Chromatographie sur colonne (examen 1)

Question 1

Qu’est-ce que la phase stationnaire?

Answer 1

Matrice
Gel
Résine

Question 2

Qu’est-ce qu’un éluat?

Answer 2

Ce qu’on recueille au bas de la colonne

Question 3

Qu’est-ce que la chromatographie moderne (HPLC)

Answer 3

Régulée par ordinateur

Question 4

Dans un tamisage moléculaire, quelle est la phase stationnaire

Answer 4

C’est un gel formé de billes poreuses

Chaque bille contient des pores dont la grosseur varie en fonction du type de gel

Les petites molécules vont éluées moins vite, car elles vont pouvoir passer à travers tous les petits trous et être ralenties

Question 5

Qu’est-ce qu’un rayon de Stokes?

Answer 5

• décrit le poids moléculaire apparent d’une molécule
• le rayon de Strokes d’une soluté est le rayon d’une sphère dure qui diffuse à la même vitesse que ce soluté

Question 6

Quels sont les 3 types de gel utilisés fréquemment?

Answer 6

• dextran (sephadex)
• agarose (sepharose)
• polyacrylamide (sephacryl)

Question 7

Définir degré de fonctionnement?

Answer 7

Intervalle de taille de molécules qui peuvent être facilement séprarées par les billes d’un polymère particulier

la taille la plus élevée: taille à laquelle une molécule est trop grosse pour pénétrer le gel et sera donc éluée

la taille la plus petite correspond à la taille où une molécule pourra pénétrer toutes les billes du gel

Question 8

Définir degré d’exclusion

Answer 8

C’est la limite supérieure du domaine de fractionnement

C’est la masse moléculaire au dela de laquelle les molécules ne pénètrent plus dans le gel

Question 9

Qu’est-ce qu’une résolution?

Answer 9

C’est une mesure de la qualité de la séparation des molécules suite à une chromatographie

Question 10

Quels sont les 2 critères pour une bonne résolution?

Answer 10

1) distance séparatn 2 sommets sur la courbe d’élution (doivent être petite).

2) largeur des pics (ne doivent pas être trop larges)

Question 11

Qu’est-ce que la chromatographie d’échange ionique

Answer 11

• séparation des molécules selon leurs charges
• colonne anionique= retient ce qui est négatif, donc ce qui est positif sera élué en premier
• colonne cationique= retient ce qui est positif, donc ce qui est négatif sera élué en premier

Question 12

Qu’est-ce que le pI?

Answer 12

Ph où la charge nette est de 0

Question 13

Comment est la protéine selon le pH et le pI

Answer 13

Ph < pI = la protéine est chargée +

pH > pI = la protéine est chargée -