Révision 3/4 Flashcards
Quelle est l’origine des enzymes de restriction?
Bactérienne
Quel est le but de l’utilisation des enzymes de restriction?
Couper l’ADN dans une région particulière
Laquelle des coupures suivantes générera des bouts francs?
G’GATCC
G’AATTC
GAT’ATC
CGAT’CG
GAT’ATC
De quel côté de l’ADN polymérase ajoute les nucléotides?
3’
Un fragment d’ADN circulaire est coupé par trois enzymes de restriction différentes et chaque enzyme coupe à un seul endroit. Combien de fragments observera-t-on sur le gel d’agarose?
3 fragments
Les enzymes de restriction coupent l’ADN et génèrent différents types d’extrémités. Laquelle n’en est pas une?
Une extrémité franche 3’
Quel est le but d’une PCR?
Amplifier un fragment d’ADN
Quelles sont les 3 étapes d’une PCR?
Dénaturation
Hybridation
Élongation
Température de dénaturation :
95 degrés Celsius
Température d’hybridation :
55 degrés Celsius
Température d’élongation :
72 degrés Celsius
Quelle est la différence entre la TAQ polymérase et une polymérase?
La TAQ résiste à la chaleur
Quel est le nom de l’appareil utilisé pour réaliser des réactions de PCR?
Thermocycleur
Quelle affirmation est vraie concernant la TAQ polymérase?
Elle résiste à 95 degrés Celsius
Quelle molécule devient fluorescente quand elle est intercalée dans l’ADN dans les PCR en temps réel?
SYBR green
Quels sont les avantages d’utiliser la PCR en temps réel?
Plus rapide
Quantification d’agents pathogènes
Se déroule dans le même tube et le même appareil
Le thermocycleur possède des caractéristiques sauf une, laquelle?
Effectue de multiples analyses comme la centrifugation des échantillons.
Des archéologues ont déterré un crâne humain sur lequel il restait un petit fragment de cuir chevelu séché. Ils ont extrait de celui-ci une quantité minuscule d’ADN. Comment pourraient-ils obtenir suffisamment d’ADN pour analyser les gènes de nos ancêtres?
En utilisant l’amplification en chaîne par polymérase
Quel énoncé est faux concernant la PCR?
Utilise comme matériel de départ de l’ARNm, des amorces et des nucléotides libres (dNTPs)
Nommer les 4 méthodes de détection de l’ADN dans une PCR en temps réel
SYBR green
Sondes d’hybridation (FRET)
Sondes Taqman
Balises moléculaires
Comment est déterminé le cycle seuil dans la PCR en temps réel?
L’intersection de la ligne de bruit de fond et la phase exponentielle
Vrai ou faux : plus il y a de copies d’ADN dans une réaction, plus le cycle seuil sera grand.
Faux
Quelle est la différence entre une PCR et une RT-PCR?
PCR : amplification de l’ADN
RT-PCR : amplification à partir de l’ARN
Quelle enzyme est utilisé pour la RT-PCR?
Transcriptase inverse