Quiz lab 9 Flashcards
Principaux glucides dans organisme
Glycogène
Mucosubstances
Glycogène
Précurseur du glucose dans métab de l’organisme
Polysaccharides
Plus grand réservoir dans foie et muscles skelettiques
Largement distribué
Pathologies
Glycogène dans tubules rénales ou cellules de foie = signe de diabète
Anormal dans cancer métastatique du rein, carcinome du foie et désordres congénitaux
Mucines
AKA mucosubstances épithéliales
Produit glucidique riche en glucides
(mucopolysaccharides = mucosubstances conjonctives)
Role de protection
Produites par cellules épithéliales, fibroblastes et mastocytes
2 principales catégories: acides et neutres
Partout dans l’organisme (surtout dans conduits qui ouvrent sur environnement interne)
Présence ou absence peut être utilisée comme indice pour trouver origine de la source d’une carcinome
APS
Méthode acide périodique de Schiff
Colo plus répandue pour indiquer présence de glucides dans tissus
2 étapes APS
- oxydation par acide périodique
2. détection des glucides
Oxydation par acide périodique
Ac. périodique = oxydant sélectif qui brise liens entre 2 carbones et libère des aldéhydes réactifs (CHO)
Détection des glucides
Par réactif de Schiff: produit de réduction de la fuchsine basique (ou pararoaniline) par un ac. sulfureux (brise les groupes chromophores de la fuchsine basique par sulfuration) —> donne composé incolore (leucofuchsine qui est un leucocolorant)
Réactif de Schiff combine aux groupes aldéhydes ce qui redonne une couleur en recréant un chromophore dans la molécule
Nouveau groupe coloré = slightly différente couleur de fuchsine basique
Modification avec Diastase
Méthode APS-D
APS pas spécifique pour glycogène (mucines acides, LH, TSH, FSH, mucine gastriques, réticuline peuvent aussi réagir)
Diastase digère glycogène alors traite une des deux lames données pour le même tissu avec cet Z avant la coloration
Compare les 2 lames au microscope
Si APS-D nég et APS pos –> présence de glycogène
Si APS-D pos et APS pos –> autre que glycogène
Contre-colo utilisé dans notre lab
Hématoxyline de Harris acidifié
Solutions nécessaires
- ac. périodique 1%
- Réactif de Schiff
- Hématoxyline de Harris
- alpha-amylase
Résultats attendus
APS
Glycogène, membrane basale, mucines neutres: Magenta (APS pos)
Noyau, cytoplasme, GR: bleu pâle
Mucines acides: incolore-magenta (variable)
APS-D
Même chose sauf glycogène non coloré
Temps d’exposition ac. périodique
Si over 20 min PR- deviennt APS pos
Lavage eau courante
Suite au réactif de Schiff
Enlève excès réactif qui pourrait s’oxyder et produire de faux positifs
Métabisulfite de potassium 0.55% peut remplacer eau courante pour enlever excès
Substances APS pos
Glycogène Amyloide Mycose Membranes basales Mucines épithéliales Cartilage Amidon Cellulose Collodion thyroidien
Fonctions des mucines
Plupart des surfaces recouvertes de mucines –> lubrification
Recouvrement peut aussi favoriser diffusion ionique et moléculaire
Augmentation d’adhésion cellule-cellule avec implcation des mucines dans détermination de la spécificité de surface de la cellule
Anti-adhésif sur bactéries dans la vessie
Mucines neutres
Pas de radical acide présent
Dans l’estomac, prostate et cellules caliciformes
Bleu alcian: neg
APS: pos
Mucines acides sulfatées
Contiennt groupe sulfate Glande bronchique Mucines du gros intestin Bleu alcian: pos pH 1.0 et 2.5 APS: pos (parfois)
Mucines acides carboxylées
Groupe carboxyle Glandes salivaires et bronchiales Mucines du petit et gros intestin Bleu alcian pH 2.5: pos Bleu alcian pH 1.0: neg APS: pos (parfois)
Bleu alcian (BA)
Colo basique
Base de cuivre (donne couleur bleu) soluble dans l’eau
BA pH 2.5
Solution ac. acétique 3% pH 2.5
Colore mucopolysaccharides acides sulfatés et carboxylés ainsi que les sialomucines (glycoPR-) sulfatés et carboxylés
BA pH 1.0
Solution HCl 0.1 M pH 1.0
Colore seulement les mucopolysaccharides acides sulfatés et les sialomucines sulfatés
BA pH 0.5
Solution HCl 0.2 M pH 0.5
Colore seulement mucopolysaccharides et sialomucines fortement sulfatés
Rincage à acide avant BA
Permet de protéger la solution colo contre variation pH
Rincage à acide après BA
Éviter colo non spécifique
Pas vrm considéré différenciation
