionsfaktoren, die die Polymerase aktivieren bzw. inhibieren können und meist aus vielen Untereinheiten bestehen
- Lage der Polymerase II
- die DNA ist meist gekrümmt und kann mit weit entfernten Enhancern interagieren
- Modularität
Was sind Transposons?
DNA-Abschnitte, die an ihren beiden Enden kurze reverse Sequenzen haben. Transposasen schneiden diese aus dem Genom und integrieren sie wieder in einem anderem Gen-Abschnitt.
Wie lautet der grobe Ablauf von Vorwärtsgenetik?
- Zufallsmutagenese
- Identifikation interessanter Phänotypen
- Identifikation des mutierten Gens
Welche Typen von Mutanten bei der Genfunktion gibt es?
• Funktionsverlust: -> amorph: komplett -> hypomorph: teilweise • Funktionsgewinn: -> hypermorph: Gen-Funktion gesteigert -> antimorph: inhibiert egtl Funktion -> neomorph: neue Funktion
Wie lautet der grobe Ablauf der Rückwärtsgenetik?
- Auswahl des Gens
2. Ausschalten der Genfunktion
Was sind Morpholino Antisense-Oligos?
Synthetische RNA-Moleküle, die Translation oder Splicing blockieren können.
Welche Nachteile haben Morpholino Antisense-Oligos?
Sie wirken nur an den ersten Tagen, haben keinen Effekt wenn das Protein schon da ist und sind nicht membrangängig.
Was sind RNAi?
Doppelstrang-RNA, die zur Zerstörung von mRNAs führt.
Wie können RNAi übertragen werden?
- Injektion
- Aufnahme aus der Umgebung
- Übertragung von Zelle zu Zelle
- Transfektion von siRNAs
- transgene RNA
Welche Vor- und Nachteile hat die Vorwärtsgenetik?
Vorteile: • neue Genfunktionen werden entdeckt Nachteile: • nur in wenigen Modellen realistisch • langwierig
Welche Vor- und Nachteile hat die Rückwärtsgenetik?
rteile: • in vielen Modellen möglich • schnell Nachteile: • Genauswahl erschwert
Was versteht man unter dem Off-Target-Effekt?
Bei der Injektion von RNA können Bereiche der RNA in ein unbekanntes Gen gelangen, die einen anderen Phänotyp hervorruft.