Técnicas de plaqueamento Flashcards
Quais são os materiais necessários para as técnicas de plaqueamento?
- meios de cultura esterilizados
- Bico Bulsen
- EPI (luva, máscara, jaleco e toca)
- alça de platina
- alça de drigalsky
- swab
- material biológico
- estufa bacteriológica
Para que serve a diluição seriada?
serve tanto para o isolamento quanto para a contagem de microrganismos
Como é realizado o processo de diluição seriada?
- parte-se de uma determinada amostra (solo, alimento, urina ou outro material)
- em casos de amostras sólidas, em pó ou muito viscosas é feita a homogeização inicial,e a partir desta são preparadas diluições sucessivas em tubos
Onde geralmente são feitas as homogeização?
em salinas ou soluções tamponadas
Como são realizadas as diluições?
são diluições sequenciais, na razão de 1 para 10
Obs: a cada diluição obtida procede-se uma homegeização do líquido contido no tubo em vórtex (aparelho agitador de tudo)
Em que consiste o plaqueamento?
distribuição homogênea de uma alíquota da referida diluição em meio sólido adequado, de modo que após incubação por tempo e temperatura adequadas, as células ou pedaços de hifas ou pequenos agrupamentos de células idênticas espalhadas, cresçam isoladamente dando origem a colônias que serão contadas na diluição apropriada e portanto chamadas de unidades formadoras de colônias (UFC)
Explique o método espalhamento em superfície:
- nesse método, o inóculo geralmente de 0,1 ml é espalhado uniformemente na superfície do meio já solidificado com auxilio da alça de Drigalsky, de modo a separar ao máximo as células microbianas presentes. nesse caso só crescerão colônias na superfície do meio sólido, a superfície do meio de cultura não deve estar úmido para que o inóculo não absorva e nem se desloque
Explique o método de espalhamento em profundidade ( pour plate)
também chamado de incorporação em placa, inóculo geralmente de 1ml é adicionado ao fundo da placa estéril, vazia, e o meio de cultura contendo ágar mantido a cerca de 40 á 45°C é vertido sobre ele.
A homogeneização do inóculo com o meio é feita a partir de movimentos rotacionais suaves
- é preciso garantir que o meio não solidifique antes da homogeneização nem fique muito quente para matar as células microbianas, as colônias crescerão na superfície e também no meio de cultura
O que é estria simples?
transferir uma alçada da cultura para um meio sólido em placa e estriar com a alça bacteriológica sobre o meio
Quais são os dois tipos de estrias?
- Estria sinuosa: realizada em movimento de zig-zag
- Estria reta: linha reta sobre o meio
Para oq geralmente se usa a técnica das estrias?
técnica muito realizada para a visualização de determinadas técnicas metabólicas como a produção de enzimas hidrolíticas e produção de pigmentos
Em que consiste a técnica de esgotamento em estrias ou estrias múltiplas?
transferir uma laçada da cultura para o meio sólido e estrias com a alça bacteriológica sobre o meio
Como é realizada a técnica de esgotamento em estrias ou estrias múltiplas?
- a placa é dividida em 4 quadrantes e a inoculação pode ser feita de 2 tipos:
- Tipo 1: 3 estrias, estriar em metade da placa com zig-zag, quando atingir metade da placa girar a 90° e estriar até a metade (1/4 da placa), girar mais 90° e estriar o meio restante
- Tipo 2: 4 estrias, estriar até 2/3 da metade da placa girar a 90°, estriar 2/3 do próximo quadrante (1/4 da placa), girar a 90° e estriar o restante do meio.
Qual o objetivo da técnica em esgotamento de estrias ou estrias múltiplas?
obtenção de colônias isoladas
Em que consiste a técnica Spread-plate?
transferir 0,1 ml da cultura para o meio na placa e espalhar uniformemente com a própria ponta da pipeta ou alça bacteriológica/ swab/ alça Drigalsky
