Laboratorní diagnostika Staphylococcus aureus

Question 1

mikroskopie

Answer 1

• G+ koky, nesporulující, nepohyblivé, často ve shlucích ve tvaru hroznů (lat. staphyle – hrozen)

Question 2

vlastnosti

Answer 2

• Velmi odolné proti vyschnutí, vyšší koncentraci solí (diagnostický znak)

Question 3

něco o něm

Answer 3

• Plazmakoaguláza pozitivní (nejvýznamnější je Staphylococcus aureus)
  o Běžně na: kůži, v nose, ale i v přírodě
  o Způsobuje onemocnění např:
   Infekce kůže a měkkých tkání (flegmóna, impetigo, infekce ran, folikulitida, zánět nehtového lůžka)
   Mastitis (infekce prsu)
   Pneumonie
   Abscesy
   Osteomyelitis (kostí)
   Arthritis (klouby)
   Spondilodiscitis (páteř)
   Endokarditis (vlastní srdeční chlopeň)
   Umělé materiály (TEP = totální endoprotéza = umělé klouby, žilní katetry, kardiostimulátory, umělé srdeční chlopně…)
• Tvoří biofilm (stafylokoky milují umělé materiály, uchytí se na nich a kolem sebe začnou tvořit polysacharidovou hmotu zvanou biofilm)
  o Podle rezistence k ATB se aureus dělí na:
   MSSA (=methycilin citlivý St.aureus)
   MRSA (=methycilin rezistentní St.aureus)

Question 4

Selektivní půdy

Answer 4

• 5% NaCl = Streptokoky, Enterokoky, Stafylokoky
• 8% NaCl = Stafylokoky

Question 5

Biochemické testy

Answer 5

• Kataláza
• Fermentace glukózy
• Oxidázový test
• Plazmakoaguláza (Clumping)
• Hyaluronidáza

Question 6

Hyaluronidáza

Answer 6

• Staphylococcus aureus ničí pouzdro Streptococcus equi

POZITIVNÍ = STAPHYLOCOCCUS AUREUS
NEGATIVNÍ = OSTATNÍ STAFYLOKOKY

Question 7

Kataláza

Answer 7

• Využívá enzym peroxidáza
• Rozkládá peroxid vodíku za vzniku kyslíku
• 2H2O2 = 4HO = O2 + 2H2O

POZITIVNÍ (vznikají bublinky O2) = STAFYLOKOKY, MIKROKOKY

NEGATIVNÍ = STREPTOKOKY, ENTEROKOKY

Question 8

Fermentace glukózy

Answer 8

• Rozklad glukózy bez přístupu kyslíku

POZITIVNÍ = STAFYLOKOKY

NEGATIVNÍ = MIKROKOKY

Question 9

Oxidázový test

Answer 9

• Využívají ji aerobní bakterie
• Zda je přítomný cytochrom c oxidáza
• Využívá redukční činidlo

POZITIVNÍ (modrá) = MIKROKOK

NEGATIVNÍ (bez zbarvení, šedá) = STAFYLOKOKY

Question 10

Plazmakoaguláza (Clumping)

Answer 10

• Bakterie přeměňuje fibrinogen na fibrín (srážecí faktory)
• V kapilárách vznikají tromby
• Zastavuje fagocytózu
• Staphylococcus aureus dělá v králičí a lidské plazmě shluky (aglutinaci)

2 možnosti, jak udělat clumping:
= Vázaná koaguláza
- Shlukovací clumping
- Při „zdrcnutí‘‘ = POZITIVNÍ
- Reakce musí být rychlá
= Volná koaguláza
- Citrát v králičí plazmě
- Pokud je reakce POZITIVNÍ = plazma zkoaguluje = želé konzistence
- Ve zkumavkách
- Kultivace 4 h, 37C

POZITIVNÍ = STAPHYLOCOCCUS AUREUS

NEGATIVNÍ = OSTATNÍ PLAZMAKOAGULÁZA NEGATIVNÍ STAFYLOKOKY

Question 11

kataláza (postup)

Answer 11

1. vezmeme si sklíčko, na které dáme 1 kapku H2O2
2. vezmeme si sterilní kličku a nabereme si 1 bakteriální kolonii a romícháme v kapce

Question 12

plasmakoaguláza (postup)

Answer 12

1. na kartičku si všude kápneme 1 kapku latexového testu
2. nabereme si sterilní platovou tyčinkou trochu kolonie a rozmícháme jí v kapce latexového testu
3. kroužíme kartičkou a hledáme aglutinaci