Spectrophotométrie (examen 1)

Question 1

Qu’est-ce que la spectrophotométrie?

Answer 1

Méthode analytique qui permet de mesurer la DO ou ABS d’une substance chimique en vue de déterminer sa concentration

Question 2

Que nous indique le flux émergent?

Answer 2

L’abs de la solution

Question 3

Quelles sont les 2 manières de décrire le rayonnement électromagnétique?

Answer 3

1) corpusculaire : propagation des photons

2) ondulatoire: onde électromagnétique qui se manifeste sous la forme d’un champ magnétique

Question 4

Qu’est-ce qu’un spectre électromagnétique?

Answer 4

C’est une classification qui présente l’ensemble des ondes électromagnétiques selon leur longueur d’onde et leur fréquence

Question 5

Qu’est-ce qu’un longueur d’onde?

Answer 5

Distance entre 2 pics d’onde
Elle est exprimée en nm ou en cm ou en m

Question 6

Quel est le spectre de la lumière visible?

Answer 6

longueur d’onde entre 388 nm et 720 nm

Question 7

Quel est le spectre de la lumière ultraviolette?

Answer 7

longueurs d’ondes entre 100 et 388 nm

Question 8

De quoi dépend l’énergie de la radiation électromagnétique?

Answer 8

De sa longueur d’onde

Question 9

Qu’est-ce que la loi de Planck

Answer 9

E= h x c/longueur d’onde

h= constante de Planck
c= vitesse de la lumière

l’énergie d’un rayonnement est inversement proportionnel à sa longueur d’onde (plus les longueurs d’onde sont faibles, plus les rayonnements ont de l’énergie)

Question 10

Qu’est-ce que l’absorption?

Answer 10

Lorsqu’un atome ou une molécule (après avoir été exposée aux rayonnements) absorbe une partie de l’énergie de celui-ci.

Question 11

Que représente les pics sur un spectre de l’absorption (graphique)?

Answer 11

Les pics représentent les longueurs d’onde pour lesquelles on observe un maximum d’absorption

La position des pics et leur hauteur est spécifique pour chaque substance (spécificité d’absorption)

Question 12

Expliquer la couleur des choses?

Answer 12

On voit les couleurs dont les longueurs d’onde ne sont pas absorbées

ex: un chandail rouge signifie que le bleu, le vert ont été absorbés, mais le rouge non, il est réfléchi donc on le voit

Question 13

Qu’est-ce qu’un chromophore?

Answer 13

Groupe d’atomes qui absorbe des radiations du visible

Question 14

Qu’est-ce que la transmittance?

Answer 14

Mesure de la proportion de la lumière qui travers un corps absorbant

T= I/I°

I: rayon émergent
I°: rayon incident

Question 15

Qu’est-ce que la loi de Beer-Lambert?

Answer 15

A= - log I°/I

Plus une solution est concentrée, plus l’intensité de la lumière transmise diminue

Plus le trajet à parcourir par la lumière est long, plus l’intensité de la lumière transmise diminue

Question 16

Quels sont les différents types de coefficient d’absorption?

Answer 16

E (bizzare) = coefficient d’absorpiton molaire

E0,1%= coefficient d’absorption spécifique

E1%= coefficient d’absorption spécifique

Pour passer de E0,1% à E1% il faut: E0,1% x 10

Question 17

Quelles sont les 4 conditions à respecter pour pouvoir appliquer la loi de Beer-Lambert?

Answer 17

1) la lumière doit être monochromatique (une seule longueur d’onde)

2) la solution doit etre homogène

3) le soluté ne doit pas émettre de fluorescence

4) la concentration de la solution ne doit pas être trop élevée

Question 18

Vrai ou Faux: les absorbances sont additives

Answer 18

Vrai, si une solution contient plusieurs espèces absorbantes, alors l’absorbance de la solution est l’addition de tout

Question 19

Quel est le principe de dosage de Bradford:

Answer 19

• le colorant se lie aux acides aminés
• on mesure l’abs à 595nm (détecte les protéines)
• seuil de sensibilité : 1 à 10 microgramme
• la couleur passe de brun-rouge à bleu

Question 20

Quel est le principe de dosage de Biuret?

Answer 20

• réagit avec les liaisons peptidiques
• on mesure l’abs à 540 nm
• seuil de sensibilité 1 à 20 mg
• forme un composé bleu-pourpre