Substratlära och odlingsteknik Flashcards
Vad är bakteriers sammansättning ?
Sammansättning:
Ca 70% vatten
Av torrvikten 50% protein, 25% RNA, 22% annat och 3% DNA
Vad kräver bakterien ca 50% av ?
C
Utgör ca hälften av cellens torrsubstans. Tillgång till kol i relativt
höga koncentrationer.
Olika bakterier utnyttjar olika kolkällor.
Autotrofa- oorganiskt bundet kol i form av CO2
Hetrotrofa- nedbrytning av organiska föreningar som kolhydrater
och proteiner
Hur mycket utgör kvävet i en bakterie ?
N
Kväve utgör 12-15% av torrvikten, krävs i förhållandevis höga
koncentrationer
Fritt atomosfäriskt kväve N2 – enklaste kväve källan kan bara
utnyttjas av ett fåtal bakterier
Flest oorganiska källor som ammoniumsalter (NH4+) och
nitrater (NO3-)
Vad gör Mg för bakterien
Mg stabiliserar ribosomerna, cellmembranen och
nukleinsyror – enzymatiska processer- MgSO4
Vad gör Ca för bakterien ?
Ca- viktig vid stabilisering av cellvägg och
sporbildning- CaCl2
Vad gör Fe för bakterien ?
Fe- enzymer i ffa respirationskedjan, FeSO4
Vad kallas ämnen som bakterien själv inte kan syntetisera ?
-> Ämnen som inte bakterien själv kan syntetisera kallas ofta
tillväxtfaktorer.
-> Vissa bakterier kräver inga tillväxtfaktorer andra bakterier kräver
många tillväxtfaktorer.
-> Viktigt att tänka på vid framställning av odlingssubstrat
-> Generellt behöver gram-positiva bakterier mer tillväxtfaktorer än
gram-negativa
Vad är bakteriologins 5 l ?
- Inockulering – odling av ett prov på ett medium för produktion av en kultur
- Isolering – separering av en art från en annan
- Inkubation – i lämplig miljö som tillåter
växt - Inspektion –hur ser det ut och växer
- Identifikation - identifikationsmetoder
Vad innebär det att en bakterie Inockulerar och isolerar ?
• Om en individuell bakteriecell separeras
från en annan cell och har plats att växa till på en näringsrik yta - kommer den att bilda
en koloni - bestående av många celler
• En koloni består av en species/art.
CFU= colony forming Units
Ge exempel på utodlingstekniker ?
- Utstryksodling
- Spädningsodling
- Spridningsteknik
- Gräsmatteteknik
- Kvantitativ odling
Vad innebär ett tre stryk?
Man gör ett primärtstryk, ett sekundärt stryk och ett tertiär stryk
Vilka odlingsmedium finns det?
- Fysisk form
- Kemiska karaktäristika
- Funktionell typ/ syfte med mediet
Vad är den fysiska formen för medium? Vilka olika finns de?
A, Flytande medium
Vattenbaserade lösningar som
inte stelnar i rumstemperatur
- buljong, broth
Innehåller tex köttextrakt, pepton mm
B, semisolid Trögflytande konsistens - vanligen använt vid motilitets test - rörlighets test
C, Fast medium
Fast yta - kolonier växer på
ytan - vanligen i Petriskålar
Vilken är den vanligaste av medium ur fysiska medium?
C1, Fast medium som kan bli flytande/stelnar
*Absolut vanligaste mediet
- innehåller oftast agar (från sjögräset agar agar)
Smälter vid 100°C och stelnar igen vid 42°C
Hanterbart vid 45-50°C - skadar inte dig eller bakterierna
Vilka medium ingår i kemiska karaktäristika ?
-> Syntetiska
Rena organiska och oorganiska komponenter
Bestämda mängder
Reproducerbara
-> Icke syntetiska medium
Minst en icke kemiskt definierbar beståndsdel extraherad från djur,
växter eller svampar- ex blod, serum, köttextrakt, infusioner
-> Infusioner- rika på vitaminer, mineraler, proteiner och andra organiska
näringsämnen
Andra vanliga substanser är mjölk, jästextrakt, soja, pepton
Vilka medium ingår i Syftet med mediet/funktionen?
Generellt medium-
Designade för att man ska kunna odla fram ett
så brett spektrum av mikroorganismer som
möjligt.
-Icke syntetiska
-Ex. nutrient agar, brain heart infusion, BHI,
trypticase soy agar, TSA
Vad innebär berikat medium ?
Innehåller komplexa organiska substanser som tex. Blod,
serum, hemoglobin, eller specifika tillväxtfaktorer så som
vitaminer och aminosyror
Bakterier som kräver tillväxtfaktorer och komplexa
näringsämnen för att växa kallas: fastidious/kräsna
Ex. Streptococcus pneumonie - växer på blodagar
Varför används selektiva medium? När är denna typ viktig?
- Designade för en speciell grupp/grupper av bakterier - Viktigt vid isolering av bakterier från komplexa med mkt bakterier tex saliv, faeces, vatten, jord mm
- Ex MSA - mannitol salt agar - hög koncentration NaCl (7,5%). Selekterar för
Staphylococcus - tål höga saltkoncentrationer
Varför använda differential medium?
• Selekterar på storlek på kolonin eller färgomslag
• Vanligt med färg och pH-indikatorer i plattor för tex påvisande
av laktosjäsare- omslag till surt pH.
Varför används transport medium?
- > För bevaring och preservering av olika organismer vid t ex transport från provtagning till utodling på laboratoriet ska hålla en viss tid
- > Ex Stuart’s och Amies transport medium
Varför används analysmedium?
Olika sorters medium som används för att tex lösa
upp bakterier vid laboratorieanalyser- tex PBS vid
resistensbestämning
Varför används beräknings medium?
Medium som används för att späda eller odla bakterier i för beräkning av antalet bakterier
Från vilka källor i mediet hämtar bakterierna
makro- respektive mikroelement?
1. C
2. H och O
3. N
- C- från organiska föreningar; främst glukos
- H och O bland annat från vatten och ingående organiska
och oorganiska substanser - N finns i protein och nukleinsyror, ammoniak eller nitrat
Ge exempel på olika substrat ?
- Hästblodagar
- BHI-agar
- Streptokock-GBG-
agar - HI-agar
- Drigalskiagar
- Staphylococcus-agar
- Staphchrom-agar
- Mueller-Hinton-agar
- Saburaud-agar
- XLD-agar
