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Histología y embriología > Técnicas histológicas > Flashcards

Técnicas histológicas Flashcards

1
Q

Observación de tejidos vivos

A

La observación de tejidos vivos se realiza a través de distintas técnicas:
-Transiluminación
-Cultivo de células
-Manipulación de células vivas a través de:
-Coloración vital y supravital
-Micromanipulación

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Q

Transiluminación

A

Es una técnica que realiza transmisión de la luz a través de la muestra, ilumina muestras finas y translúcidas.

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3
Q

Cultivo de células

A

Es un método de estudio de las poblaciones celulares vivas fuera del organismo. Se basa en el mantenimiento de poblaciones celulares vivas, desorganizadas u organizadas en tejidos u órganos.

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4
Q

1) Cultivo de células

A

Es el cultivo de células que se dividen, cuando se multiplican son ubicadas en nuevas placas.

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5
Q

2) Cultivo de tejidos

A

Es el pasaje de un tejido embrionario, EXPLANTADO, a un cultivo donde crecen las células, se denomina EXCRECENCIA, es tejido conectivo.

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6
Q

3) Cultivo de órganos

A

Es el trasplante de trozos de tejido o de órganos maduros.

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7
Q

Manipulación de células vivas

A

Utiliza la coloración vital y supravital. Son colorantes no venenosos, son retenidos selectivamente por determinadas células vivas.

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8
Q

Coloración vital

A

Se inyecta el colorante en el animal vivo.

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9
Q

Coloración supravital

A

Se agrega el colorante a las células o tejidos luego de ser separados del organismo.

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10
Q

Micromanipulación mecánica

A

Utiliza un micromanipulador en el cual se montan finas agujas de vidrio, asas, o pipetas, que penetran en el campo visual, así células aisladas pueden disecarse.

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11
Q

Observación de tejidos muertos

A

La observación de tejidos muertos se realiza a través de:
-Obtensión de la muestra
-Fijación
-Deshidratación
-Aclaramiento
-Inclusión
-Montaje
-Coloración

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12
Q

Obtención de la muestra

A

Puede realizarse a través de 3 métodos distintos:
-Biopsia
-Necropsia
-Autopsia

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13
Q

Biopsia

A

Se realiza en una persona viva, puede ser una extracción total o parcial de tejido para diagnosticar una patología con el fin de aplicar un tratamiento. Diferentes tipos de biopsias:
*Biopsia incisional: se extrae parte de la lesión solo con el propósito de hacer diagnóstico. Para lesiones grandes.
*Biopsia excisional: extirpación de una lesión completa en un solo tiempo incluyendo tejido normal adyacente. Para lesiones pequeñas.
*Biopsia por sacabocado: se utiliza en piel investigando enfermedades cutáneas.
*Biopsia por punción: se utiliza en lesiones pequeñas y grandes.
*Biopsia por absorción: ejemplo: pulsar y aspirar médula ósea.
*Biopsia por trepanación: consiste en agujerear el cráneo y se emplea para adquirir quirúrgicamente en algunas operaciones de neurocirugía.
*Biopsia por raspado: se hace en piel donde se extraen las capas más superficiales extrayendo toda la lesión o solo una parte.

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14
Q

Necropsia

A

Se realiza en una persona muerta (pieza cadavérica), se obtiene la muestra de un órgano para diagnosticar una patología con el fin de estadísticas.

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15
Q

Autopsia

A

Se realiza en una persona muerta, se estudia todo el cuerpo para diagnosticar causa de muerte dudosa, con finalidad legal, de justicia.

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16
Q

Fijación

A

-Fase en la que se preserva la morfología y la composición química de los tejidos, evitando la autólisis.
-Las células mueren para interrumpir los procesos celulares y mantener la estructura del tejido de forma permanente.
-El fijador de uso más común es la formalina.
-Debe ser rápida, después de la obtención del material.
-Fijación por perfusión o inmersión.
-Dejar la muestra en el fijador: 6 a 24 hs.
-El volumen del fijador de ser de 10 a 20 veces superior a la muestra.

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17
Q

¿Qué produce la fijación en el tejido?

A

-Abole el metabolismo celular
-Impide la degradación enzimática de las células y tejidos por autólisis
-Destruye microorganismos patógenos como bacterias, hongos o virus
-Endurece el tejido como resultado de la formación de enlaces cruzados o de la desnaturalización de moléculas proteicas.

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18
Q

Fijación por inmersión

A

-Sumergir completamente el material en la solución fijadora.
-Se sumerge un trozo de tejido en el fijador inmediato a su extracción.

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19
Q

Fijación por perfusión

A

-Paso de la solución fijadora a través del sistema circulatorio.
-El fijador se inyecta en la vía sanguínea, llega al tejido u órgano deseado por medio de la arteria

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20
Q

Deshidratación

A

Luego de la fijación la muestra se lava y se deshidrata, se lo sumerge en soluciones alcoholicas de concentración creciente hasta alcanzar alcohol al 100%.

21
Q

Aclaramiento

A

Se pasa el tejido a una solución de una sustancia miscible en alcohol etílico y en parafinas, como el xileno o tolueno para extraer el alcohol.

22
Q

Inclusión

A

Se coloca el tejido en el medio de inclusión en estado líquido (parafina), este disuelve el medio de aclaramiento y penetra en el tejido.
Al enfriarse se solidifica y se forma con el tejido un bloque sólido, al cual se denomina Taco.

23
Q

Realización de los cortes

A

Se realiza el corte del bloque de parafina con un micrótomo (máquina cortadora provista de un cuchillo de acero), las muestras deben ser de 5 a 10 micras de espesor.

24
Q

Montaje

A

-Cada corte obtenido se monta sobre un portaobjeto de vidrio provisto de una pequeña cantidad de albúmina (adhesivo).
-Desparafinar: la parafina es incolora por lo que se extrae y disuelve la muestra con xileno.
-Rehidratar la muestra: en soluciones alcohólicas de concentración decreciente (100%, 90%, 70%).

25
Q

Coloración

A

-Previamente se colocan los cortes en concentraciones crecientes de soluciones alcohólicas.
-Deshidratados se montan con un cubreobjeto de vidrio, adherido con bálsamo de Canadá.
-Ciertas macromoléculas como el glucógeno, proteoglucanos, glucosaminoglucanos y lípidos se disuelven y se pierden como consecuencia de la acción de fijadores, alcoholes y solventes, por lo que NO se tiñen.

26
Q

Colorantes ácidos

A

Un colorante ácido, como la eosina, tiene una carga neta negativa en su parte coloreada.
Reaccionan con los grupos catiónicos en las células y tejidos.

27
Q

Colorantes básicos

A

Un colorante básico tiene una carga neta positiva en su parte coloreada.
Reaccionan con los grupos aniónicos.

28
Q

Basofilia

A

La basofilia es la capacidad de los grupos aniónicos de reaccionar con un colorante básico.
En la célula se encuentran en el núcleo (ADN y ARN).

29
Q

Acidofilia

A

La acidofilia es la reacción de los grupos catiónicos con un colorante ácido. Se encuentran en el citoplasma apical y proteínas básicas.

30
Q

Congelación

A

Se realiza en tejidos fijados o no.
El bloque de tejido es cortado por el micrótomo de congelación, es una mesa con un mecanismo que envía una corriente de CO2 comprimido que enfría la mesa y congela el trozo de tejido.
Se emplea para determinar si una biopsia obtenida en una operación es de carácter benigno o maligno.

31
Q

Tricrómico de Azán

A

Formado por:
-AZOCARMÍN (ácido): tiñe de rojo los núcleos.

-AZUL DE ANILINA (básico): tiñe de azul a fibras colágenas.

-NARANJA G (ácido): tiñe de rojo/amarillo citoplasmas, eritrocitos, tejido muscular.

32
Q

Variante Mallory (Mallory-Azán)

A

Reemplaza al azocarmín por fucsina ácida en el tricrómico de Azán.

33
Q

Tricrómico de Gomori

A

Formado por:
-VERDE LUZ: tiñe de verde fibras colágenas.

-CROMOTROPO: tiñe de rojo pardo tejido muscular, eritrocitos, citoplasma.

-HEMATOXILINA: tiñe de azul a los núcleos.

34
Q

Tricrómico de Masson

A

-HEMATOXILINA FÉRRICA DE WEIGERT: tiñe azul-negro a núcleos.

-FUCSINA ÁCIDA: tiñe de rojo intenso a rosado a eritrocitos, citoplasmas y tejido muscular.

-AZUL DE ANILINA/VERDE LUZ: tiñe de azul verdoso a tejido conectivo fibras colágenas.

35
Q

Tricrómico de Goldner (Masson-Goldner)

A

-HEMATOXILINA DE GROAT: tiñe de pardo marrón a negro a núcleos.

-FUCSINA ÁCIDA PUNZÓ: tiñe rojo naranja a citoplasmas y tejido muscular.

-NARANJA G: naranja

-VERDE LUZ: azul verdoso a tejido conectivo, fibras colágenas y cartílago.

36
Q

Tinción de Van Gieson

A

-HEMATOXILINA FÉRRICA DE WEIGERT: negro azulado a núcleos.

-ÁCIDO PÍCRICO: amarillo anaranjado a citoplasmas y tejido muscular.

-FUCSINA ÁCIDA: rojo a tejido conectivo y colágeno.

37
Q

Azul de toluidina

A

-Colorante básico (catiónico).
-Tiñe todos los tejidos de color AZUL (ORTOCROMASIA).
-Cuando se expone a estructuras ricas en: heparina y GAGs vira a color ROJO a PÚRPURA (METACROMASIA).

38
Q

Reacción del PAS (Ácido peryódico- reactivo de Schiff)

A

FUCSINA ÁCIDA: tiene capacidad de reaccionar con grupos aldehídos, los tiñe de color Rojo-Púrpura.
Determina la presencia de: CARBOHIDRATOS y GLUCOPROTEÍNAS, glucógeno, GAGs, mucina, membranas basales y fibras reticulares.

39
Q

Azul Luxol (Luxol fast blue)

A

Tiñe de color Azul a la mielina (lipoproteína) de las fibras nerviosas.
-Violeta de Cresilo (colorante básico): tiñe las estructuras ácidas: sustancia de Nissl, núcleo y nucléolo de las neuronas, núcleo de la Glía.

40
Q

Técnica de May Grünwald Giemsa

A

-Observación de células en frotis de sangre y médula ósea.
-Azul de metileno
-Azur de Metileno
-Eosina

41
Q

Impregnación Argéntica

A

Los tejidos son tratados con agentes de plata.
Se produce un precipitado al enfrentar las sales con un agente reductor.
Se identifican: fibras reticulares, fibras nerviosas y células de la neuroglia (SNC).

42
Q

Metacromasia

A

Ciertos colorantes básicos reaccionan con los componentes del tejido que cambian su color normal de azul a rojo o púrpura.
Los componentes tisulares que pueden colorearse metacromáticamente se denominan cromotropos.

43
Q

Determinación histoquímica de Lípidos

A

1) Fijación con formalina
2) Cortes por congelación
3) Se emplean colorantes Sudán: Sudán III - Sudán IV (Escarlata R) y Sudán Negro. Son insolubles en agua.
4) El colorante es más soluble en los lípidos que en el solvente.
5) Van en solución alcohólica o mezcla alcohol/acetona o alcohol/agua.
6)El mejor fijador para estas muestras es el formol.
7) Los reactivos son hematoxilina o carmín: núcleos azules.
Escarlata: grasa roja (Sudán III)
Escarlata R: grasa rojo intenso (Sudán IV)
Black: grasa negra (Sudán negro).

44
Q

Inmunocitoquímica

A

-Método que se fundamenta en la reacción específica entre un ANTÍGENO (componente químico determinado) y su ANTICUERPO (Inmunoglobulina) específico.
-El corte de tejido donde se demostrará la presencia del Antígeno se incuba con una solución que contiene un anticuerpo específico contra el antígeno buscado.
-El anticuerpo se puede visualizar mediante:
.Fluoresceína: el anticuerpo se marca con una sustancia fluorescente.
.Peroxidasa: al anticuerpo se le adosa una enzima, peroxidasa, y se detecta la reacción Ag-Ac por histoquímica enzimática.

45
Q

Histoquímica enzimática

A

-Método que evidencia actividad enzimática en algunos tejidos, tras el proceso de fijación.
-La reacción enzimática convierte a sustratos solubles e incoloros en PRODUCTOS INSOLUBLES Y COLOREADOS manifestándose la enzima y el tejido que la posee.

46
Q

Radioautografía

A

Utiliza una emulsión fotográfica que se coloca sobre un corte histológico para localizar material radiactivo en los tejidos.

47
Q

Fraccionamiento celular por Centrifugación diferencial

A

Se utiliza para la separación de las organelas celulares.
1)Pequeños trozos de tejido se colocan en soluciones que contribuyen a mantener intactas las organelas y evitan su tendencia a aglutinarse.
2) Se colocan en el homogeneizador.
3) Se rompen las membranas celulares y las organelas e inclusiones son liberadas a la solución.
4) Se centrifuga el sobrenadante a gran velocidad con una temperatura superior a 0ºc.
5) Se sedimentan las partículas más grandes y luego las más pequeñas.

48
Q

Centrifugación por gradiente de densidad

A

Se realiza el homogenado y se ubica sobre una solución que contiene concentraciones crecientes de sacarosa hacia el fondo, con densidad creciente. La centrifugación prolongada a gran velocidad produce la sedimentación de las partículas hasta donde les permita su densidad.

Histología y embriología (16 decks)

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