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Histología y embriología > Técnicas histológicas > Flashcards

Técnicas histológicas Flashcards

1
Q

Observación de tejidos vivos

A

La observación de tejidos vivos se realiza a través de distintas técnicas:
-Transiluminación
-Cultivo de células
-Manipulación de células vivas a través de:
-Coloración vital y supravital
-Micromanipulación

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Q

Transiluminación

A

Es una técnica que realiza transmisión de la luz a través de la muestra, ilumina muestras finas y translúcidas.

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3
Q

Cultivo de células

A

Es un método de estudio de las poblaciones celulares vivas fuera del organismo. Se basa en el mantenimiento de poblaciones celulares vivas, desorganizadas u organizadas en tejidos u órganos.

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4
Q

1) Cultivo de células

A

Es el cultivo de células que se dividen, cuando se multiplican son ubicadas en nuevas placas.

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5
Q

2) Cultivo de tejidos

A

Es el pasaje de un tejido embrionario, EXPLANTADO, a un cultivo donde crecen las células, se denomina EXCRECENCIA, es tejido conectivo.

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6
Q

3) Cultivo de órganos

A

Es el trasplante de trozos de tejido o de órganos maduros.

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7
Q

Manipulación de células vivas

A

Utiliza la coloración vital y supravital. Son colorantes no venenosos, son retenidos selectivamente por determinadas células vivas.

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8
Q

Coloración vital

A

Se inyecta el colorante en el animal vivo.

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9
Q

Coloración supravital

A

Se agrega el colorante a las células o tejidos luego de ser separados del organismo.

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10
Q

Micromanipulación mecánica

A

Utiliza un micromanipulador en el cual se montan finas agujas de vidrio, asas, o pipetas, que penetran en el campo visual, así células aisladas pueden disecarse.

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11
Q

Observación de tejidos muertos

A

La observación de tejidos muertos se realiza a través de:
-Obtensión de la muestra
-Fijación
-Deshidratación
-Aclaramiento
-Inclusión
-Montaje
-Coloración

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12
Q

Obtención de la muestra

A

Puede realizarse a través de 3 métodos distintos:
-Biopsia
-Necropsia
-Autopsia

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13
Q

Biopsia

A

Se realiza en una persona viva, se obtiene un trozo de tejido para diagnosticar una patología con el fin de aplicar un tratamiento.

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14
Q

Necropsia

A

Se realiza en una persona muerta, se obtiene la muestra de un órgano para diagnosticar una patología con el fin de estadísticas.

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15
Q

Autopsia

A

Se realiza en una persona muerta, se estudia todo el cuerpo para diagnosticar causa de muerte dudosa, con finalidad legal, de justicia.

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16
Q

Fijación

A

Es una fase en la cual las células mueren para interrumpir los procesos celulares y mantener la estructura del tejido de forma permanente.
El fijador de uso más común es la formalina.

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17
Q

¿Qué produce la fijación en el tejido?

A

-Abole el metabolismo celular
-Impide la degradación enzimática de las células y tejidos por autólisis
-Destruye microorganismos patógenos como bacterias, hongos o virus
-Endurece el tejido como resultado de la formación de enlaces cruzados o de la desnaturalización de moléculas proteicas.

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18
Q

Fijación por inmersión

A

Se sumerge un trozo de tejido en el fijador inmediato a su extracción.

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19
Q

Fijación por perfusión

A

El fijador se inyecta en la vía sanguínea, llega al tejido u órgano deseado por medio de la arteria

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20
Q

Deshidratación

A

Luego de la fijación la muestra se lava y se deshidrata, se lo sumerge en soluciones alcoholicas de concentración creciente hasta alcanzar alcohol al 100%.

21
Q

Aclaramiento

A

Se pasa el tejido a una solución de una sustancia miscible en alcohol etílico y en parafinas, como el xileno o tolueno para extraer el alcohol.

22
Q

Inclusión

A

Se coloca el tejido en el medio de inclusión en estado líquido (parafina), este disuelve el medio de aclaramiento y penetra en el tejido.
Al enfriarse se solidifica y se forma con el tejido un bloque sólido, al cual se denomina Taco.

23
Q

Realización de los cortes

A

Se realiza el corte del bloque de parafina con un micrótomo, las muestras deben ser de 5 a 10 micras de espesor.

24
Q

Montaje

A

Cada corte se monta sobre un portaobjeto de vidrio.
La parafina es incolora por lo que se desparafina la muestra con xileno y se rehidrata en soluciones de alcohol decreciente.

25
Q

Coloración

A

Previamente se colocan los cortes en concentraciones crecientes de soluciones alcoholicas, deshidratados se montan con un cubreobjeto de vidrio, luego se colorean.

26
Q

Colorantes ácidos

A

Un colorante ácido, como la eosina, tiene una carga neta negativa en su parte coloreada, se la describe como Na+ anilina-.
Reaccionan con los grupos catiónicos en las células y tejidos.

27
Q

Colorantes básicos

A

Un colorante básico tiene una carga neta positiva en su parte coloreada y se lo describe como anilina+ Cl-. Reaccionan con los grupos aniónicos.

28
Q

Basofilia

A

La basofilia es la capacidad de los grupos aniónicos de reaccionar con un colorante básico.
En la célula se encuentran en el núcleo (ADN y ARN).

29
Q

Acidofilia

A

La acidofilia es la reacción de los grupos catiónicos con un colorante ácido. Se encuentran en el citoplasma apical, proteínas básicas.

30
Q

Congelación

A

Se realiza en tejidos fijados o no.
El bloque de tejido es cortado por el micrótomo de congelación, es una mesa con un mecanismo que envía una corriente de CO2 comprimido que enfría la mesa y congela el trozo de tejido.
Se emplea para determinar si una biopsia obtenida en una operación es de carácter benigno o maligno.

31
Q

Tricrómico de Azán

A

Formado por:
-AZOCARMÍN (ácido): tiñe de rojo los núcleos.

-AZUL DE ANILINA (básico): tiñe de azul a fibras colágenas.

-NARANJA G (ácido): tiñe de rojo/amarillo citoplasmas, eritrocitos, tejido muscular.

32
Q

Variante Mallory (Mallory-Azán)

A

Reemplaza al azocarmín por fucsina ácida.

33
Q

Tricrómico de Gomori

A

Formado por:
-VERDE LUZ: tiñe de verde fibras colágenas.

-CROMOTROPO: tiñe de rojo pardo tejido muscular, eritrocitos, citoplasma.

-HEMATOXILINA: tiñe de azul a los núcleos.

34
Q

Tricrómico de Masson

A

-HEMATOXILINA FÉRRICA DE WEIGERT: tiñe azul-negro a núcleos.

-FUCSINA ÁCIDA: tiñe de rojo intenso a rosado a eritrocitos, citoplasmas y tejido muscular.

-AZUL DE ANILINA/VERDE LUZ: tiñe de azul verdoso a tejido conectivo fibras colágenas.

35
Q

Tricrómico de Goldner (Masson-Goldner)

A

-HEMATOXILINA DE GROAT: tiñe de pardo marrón a negro a núcleos.

-FUCSINA ÁCIDA PUNZÓ: tiñe rojo naranja a citoplasmas y tejido muscular.

-NARANJA G: naranja

-VERDE LUZ: azul verdoso a tejido conectivo, fibras colágenas y cartílago.

36
Q

Tinción de Van Gieson

A

-HEMATOXILINA FÉRRICA DE WEIGERT: negro azulado a núcleos.

-ÁCIDO PÍCRICO: amarillo anaranjado a citoplasmas y tejido muscular.

-FUCSINA ÁCIDA: rojo a tejido conectivo y colágeno.

37
Q

Azul de toluidina

A

Tiñe todos los tejidos de color AZUL (ORTOCROMASIA).
Cuando se expone a estructuras ricas en: heparina y GAGs vira a color ROJO a PÚRPURA (METACROMASIA).

38
Q

Reacción del PAS (Ácido peryódico- reactivo de Schiff)

A

FUCSINA ÁCIDA: tiene capacidad de reaccionar con grupos aldehídos, los tiñe de color Rojo-Púrpura.
Determina la presencia de: CARBOHIDRATOS y GLUCOPROTEÍNAS, glucógeno, GAGs, mucina, membranas basales y fibras reticulares.

39
Q

Azul Luxol (Luxol fast blue)

A

Tiñe de color Azul a la mielina (lipoproteína) de las fibras nerviosas.

40
Q

Violeta de Cresilo

A

Es un colorante básico, tiñe las estructuras ácidas, sustancias de Nissl, núcleo y nucléolo de las neuronas, núcleo de la Glía.

41
Q

Impregnación Argéntica

A

Los tejidos son tratados con agentes de plata.
Se produce un precipitado al enfrentar las sales con un agente reductor.
Se identifican: fibras reticulares, fibras nerviosas y células de la neuroglia (SNC).

42
Q

Metacromasia

A

Ciertos colorantes básicos reaccionan con los componentes del tejido que cambian su color normal de azul a rojo o púrpura.
Los componentes tisulares que pueden colorearse metacromáticamente se denominan cromotropos.

43
Q

Determinación histoquímica de Lípidos

A

1) Fijación con formalina
2) Cortes por congelación
3) Se emplean colorantes Sudán: Sudán III - Sudán IV (Escarlata R) y Sudán Negro. Son insolubles en agua.
4) El colorante es más soluble en los lípidos que en el solvente.
5) Van en solución alcohólica o mezcla alcohol/acetona o alcohol/agua.
6) Los reactivos son hematoxilina o carmín: núcleos azules.
Escarlata: grasa roja (Sudán III)
Escarlata R: grasa rojo intenso (Sudán IV)
Black: grasa negra (Sudán negro).

44
Q

Inmunocitoquímica

A

Método que se fundamenta en la reacción específica entre un ANTÍGENO (componente químico determinado) y su ANTICUERPO (Inmunoglobulina) específico.

45
Q

¿Cómo se realiza el método inmunocitoquímico?

A

El corte de tejido se incuba con una solución que contiene un Anticuerpo específico contra el antígeno buscado.
La reacción se puede visualizar de diferentes maneras:
- El anticuerpo puede marcarse con una sustancia fluorescente: FLUORESCEÍNA.
-Al anticuerpo se le adosa una enzima: PEROXIDASA.

46
Q

Histoquímica enzimática

A

Método que evidencia actividad enzimática en algunos tejidos, tras el proceso de fijación.
La reacción enzimática convierte a algunos sustratos solubles e incoloros en PRODUCTOS INSOLUBLES Y COLOREADOS.

47
Q

Radioautografía

A

Utiliza una emulsión fotográfica que se coloca sobre un corte histológico para localizar material radiactivo en los tejidos.

48
Q

Fraccionamiento celular por Centrifugación diferencial

A

Se utiliza para la separación de las organelas celulares.

1)Pequeños trozos de tejido se colocan en soluciones que contribuyen a mantener intactas las organelas y evitan su tendencia a aglutinarse.

2) Se colocan en el homogeneizador.

3) Se rompen las membranas celulares y las organelas e inclusiones son liberadas a la solución.

4) Se centrifuga el sobrenadante a gran velocidad con una temperatura superior a 0ºc.

5) Se sedimentan las partículas más grandes y luego las más pequeñas.

49
Q

Centrifugación por gradiente de densidad

A

Se realiza el homogenado y se ubica sobre una solución que contiene concentraciones crecientes de sacarosa hacia el fondo, con densidad creciente. La centrifugación prolongada a gran velocidad produce la sedimentación de las partículas hasta donde les permita su densidad.

Histología y embriología (15 decks)

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