Décal. et circulation Flashcards
Critères pour bonne décal
- retrait Ca
- distortion minimal
- préservation struct. nucléaires
- colo subséquentes
- vitesse raisonnable
Ac. nitrique 5-10%
acide fort, plus rapide intolérant pour éviter formation ac. nitreux: ajout urée 0.1% ou formaldéhyde 10% pour Bx urgentes pas bon pour colo des crêtes de MO
Ac. formique 5-10%
acide faible, plus long de choix tamponné ou avec formol changement de solution peu laisser dedans plus longtemps sans dommages
Procédé chimique
Met tissu dans solution fraiche de décal pour min 3h
5 mL liquide décal, 5 mL hydroxyde d’ammonium ou Na (rend solution alcalin car sels de Ca ne précipitent pas quand acide), 1 mL oxalate d’Ammonium ou Na
Laisse reposer 30 min
Si clair —> décal terminée
Principaux agents déshydratants
voir p. 63 dans notes
Principaux agents éclaircissants
voir p.67 dans notes
Agents d’imprégnation
voir p.70-71 dans notes
Problème circulation: précipités dans chambre et tubulures du circulateur
apparence: dans tissus
cause: utilisation formol-zinc ou formol tamponné avec phosphate, premier bain alcool >70%
prévention: alcool 70%, pH formol-zinc sous 7
retrait/correction: rincer avec ac.acétique 5%
Problème circulation: déshydratation excessive
apparence: microchatter
cause: trop longtemps dans alcool (Bx surtout)
prévention: circuler Bx séparer ou diminuer temps
Problème circulation: circulation inadéquate
apparence: vu surtout sur colo HE (colo noyaux pauvre)
cause: reste eau dans tissu (cause plus fréquente), reste xylène dans paraffine, trop de chaleur, problème mécanique
prévention: aucune condensation dans circulateur, alcool 100% pur, pas de problème mécanique, chaleur seulement pour paraffine
Problème circulation: artéfact éponge
cause: utilisation éponges pour petits morceaux
prévention: tremper éponges dans fixateur avant de mettre fragment
Problème circulation: dessication accidentel du tissu
apparence: lors de l’enrobage et sous forme de bloc
cause: tissu laissé air libre, rare maintenant car circulateurs fermés
correction: recouvrer le plus de morpho possible, placer tissu dans solution réhydratante
Déshydratation info générale
But: enlève eau
Trop brusque pour tissu si 100% en premier
Bain: 70 %, 90%, 100%, 100%, 100%
Faire rotation des bains 100%
Temps nécessaire dépend de la grosseur du tissu
Premier bain 30% si tissu embryonnaire ou cerveau
3 avantages du sulfate de cuivre anhydre
- indique si encore eau présent (devient bleu si eau présent)
- Accélère déshydratation puisque attire/retire eau
- prolonge durée alcool
Facteurs qui influencent la déshydratation
p. 65