Brainscape's Knowledge GenomeTM

Browse over 1 million classes created by top students, professors, publishers, and experts.


See full index

maturitka > serologie > Flashcards

serologie Flashcards

1
Q

SEROLOGIE k čemu je

A
  • Umožňuje nám zjistit patogen pomocí specifických protilátek
  • Protilátky se stanovují z krevního séra, likvóru, moči, slin
  • Buněčná imunita se využívá v TUBERKULÍNOVÝM TESTU (= test na TBC)
    POZITIVNÍ = MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS
    -> Červená pokožka

NEGATIVNÍ = BEZ REAKCE

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

VÝHODY SEROLOGIE

A
  • Sledování odezvy organismu
  • Využíváme pro MO, které:
  • Nemůžeme kultivovat
  • Viry (HBV, vzteklina, coronavirus, EBV, HIV, HCV…
  • Někteří paraziti (např. Toxoplasma gondii)
  • Atypické bakterie (Mycoplasmy, Chlamydie)
  • Spirochety (Treponema palladium, Borellia afzelii/garinii)
  • …
  • Jsou moc nebezpečné na kultivaci či je kultivace moc náročná
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

NEVÝHODY SEROLOGIE

A
  • Detekujeme protilátky ne MO
  • Organismus nemusí tvořit protilátky
  • Protilátky se mohou tvořit i bez MO
  • Protilátky jsou v séru dlouho i po prodělané nemoci
  • Falešná pozitivita/negativita
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

PROTILÁTKY mohou být:

A

o Protein
o Glykopeptid
o Polysacharid
o …

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Specifické protilátky (imunoglobuliny):

A
  • IgA
  • IgG
  • IgM
  • IgD
  • IgE
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

IgA

A

o neutralizuje antigen
o tvořen z 2 podjednotek (z 2 Y)
o na kůži a na sliznici (v potu, mazu, sekretech…)
o vznikají brzy po kontaktu s antigenem
o Dimér (2Y = složený ze dvou podjednotek)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

IgE

A

o důležitý při alergii (alergické reakce)
o paraziti
o monomer

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

IgM

A

o veliká molekula
o pentamér = skládá se z 5 podjednotek (z 5 Y)
o neprochází placentou
- průkaz protilátek IgM u novorozence vždycky znamená nitroděložní infekci plodu
o protilátka akutního typu (akutní infekce)  teď probíhá nemoc
o Tvoří se jako první po kontaktu s MO

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

IgG

A

o Vzniká pozdě
o Monomér (1Y)
o Anamnestické protilátky (rekonvalescenční = po nemoci)
o skládá se z 1 podjednotky, malá molekula, jedna Y
o prochází placentou a chrání děťátko i v prvních 6 měsících života proti infekcím
o Pokud má matka IgG protilátky proti určité nemoci, přejdou placentou do těla miminka a chrání ho i v prvních měsících života
o Dlouhá životnost  Je to Ig, který ukazuje již prodělanou nemoc (kdysi či nedávno, ale již je po nemoci)
- Někdy IgG zůstávají i celý život

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

IgD

A

o Důležitý pro vývoj imunitního systému
o Uvolnění histaminu
o Monomér (1Y)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

IgM+ a IgG- ?

A

akutní fáze

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

IgM- a IgG+ ?

A

anamnestická fáze (rekonvalescence)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

IgM- a IgG- ?

A

nikdy neprodělaná nemoc

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

IgM+ a IgG+ ?

A

chronická infekce, pozdní fáze

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

REAKCE ANTIGENU S PROTILÁTKOU

A
  1. Specifická: nevidíme ji
  2. Nespecifická:
    * Změna struktury Ag
    * Můžeme makroskopicky pozorovat (něco se např. vysráží)
  • Kvalitativně – jestli je přítomna protilátky
  • Kvantitativně – jestli je přítomna protilátka a kolik jí je
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Vždy potřebujeme k reakci:

A
  • Antigen (Ag)
  • Specifickou protilátku (Ab)
  • Vehikulum = nosič (ERY, Latex…), medium (roztok 0,8 % NaCl)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
17
Q

ANTISÉRA

A

Monoklonální Ab
o Jsou stejné (z jedné buňky)
o Rozpoznávají pouze jeden epitop antigenu
o Drahé
o Velmi specifické

Polyklonální Ab
o Trochu pozměněné
o Rozpoznávají (jsou namířené) proti více epitopům určitého antigenu
o Levné
o Z více různých buněk, můžou být různý

Epitop = je malá oblast molekuly antigenu, kterou rozeznávají imunitní receptory

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
18
Q

AVIDITA

A

= síla (pevnost) vazby antigenu
- Afinita vyjadřuje sílu interakce jednoho vazebného místa s jedním antigenem
- Avidita vzrůstá s afinitou jednoho vazebného místa pro jeden antigen a s počtem simultánně se uplatňujících vazebných míst
- Proto může například pentamer IgM, protilátky s deseti vazebnými místy, vázat antigeny s velmi velkou aviditou, ačkoliv afinita jednotlivých vazebných míst bývá malá
- V první fázi infekce je její hodnota nízká
- Vyzrávaní imunitní odpovědi má za následek tvorbu plazmatických buněk, které tvoří protilátky cíleněji a zároveň dochází ke kompetici o antigen
- Protilátky s vyšší afinitou vychytávají antigen snáze a rychleji
- To se v konečném důsledku projeví vzestupem avidity protilátek v pozdější fázi infekce

VYSOKÁ (velká síla vazby) = anamnestické protilátky (rekonvalescentní), pozdější fáze infekce

NÍZKÁ (nízká síla vazby) = protilátky akutní fáze, nevyzrálé protilátky

19
Q

TITR

A

= poslední pozitivní ředění
- Kvantitativní

20
Q

SEROLOGICKÉ TESTY

A
  • AGLUTINACE
  • KFR (KOMPLEMENT FIXAČNÍ REAKCE)
  • PRECIPITACE
  • WESTERN BLOT (WB)
  • ELISA
  • FLUORESCENČNÍ IMUNOESEJE
21
Q

Co to je Aglutinace, co vzniká a její dělení

A

= Ag + Ab -> vznikne nerozpustitelný produkt (aglutinát, je viditelný okem) + čirá tekutina

  • Dělíme na:
  • Přímá
  • Zpětná
  • Nepřímá
    • Přímá hemaglutinace
    • Nepřímá hemaglutinace
    • Latexová aglutinace

Aglutinace se může dělat na 2 způsoby:
* Kvalitativní:
- Oko
- Aglutinoskop

   - Zkumavka – chuchvalce
   - Sklíčko – sype se to
  • Kvantitativní:
    • Např. v séru je koncentrace 1:1800  je to pozitivní, měří se přesné množství vzniklých imunokomplexů
    • Media, kde jsou protilátky či antigeny rozpuštěný:
      • Fyz. roztok
      • Fyz. roztok + pufr (F2PBS)
      • Roztok bílkovin (albumin…)
        - BSA, HSA
      • Dextram
22
Q

TYPY přímé aglutinace

A

Widalova reakce
* Detekujeme protilátky proti Salmonelle

Wrightova reakce
* Detekujeme protilátky proti Franciselle a Brucelle

Weilova-Felixova reakce
* Detekujeme protilátky proti Listerii

22
Q

Přímá aglutinace

A
  • Detekujeme přímo protilátky
  • Zjišťujeme proti bakteriálnímu onemocnění
  • Nepřímý průkaz MO

POZITIVNÍ = VZNIKNE „CHUCHVALEC‘‘ -> AGLUTINÁT

NEGATIVNÍ = BEZ REAKCE

23
Q

Zpětná aglutinace (=sérotypizace) a její typ

A
  • Hledáme Ag
  • Používáme u Salmonelly, E.coli, Shigella
  • Určujeme Ag neznámého MO antisérem

Kaufman-Whiteova schéma (všechny kombinace O, H antigenů)

24
Q

Nepřímá aglutinace

A
  • Antigeny nebo protilátky jsou navázány na pevné částici např. na:
    - erytrocytu (hemaglutinace)
    - latexu (latexová aglutinace)
25
Q

druhy nepřímé aglutinace

A
  • Přímá hemaglutinace
  • Nepřímá hemaglutinace
  • Latexová aglutinace
26
Q

Přímá hemaglutinace a její typ

A
  • Určujeme protilátky
  • Používá se v transfuzní službě (krevní skupiny)
    - Antigeny jsou už navázány na ERY samy od sebe (buď vrozeně či po imunizaci)
  • V MIE se používá na EBV (infekční mononukleóza = Epstein-Barrová virus)

Paul-Brunell reakce

27
Q

Nepřímá hemaglutinace

A
  • Určujeme protilátky
  • Antigeny jsou na ERY navázány druhotně
  • „Donutíme‘‘ ERY aby na sebe navázaly Ag
  • Používáme proti Shigellám, Záškrtu (Corynebacterium diphtheriae), Tetanickému toxinu, Syphilisu (Treponema palladium hemaglutinace = TPHA)
28
Q

Latexová aglutinace

A
  • Dokážeme zjistit jaká protilátka či antigen je navázaný na částici
  • HLEDÁME Ab -> budeme mít navázaný známý Ag v antiséru
    - Revmatoidní faktor (způsobuje revmatoidní arthritis)
  • HLEDÁME Ag -> budeme mít navázanou známou Ab v antiséru
    - Stafylokoky, Meningokoky, Streptokoky, Pneumokoky
29
Q

KFR (KOMPLEMENT FIXAČNÍ REAKCE) - co to je

A
  • Umožňuje nám určit specifické protilátky
  • Neurčí nám typ protilátky (IgM, IgG…)
  • Komplex antigen protilátka + komplement
  • Používáme beraní ERY = zviditelní nám reakci, abychom dokázali určit, zda je +/-
  • Už se nepoužívá
  • Dříve používaná na Brucella, Listerie, Mycoplasma pneumoniae, Toxoplasma gondii
30
Q

co je potřeba ke KFR a výsledek

A

Skládá se z:
1) AMBOCEPTOR
- Králičí protilátky
- na ně navážeme beraní ERY (hemolytický systém)
- ERY jsou senzibilizované králičími protilátkami
- Beraní ERY + AMBOCEPTOR (=senzibilizace)

2) KOMPLEMENT
- Morčecí či králičí
- Bílkovina

3) ANTIGEN

4) SÉRUM PACIENTA
- Zde hledáme protilátky
- I zde se nachází komplement  sérum proto musíme zahřát, abychom se ho zbavili (56C, 30 min)

POZITIVNÍ = čirá jamička se sedimentem ERY

NEGATIVNÍ = červená jamička, hemolýza ERY, protože nenavázaný komplement na ně zaútočí

31
Q

PRECIPITACE

A
  • Reakce protilátky s antigenem
  • Jsou rozpuštěný antigeny
  • Při POZITIVNÍ reakci nám vzniká nerozpustná sraženina (=precipitát)
    • vysrážení Ag a Ab
    • vznikne jen, když je dostatek Ab
  • Ag a Ab musí být v optimálním poměru
  • Dobrý průkaz antigenu
32
Q

2 varianty precipitace

A
  1. Ve vodním roztoku
  2. V gelu, agaru
33
Q

precipitace v roztoku, druhy

A

a. Prstencová precipitace
- Dělá se v úzké kapilárce
- Dříve se používalo na určení
β-hemolytických streptokoků

POZITIVNÍ = UTVOŘÍ SE PRSTENEC (SRAŽENINA)

NEGATIVNÍ = BEZ REAKCE

b. Flokulace
- Využívalo se dříve na ředění bakteriálních titrací toxínů
- Už se nedělá
- Smíšením roztoku antigenu a protilátky dochází k vysrážení v podobě vloček (= vyvločkování)

34
Q

precipitace v gelu, druhy

A

a. Technika dle OUCHTERLONYHO = KVALITATIVNÍ METODA
- Vylejeme gel
- Uděláme dírky kovovou tyčí a ty vyplníme Ag a Ab (dle obrázku)
- Ag a Ab jdou proti sobě a tam kde se střetnou se utvoří precipitační linie (viditelné sraženiny)

b. Imunodifúze dle Manciniové = KVANTITATIVNÍ METODA
- V každé jamičce jiné množství Antigenu
- Okolo které jamky nám vznikne prstenec = POZITIVNÍ
- Čím větší prstenec = tím více Ag
- Vzniklý prstenec dále měříme speciálním pravítkem

35
Q

WESTERN BLOT (WB)

A
  • Využíváme na stanovení:
    o Borellií
    o Toxoplasma gondii
    o HIV
  • Dokážeme určit přesný MO
  • Umíme určit všechny typy Ag a dokážeme zjistit jaký typ přesně
  • Dokážeme určit protilátky proti mnohočetným MO
36
Q

WESTERN BLOT (WB) - co tam patří

A
  1. Elektroforéza
    - Podle hmotnosti a velikosti se bílkoviny (MO) rozdělí po celé ploše gelu
    - Elektrický proud nám tahá bílkoviny dolů
    - Přístroj = plastové destičky, které mají mezi sebou gel (nesmí vyschnout!!)
    - V podstatě nám rozdělí MO na menší kusy
  2. Strip
    - Pacientovo sérum s jeho protilátkami se nakape na proužek
    - Dělá se při potvrzení HIV, Toxoplasmy
    - Vazba Ag s Ab na určitých úsecích stripu = BAREVNÉ PRUHY (+)
37
Q

ELISA

A

KVANTITATIVNÍ METODA
- Serologická metoda, při které prokazujeme antigen či protilátku
- Na dně jamičky je navázaný Ab či Ag (záleží, co chceme zjistit)

[co chceme zjistit] + králičí protilátky = BAREVNÁ JAMKA (ŽLUTÁ)

  • U většiny typů (kromě kompetitivní ELISY) platí to, že čím více navázaných pacientovo protilátek = tím více zbarvená jamička
  • Dokážeme určit i typ protilátky (IgM, IgG…)
  • Existuje i robotizovaná ELISA = drahá údržba i přístroj
  • Dokážeme vyšetřit více pacientů najednou
  • Bezpečná a spolehlivá metoda
38
Q

druhy ELISY

A
  • Přímá ELISA
  • Nepřímá ELISA
  • Sandwichová ELISA
  • Kompetitivní ELISA
39
Q

Přímá ELISA

A
  • Málo specifická reakce
  • Moc se nepoužívá

Y = specifická protilátka
* = enzym navázaný na protilátce
- Máme jamičku, kde je na dně navázaný antigen
- Do jamičky přidáme specifickou protilátku pacienta s navázaným enzymem = ta se naváže na antigen
- Poté přidáme do jamičky substrát = enzym substrát natráví a vznikne barevný komplex (substrát nám barvu a tím pádem i reakci zviditelní)

POZITIVNÍ = BAREVNÁ (ŽLUTÁ) JAMIČKA

40
Q

Nepřímá ELISA

A

Y - primární protilátka = pacientovo
Y2 - sekundární protilátka = králičí
* - enzym navázaný na protilátce
- enzym substrát natráví a vznikne barevný komplex (substrát nám barvu a tím pádem i reakci zviditelní)

POZITIVNÍ = BAREVNÁ (ŽLUTÁ) JAMIČKA

41
Q

Sandwichová ELISA

A
  • Velmi používaná
  • Vysoce specifická a spolehlivá
  • Nejčastější ELISA

Y = primární protilátka = pacientovo
Y2 = sekundární protilátka = králičí
* = enzym navázaný na protilátce
- Máme jamičku, kde je na dně navázaný antigen
- Do jamičky se poté přidá primární protilátka (pacientovo)
- Poté se přidá sekundární protilátka (králičí) s navázaným enzymem
- Poté se přidá substrát = enzym substrát natráví a vznikne barevný komplex (substrát nám barvu a tím pádem i reakci zviditelní)

POZITIVNÍ = BAREVNÁ (ŽLUTÁ) JAMIČKA

42
Q

Kompetitivní ELISA

A
  • Protilátky proti sobě ,,soutěží‘‘
    Y = primární protilátka = pacientovo
    Y2 = sekundární protilátka = králičí  mají větší afinitu k Ag
  • = enzym navázaný na protilátce
  • Zde platí, že vím více je naváže pacientovo protilátek  tím menší zbarvení jamičky
    • ASI? = na pacientovo protilátkách není navázaný enzym (ten je na sekundárních protilátkách), proto když je víc navázaných pacientovo protilátek -> tím pádem je navázáno méně enzymu a protože enzymu tráví substrát  jamička se zbarví MÁLO

(+) = BEZBARVÁ JAMIČKA
(-) = BAREVNÁ JAMIČKA

43
Q

FLUORESCENČNÍ IMUNOESEJE

A
  • Používá se fluorescenční mikroskop
  • Musí být tma
  • Hledá se protilátka, ale dají se hledat i antigeny
  • Např. pro Coxsackie, Treponema palladium
  1. Přímá
    Y = protilátka pacienta
    * = fluorescenční barvivo
  2. Nepřímá
    Y = sekundární protilátka
    Y2 = protilátka pacienta
    * = fluorescenční barvivo

maturitka (17 decks)

Brainscape helps you reach your goals faster, through stronger study habits.
© 2024 Bold Learning Solutions. Terms and Conditions