Techniques d’analyse de l’ADN Flashcards
Quelle est la charge globale nette de l’ADN? Pourquoi?
Négative, à cause des groupements phosphate
Quelle est l’utilité du peigne dans l’analyse sur gel d’agarose?
Formation des puits dans le gel
Quelle est l’utilité du colorant dans l’analyse sur gel d’agarose?
Visualiser la progression de la migration
Faciliter le dépôt des échantillons
Quelle est l’utilité du glycérol dans l’analyse sur gel d’agarose?
Augmente la densité de l’échantillon
Faciliter la descente dans le fond du puits
Qu’est-ce qui détermine la distance de migration des molécules d’ADN dans le gel d’agarose?
La taille
La charge
La conformation 3D
Quelles sont les trois formes sous lesquelles on peut retrouver l’ADN plasmidique?
Linéaire
Relâchée
Super enroulée
Vrai ou faux? Plus la molécule est courte, plus elle se déplace rapidement dans le gel d’agarose.
Vrai
Vrai oui faux? La taille influence davantage la migration que la conformation 3D.
Vrai
Quelle est l’utilité des échelles d’ADN?
Servir de référence pour déterminer la taille des bandes obtenues pour notre échantillon.
Pourquoi un graphique peut-il être utile pour déterminer la taille des molécules d’ADN suite à une migration?
Parce que le logarithme de la longueur des fragments est inversement proportionnel à la distance parcourue dans le gel (migration).
En quoi le tampon est-il important dans la migration de l’ADN?
C’est lui qui permet d’obtenir un champ électrique entre les 2 électrodes grâce à sa force ionique.
Dans quelle situation faut-il privilégier l’analyse sur gel de polyacrylamide?
Lorsqu’il s’agit de plus petits fragments.
Qu’ils se distinguent que par quelques paires de bases.
Pour le gel de polyacrylamide ne peut-il pas être coloré au BET lors de sa préparation?
Parce que le BET empêchera la polymérisation du gel. Il faut colorer le gel après la migration.
