Révision 2/4 Flashcards

1
Q

Vrai ou faux : la ligase est une enzyme qui coupe l’ADN en créant des fragments à extrémités cohésives.

A

Faux

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Q

Vrai ou faux : la polymérase est employée dans une amplification en chaîne pour compléter les fragments d’ADN.

A

Vrai

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Q

Vrai ou faux : la transcriptase inverse permet la production d’ADNc à partir d’ARN.

A

Vrai

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4
Q

Vrai ou faux : l’électrophorèse permet la séparation des fragments d’ADN.

A

Vrai

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5
Q

Quelle technique permet à un plasmide d’entrer dans une bactérie?

A

Transformation par électroporation ou choc thermique

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6
Q

Quel est le but d’un buvardage Southern?

A

Étudier un fragment d’ADN génomique

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7
Q

Parmi tous les facteurs, lequel n’influence pas la séparation des fragments d’ADN sur gel d’agarose?

A

La pureté

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8
Q

Quelle est la définition d’une sonde nucléique utilisé dans le buvardage Southern?

A

Molécule d’ADN ou d’ARN utilisée pour détecter une séquence complémentaire. Elle doit être marquée pour être détectée.

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9
Q

Quelle étape ne fait pas parie d’un buvardage Southern?

A

Amplification de l’ADN

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10
Q

Vous voulez faire une sonde non radioactive. Quel produit allez-vous utiliser?

A

Digoxigénine

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11
Q

Quels types de membrane peuvent être utilisés pour un Southern blot?

A

Nylon chargé positivement
Non chargé
Nitrocellulose

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12
Q

Comment se nomme un vecteur d’ADN circulaire dans lequel on peut insérer un fragment d’ADN?

A

Plasmide

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13
Q

Qu’est-ce qu’un vecteur navette?

A

+ que 1 ori
Différents marqueurs de sélection
Peut avoir marqueur nutritionnel

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14
Q

Pourquoi utilise-t-on une étiquette His?

A

Pour purifier les protéines recombinantes

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15
Q

Si dans une cellule il n’y a pas de lactose, est-ce que la beta-galactosidase va être synthétisée? Pourquoi?

A

Non

Le gène est inductible, il doit y avoir du lactose dans le milieu pour déclencher l’opéron lactose.

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16
Q

Expliquer la différence entre un marqueur de criblage et un marqueur de sélection.

A

Criblage : détermine quelles bactéries possèdent le plasmide avec l’insert.
Sélection : résistance à un AB. Seules les bactéries avec le gène vont pousser.

17
Q

Nommer les 3 composantes de base d’un vecteur de clonage.

A

Origine de réplication
Gène de sélection
Site de clonage multiple

18
Q

À quoi sert l’origine de réplication?

A

Permet la réplication du plasmide dans la bactérie

19
Q

À quoi sert le gène de sélection?

A

Permet la sélection des bactéries qui ont intégré le plasmide.

20
Q

À quoi sert le site de clonage multiple?

A

Séquence d’ADN qui contient une multitude de sites de restriction

21
Q

Que signifie le terme vecteur dans la technique du clonage?

A

Un plasmide employé pour introduire de l’ADN dans une cellule vivante.

22
Q

Quelle bactérie est fréquemment utilisée pour le clonage?

A

E. coli

23
Q

Comment une bactérie peut devenir compétente?

A

Avec du CaCl2

24
Q

Quel est le rôle du gène AMPr dans un vecteur de clonage?

A

Gène de résistance à l’ampicilline.

25
Q

Des bactéries transformées avec un plasmide (LacZ), contiennent un insert d’ADN et sont ensemencées sur un milieu contenant du X-gal. De quelle couleur seront les colonies?

A

Blanches

26
Q

Les bactéries transformées avec un plasmide (LacZ) ne contenant pas d’insert d’ADN sont ensemencées sur un milieu contenant du X-gal. De quelle couleur seront les colonies?

A

Bleues

27
Q

Lors de l’insertion d’un ADN étranger dans un plasmide, pourquoi utilise-t-on la phosphatase alcaline?

A

Pour enlever les groupements phosphates du plasmide.

28
Q

Dans quel cas il faut déphosphoryler le plasmide?

A

Quand le plasmide risque de se refermer sur lui-même sans insert.

29
Q

Quel est le rôle du gène de résistance à un antibiotique contenu dans un plasmide?

A

Sélectionner les bactéries transformées.

30
Q

Quel est le rôle de la polymérase?

A

Ajoute les nucléotides du côté 3’ (Activité 5’ - 3’)

31
Q

Quel est le rôle de la ligase?

A

Liaison phosphodiester entre le groupement phosphate (5’) et le groupement hydroxyle (3’).

32
Q

Quel est le rôle de l’hélicase?

A

Permet d’ouvrir la double hélice d’ADN

33
Q

Quel est le rôle de la phosphatase alcaline?

A

Retire le groupement phosphate (5’) d’un acide nucléique.

34
Q

Quel est le rôle de la polynucléotide kinase du phage T4?

A

Phosphorylation de l’ADN.
Transfert d’un phosphate sur l’extrémité 5’ de l’ADN.