Quiz lab 10 Flashcards
Rincage HCl
Débarasser de résidus de savon qui pourraient réagir (groupes CHO)
Gordon & Sweet
Mise en évidence des fibres de réticuline
Grande importance dans le diagnostic différentiel de certains types de tumeur (changement dans pattern des fibres de réticuline)
Moins de bruit de fond que les autres méthodes
Colo nucléaire moins élevée (désirable)
Prep de solution d’Ag ammoniacal
Imp de garder légère turbidité de la solution finale (avant l’ajout d’eau distillée)
Car excès d’ammonium diminuera la sensibilité et résultera en une imprégnation incomplète des fibres de réticuline
Oxydation
Si structure tissulaire pas de propriétés argentaffines
Donne groupes aldéhydes (CHO)
Principaux agents:
- Permenganate de K (+ blanchissement avec ac. oxalique)
- Métabisulfite de Na
- Ac. périodique
Sensibilisation
Mécanisme mal connu
Pré-imprégnation
Formation complexes organométalliques (qui attirent l’Ag?)
Partie métallique sera remplacée par Ag pendant imprégnation
Sels Ag utilisés
- Alun de Fe
- Nitrate d’Ag (solution diluée)
- Sulfate d’ammonium ferrique
Nous on utilise Permenganate K + Sulfate d’ammonium
Imprégnation
Ajout Ag+ Nom générique pour solutions: solution diamine d'Ag pH 9.0 (très alcalin alors lames/tissus fragiles) 2 groupes de solutions: 1. hydroxyde d'Ag ammoniacal 2. Carbonate d'Ag ammoniacal Ag+ + CHO --> Ag métallique Mécanisme mal connu Pas assez d'Ag métallique formé à cette étape (besoin d'agent de réduction pour en former plus, mais doit faire lavages incomplets avant pour pas TROP en réduire)
Réduction
Former d’autre argent métallique
Agent: formaline 20% (plus concentré que pour fixation)
Virage
Dépots d’Ag pas stable long terme
Remplace par Or
Solution: chlorure d’or (AuCl3 ou HAuCl4)
3Ag métallique + AuCl3 –> Au + 3AgCl
Donne colo noir (Or) au lieu de brun (Ag)
Réduction (fixage)
Enlève traces d’Ag non utilisé ou or ionique qui pourrait produire des dépôts non spécifiques
Donne fond gris pâle –> bon pour observation
Empêche reconversion Ag métallique –> Ag+
Agents utilisés:
Thiosulfate de sodium et métabisulfite de sodium
Contrecolo
Éosine, rouge neutre
Éviter production de précipités non spécifiques
Réactifs purs et eau type1
Verrerie lavée HCl ou ac. nitrique
Éviter contact de solution Ag avec pinces ou portes-lames en métal
Production de dérivés explosifs
Nitrure d’Ag, azide d’Ag: forment dans vieilles solutions exposées à l’air ou lumière
Fulminate d’Ag: solution Ag mise en contact avec vapeurs de formol ou alcool
Pour éviter:
- bouteilles ambrées, fridge, obscurité
- jeter si possible après usage
- neutraliser avec NaCl avant de jetter
Résultats
Noyau, cytoplasme, GR, fibres musculaires: rouge
Collagène: gris
Fibres de réticuline et membranes basales: noir
