Protéines de l'inflammation Flashcards
Qu’est-ce qu’une réaction inflammatoire?
*Réponse de l’organisme à une agression tissulaire.
*Vise à cicatriser le tissu blessé le plus rapidement possible, tout en empêchant la propagation de l’agression.
Qu’est-ce qui distingue l’inflammation aigue vs chronique?
-Suraiguë (minutes) : Choc septique
-Aiguë (minutes, jours) : brûlure, pancréatite, méningite
-Chronique (semaines, années) : arthrite, asthme
Vers quelles phases l’inflammation aigue peut évoluer?
On peut passer d’une inflammation aiguë (phase vasculaire ou cellulaire), à une inflammation chronique, pour ensuite finir en une fibrose/cicatrisation (tissu enflammé remplacé par un tissu conjonctif fibreux)
-l’amygdalite serait un exemple de l’inflammation aiguë
-l’arthrite serait un exemple d’inflammation chronique
Quels sont les effets bénéfiques et néfastes d’une réaction inflammatoire?
Bénéfiques (adaptée) :
-Destruction de l’agresseur.
-Limitation des dégâts.
Néfastes (inadaptée) :
-Destruction du tissu (nécrose, abcès)
-Cicatrice
-Engendré par :
–Persistance de l’agent pathogène
–Anomalies de la régulation du processus inflammatoire
–Anomalies quantitative ou qualitative des cellules intervenants dans l’inflammation
Quelle est la différence entre réaction inflammatoire locale et systémique?
Locale :
Vasodilatation locale, exsudation plasmatique et afflux local de cellules inflammatoires, par exemple au niveau cutané (plaie) ou de la muqueuse bronchique (asthme allergique).
Systémique :
Signes généraux comme la fièvre et production hépatique des protéines de phase aiguë.
Quelle est l’étiologie de l’inflammation?
*Infection : bactéries, virus, parasites, champignons
*Agents physiques : traumatisme, chaleur, froid, radiations
*Agents chimiques : caustiques, toxines, venins
*Agression dysimmunitaire : anomalie de la réponse immunitaire, allergies, auto-immunité
*Exposition à long terme à des irritants dans l’environnement : chimiques industriels, pollution
*Inflammation chronique: Obésité, maladie cardiovasculaire
Quels sont les singes cliniques de l’inflammation?
*Chaleur
*Rougeur
*Œdème
*Douleur
*Altération de l’état général
Quelle est ‘origine des symptômes clinique de l’inflammation?
*Douleur : stimulation des récepteurs par les bradykinines
*Rougeur-chaleur : vasodilatation et ↑ flux sanguins
*Œdème : ↑ perméabilité vasculaire et exsudation plasmatique
*Fièvre : Médiateurs pro-inflammatoires solubles (prostaglandines, IL-1, IL-6, TNF-a)
*Anorexie : hyperleptinémie
*Amaigrissement: protéolyse musculaire (TNF-α: cachectine)
Quelles sont les 3 séquences d’événements de la réaction inflammatoire?
- Phase d’initiation : phénomènes vasculaires
-Activation d’effecteurs primaires - Phase d’amplification : phénomènes cellulaires
-Mobilisation et activation d’effecteurs secondaires - Phase de résolution – réparation
-Restaurer l’intégrité du tissu agressé
Qu’est-ce que la phase d’initiation de l’inflammation?
Activation d’effecteurs primaires variés, qui dépendent de la nature du facteur déclenchant:
-Cellules de l’organisme (monocytes, macrophages, lymphocytes)
-Protéines circulantes (anticorps, protéines du complément)
–Activation du complément par voie immune (complexe Ag-Ac) ou par voie non-immune (voie alterne).
-Médiateurs inflammatoires:
–VEGF : Vasodilatation
–Bradykinine : Vasodilatation, douleur
–Sérotonine : Activation des cellules endothéliales, recrutement/adhésion des leucocytes.
Qu’est-ce qu’engendre la phase d’initiation de l’inflammation?
-Augmentation du flux sanguin vers la région lésée
-Augmentation de la perméabilité vasculaire
-Œdème et exsudat
Comment se passe l’échange de liquide entre le sang et le liquide interstitielle et quelles sont les pressions impliquées?
Capillaire artériel : hydrostatique > oncotique, déplacement de l’eau vers le liquide interstitiel, avec O2 et nutriments.
Capillaire veineux : oncotique > hydrostatique, déplacement de l’eau vers le sang, avec déchets.
Qu’est-ce que l’oedème et le syndrome oedémateux?
Syndrome œdémateux :
-Déséquilibre entre la pression hydrostatique et la pression oncotique des capillaires, en combinaison avec une augmentation de la perméabilité vasculaire.
Œdème :
-Inflammatoire
–Exsudat
—Liquide
—Protéines (fibrine)
—Cellules (leucocytes)
—Ex : Infection, néoplasie
-Non-inflammatoire
–Transsudat
—Liquide
—Ex : Insuffisance cardiaque (↓ pression sanguine), cirrhose hépatique (↓ pression oncotique)
Quels sont les rôles et conséquences de l’oedème?
*Apport local de protéines et de médiateurs chimiques (immunoglobulines, facteurs de la coagulation, facteurs du complément)
*Dilution des toxines accumulées dans la lésion
*Limitation du foyer inflammatoire par une barrière de fibrine (à partir du fibrinogène plasmatique), ce qui évite la diffusion de micro-organismes infectieux
*Ralentissement du courant circulatoire par hémoconcentration, ce qui favorise la diapédèse leucocytaire.
Comment les effecteurs primaires activés diffèrent selon la nature du facteur déclenchant dans la phase d’initiation de l’inflammation?
-Les effecteurs primaires activés diffèrent selon la nature du facteur déclenchant.
-2 exemples :
–Cause traumatique : Plaie avec brèche vasculaire
–Cause infectieuse : Infection à bactéries gram négatif
Qu’est-ce qu’une cause infection en contexte de phase d’initiation dans l’inflammation?
Infection entraîne une activation de cellules impliquées dans l’immunité naturelles (monocytes, macrophages)
-Réaction générale et sévère.
Qu’est-ce qu’une cause traumatique en contexte de phase d’initiation dans l’inflammation?
Lésion entraîne une réaction locale avec la mise en jeu du système de l’hémostase, puis le recrutement de cellules inflammatoires :
-Réaction aiguë et locale.
Comment l’exsudat peut influencer la cicatrisation des plaies?
-Inflammation – augmentation de la perméabilité – liquide produit au niveau de la plaie
-Composé d’eau, de protéines, de médiateurs inflammatoires, d’enzymes, de cellules (neutrophiles, macrophages, plaquettes, etc…)
-Un dérèglement de la production ou de la composition de l’exsudat peut mener à une mauvaise cicatrisation
-Ex :
–Fibrineux : fibrine/fibrinogène
–Muqueux : mucus et cellules immunitaires
–Purulent : Plasma, neutrophiles, fibrinogènes, cellules mortes
Quelles sont les 2 étapes de la phase d’amplification d’inflammation?
1-Recrutement des cellules inflammatoires
2-Activation des cellules
Quelles sont les actions coordonnées de la phase d’amplification d’inflammation?
-Facteurs chimiotactiques :
–Médiateurs lipidiques: facteur d’activation plaquettaire, leucotriènes, prostaglandines
–Anaphylatoxines
–Cytokines et chemokines
-Molécules d’adhérence exprimées à la surface des cellules sanguines et autres surfaces de contact (endothélium, matrice extracellulaire) :
–Sélectines
–Intégrines
–Superfamille des immunoglobuline (VCAM-1, ICAM-1)
Quelles sont les cellules recrutées dans la formation d’un granulome inflammatoire grâce au recrutement de cellules?
-Neutrophiles polynucléaires
-Lymphocytes
-Monocytes macrophages
-Basophiles polynucléaires
-Éosinophiles polynucléaires
Quel est le rôle de la phase d’amplification d’inflammation?
-Sécrétion de médiateurs
-Développement d’une réaction immunitaire lymphocytaire B et/ou T
-Élimination des tissus nécrosés par les phagocytes (macrophages, neutrophiles)
Qu’est ce que la migration leucocytaire (diapédèse) dans la phase d’amplification d’inflammation?
-Migration des leucocytes en dehors de la microcirculation et leur accumulation dans le foyer lésionnel:
–Polynucléaires (neutrophiles): 6-24 premières heures.
–Monocytes et lymphocytes: 24-48 heures.
-Adhésion à la paroi vasculaire de neutrophiles
-Transmigration de l’endothélium
-Migration vers la lésion en réponses à des médiateurs
-Phagocytose
-Destruction de l’agent responsable de la lésion, lésions tissulaires, l’apoptose des neutrophiles
Comment la phase d’amplification mène à une réponse générale d’inflammation?
Cytokines pro-inflammatoires produites par les macrophages et les monocytes (IL-1, IL-6 et TNF-a) → Action sur les hépatocytes → Favorise la synthèse des protéines de la réaction inflammatoire par le foie
Expliquez le processus d’activation des cellules?
-Libération de dérivés bactéricides et cytotoxiques : Protéine cationique des éosinophile (ECP), neurotoxine dérivée des éosinophiles (EDN)
-Phagocytose des débris cellulaires
-Sécrétion des médiateurs inflammatoires :
–Amines vasoactives : Sérotonine (Plaquettes), Histamine (Mastocytes), VEGF (Plaquettes)
–Système du complément : C3 et C4 (protéines de phase aiguë), C3a et C5a (anaphylotoxines)
–Enzymes : Cycloxygénase-2 (COX-2), Convertase, Collagénase, Stromélysine, Enzymes de coagulation, Métalloprotéases
—Collagénase et stromélysine se retrouvent dans l’articulation d’une arthrite rhumatoïde
—Les enzymes sont sous le contrôle d’inhibiteurs de protéases et de métalloprotéases
–Cytokines : Monokines (IL-1, IL-6, TNF-a), Lymphokines (IL-2, IL-4, IL-5, IL-13), Interférons (INF-a, INF-b) et Facteurs de croissance (PDGF, VEGF)
–Chimiokines :
—Cytokines de faible PM qui régulent la motilité et l’orientation des leucocytes au site de l’inflammation.
—Induites en réponse aux cytokines pro-inflammatoires
Quelles sont les protéines impliquées dans l’équilibre anti- et pro-inflammatoire?
En rapport avec la phase de résolution de l’inflammation, décrit:
-Neutralisation des facteurs de l’inflammation
-Remodelage et cicatrisation
Neutralisation des facteurs de l’inflammation :
*Interaction des cellules de l’inflammation avec les débris cellulaire (phagocytose)
*Sécrétion d’inhibiteurs de protéases et de cytokines anti-inflammatoires (IL-10)
Remodelage et cicatrisation :
*Synthèse de protéines de la matrice (collagène)
*Intervention de facteurs de croissance
*Angiogenèse
*Régénération tissulaire
Quelles sont les 4 étapes de la phase de la cicatrisation?
1-Phase de détersion : réaction inflammatoire et élimination des tissus morts et agents pathogènes
2-Phase de bourgeonnement ou de formation de tissus de granulation : Migration et activation des fibroblastes qui permettent la synthèse de collagène. Pas d’adhérence entre les cellules afin de permettre le mouvement
3-Épidermisation : la plaie de contracte et se recouvre de cellules épithéliales
4-Maturation de la cicatrice primaire. Collagène de type III dégradé…
Quand la cicatrisation commence?
Vers 3 jours.
Quelles sont les investigations au laboratoire pour la réaction inflammatoire?
*Augmentation de la vitesse de sédimentation
*Modifications de l’hémogramme
*Modifications des protéines plasmatiques
Qu’est-ce que la vitesse de sédimentation (VS)?
*Mesure de la vitesse à laquelle les globules rouges sédimentent.
*Sédimentation plus rapide en présence d’inflammation, liée aux perturbations des protéines plasmatiques
*Modification de la viscosité plasmatique, menant à l’empilement des GR en rouleaux qui sédimentent plus vites que les GR isolés: (VS augmentée).
*Avantages : Facile et économique
*Inconvénient majeur: NON spécifique!
Quel est le principe de mesure de la vitesse de sédimentation?
*Sang : Prélèvement sur un anticoagulant
*Mettre le sang dans une pipette graduée en position horizontale
*Temps de sédimentation : 1 hr
*Homme vs femmes pour les valeurs de références :
-Homme : <50 ans = 15 mm/h ; >50 ans = 20 mm/h
-Femme : <50 ans = 20 mm/h ; >50 ans = 25 mm/h
-VS plus élevé chez la femme en raison d’un taux d’hémoglobine plus bas.
-VS plus élevée avec l’âge dû à l’augmentation du taux de fibrinogène
Quelle sont les causes d’une augmentation de la vitesse de sédimentation?
Augmentation: Grossesse (↑ fibrinogène), Contraceptifs (↑ fibrinogène), Anémie (↓ hémoglobine), Hypergammaglobulinémie (favorise formation de rouleaux), Syndromes néphrotiques (pertes protéines dans l’urine entraîne une activation de la synthèse protéique), Insuffisance rénale chronique (anémie, hypocalcémie, ↑ fibrinogène), Hyperlipidémie (TG ou cholestérol) et Syndromes inflammatoires
Quelle sont les causes d’une diminution de la vitesse de sédimentation?
Diminution: Polyglobulie, Cryoglobulinémie, Hyperviscosité, Hémoglobinopathies, Anémie hémolytique (baisse de l’haptoglobine), Hypofibrinogémie (baisse de fibrinogène), Corticothérapie (anti-inflammatoire) → NON spécifique
Comment l’hémogramme peut-il être modifié par l’inflammation?
*Anémie
Hypochrome: Concentration globulaire moyenne d’hémoglobine (CGMH) (N: 32-36 g/100 ml)
Normo ou microcytaire: Volume corpusculaire moyen (VCM) (N: 80 à 100 fL)
Fer < 11μmol/L (N: 13-25 μmol/L )
*Hyperleucocytose (polynucléaires, monocytes): due à la sécrétion de cytokines hématopoiétiques (G-CSF, M-CSF)
*Hyperplaquettose
Qu’est-ce que l’anémie inflammatoire?
*Permet de les différencier des anémies par carence martiale : Fer sérique ↓, mais ferritine ↓ et transferrine ↑
-Ferritine augmentée : > 200 μg/L (N: 20-150 μg/L)
-Transferrine diminuée : < 2 g/L (N: 1,6-2,7 g/L)
Quel est le rôle de l’hepcidine dans l’inflammation?
*Fer indispensable à la multiplication et au métabolisme de la majorité des agents pathogènes.
*Augmenté par: inflammation (IL-6), Hb, fer sérique
*Diminué par: Hb et fer sérique bas, hypoxie
*Se lie et initie la dégradation de la Ferroportine (transport du fer): entérocytes, macrophages.
*Action = diminution de l’absorption intestinale, séquestration du fer dans les macrophages = Baisse de la concentration sanguine en fer.
Comment l’inflammation modifie les protéines plasmatiques?
-Protéines de la réaction inflammatoire : Taux augmente d’au moins 25% lors de la réaction inflammatoire.
-Protéines de phase aiguë POSITIVES (taux augmentés) (environ 20 protéines)
-Protéines de phase aiguë NÉGATIVES : (taux diminués ou inchangés) (albumine, transferrine, a2-macroglobuline)
Quelles sont les causes de la baisse d’albumine en inflammation?
Protéines de phase aigüe NÉGATIVES = Albumine
Les désordres inflammatoires, aigus ou chroniques, sont les causes les plus communes de baisse des niveaux d’albumine.
4 principaux facteurs sont responsables de cette baisse :
-Hémodilution
-Perte dans l’espace extravasculaire due à une augmentation de la perméabilité vasculaire.
-Augmentation de la consommation locale par les cellules.
-Baisse de la synthèse par une inhibition directe des cytokines et une augmentation de la pression oncotique (aigu: ↑ protéines de phase aiguë, chronique: ↑ immunoglobulines)
Quelles sont les causes de la baisse de transferrine en inflammation?
Protéines de phase aigüe NÉGATIVES = Transferrine
Diminution de la transferrine accompagne celle de l’albumine lors des inflammations ou des cancers, en réponse à une phase aiguë.
2 principaux facteurs sont responsables de cette baisse :
-Hypercatabolisme dans le foyer inflammatoire
-Diminution de sa synthèse, les réserves en fer étant pleines, ce dont témoigne le taux normal ou élevé de ferritine.
Quel est le rôle de l’α2-Macroglobuline dans l’inflammation?
*Joue un rôle important dans la réaction inflammatoire, malgré une concentration qui demeure dans les limites de référence.
*Forme des complexes stables avec les protéases liées à leurs inhibiteurs plasmatiques.
*Les complexes a2-macroglobuline-protéases-inhibiteurs sont rapidement pris en charge par les polynucléaires.
Nomme des protéines de phase aigüe POSITIVES.
*α1-antitrypsine (AAT), α1chymotrypsine (ACT), α1-glycoprotéine acide (AAG, orosomucoïde), C3, C4, Céruloplasmine, Fibrinogène, Haptoglobuline, Protéine C-réactive, Sérum amyloïde A (SAA)
*Ferritine, procalcitonine, hepcidine (autres)
Quelles sont les fonctions des protéines de l’inflammation?
Neutraliser les protéases libérées lors de la réaction inflammatoire.
-Exemples :
–a1-antitrypsine inactive l’élastase (favorise la génération de chimioattractant: IL-8)
–a1-chymotrypsine inactive la cathepsine G (migration des neutrophiles et monocytes)
Neutraliser les déchets de la réaction inflammatoire
-Exemples :
–Céruloplasmine : Neutralise les ions superoxydes O2-
–Haptoglobine : Complexe l’hémoglobine libérée des globules rouges lysées. Permet également de conserver le fer.
–Sérum amyloïde A : Évacue le cholestérol macrophagique en provenance des membranes des débris cellulaires.
Implication dans les effets biologiques de la réaction inflammatoire.
-Exemples :
–Protéine C-réactive : –Mobilisation et activation des leucocytes, stimulation de la phagocytose.
–Protéines de la coagulation (fibrinogène) : Circonscrivent la réponse inflammatoire.
–Protéines du complément (C3 et C4) : Détruisent les organismes étrangers et les cellules endommagées.
Cicatrisation
-Exemple :
–α1-glycoprotéine acide: stimule la prolifération des fibroblastes.
–1)Liaison des fibroblastes entre eux, 2)multiplication cellulaire de la couche basale, 3)contraction des fibroblastes, 4) production de kératinocytes
Donne des exemples d’amplitude de variation de protéines durant l’inflammation.
-Variation = 1000x → protéines impliquées = CRP, SAA
-Variation = 2-4x → protéines impliquées = α1-antitrypsine, haptoglobine, fibrinogène, α1-antichymiotrypsine
-Variation = 1,5x → protéines impliquées = C3, céruloplasmine
*grande amplitude = plus rapidement sécrété = meilleur marqueur de l’inflammation
Donne des exemples de cinétique de variation de protéines durant l’inflammation.
-Cinétique = rapide → protéines impliquées = CRP, SAA, α1-antichymiotrypsine
-Cinétique = moyenne → protéines impliquées = α1-antitrypsine, haptoglobine, fibrinogène, α1-glycoprotéine acide
-Cinétique = lente → protéines impliquées = C3, céruloplasmine, ferritine
Quelles sont les caractéristiques d’un marqueurs idéales de l’inflammation?
1.Spécifique de la réaction inflammatoire
2.Indépendant des étiologies de l’inflammation
3.Cinétique rapide
4.Augmentation importante lors d’une réaction faible
5.Augmentation proportionnelle au degré d’inflammation
6.Dosage précis, reproductible et d’exécution rapide
7.Excellentes valeurs prédictives positive et négative
8.Coût modéré du dosage
Comment choisir une marqueur de l’inflammation?
En pratique : cela dépend du contexte clinique.
Le mieux :
-1 protéine à cinétique rapide (CRP) +
-1 protéine à cinétique lente
Certains marqueurs reflètent mieux que d’autres l’évolution d’une maladie:
-Exemples :
–α1-glycoprotéine acide et fibrinogène: rhumatologie
–α1-glycoprotéine acide: tumeurs malignes
–Céruloplasmine : Maladie de Hodgkin (↑ Cu)
–Protéine C-réactive : infections bactériennes
–a1-antitrypsine: infections virales
Nomme des variations non associées à une réaction inflammatoire.
Âge:
-Transferrine et C3: pas de variation
-Autres protéines de l’inflammation: ↑ avec l’âge, sauf l’albumine qui ↓
Grossesse:
-Augmentation des protéines de l’inflammation (oestrogènes)
Insuffisance hépatique :
-Baisse de la synthèse des protéines de l’inflammation.
Hémolyse: ↓ haptoglobine
Poussée lupique: ↓ CRP
Coagulation intravasculaire disséminée (CIVD): ↓ fibrinogène
Maladies à complexes immuns comme le lupus: ↓ fractions du complément
Quelle est la démarche clinique lors d’une inflammation?
Mesurer l’urgence et la gravité
-La réaction inflammatoire généralisée peut entraîner un état de choc qui est mortel dans 50% des cas.
Recherche d’une maladie :
-Connue (rhumatisme inflammatoire connue)
-Facilement identifiable (pneumonie aiguë récente).
Si syndrome inflammatoire inexpliqué:
-Palpation du crâne, sinus, ganglions, thyroïde et abdomen -
-Auscultation pulmonaire, cardiaque et vasculaire -Touchers rectal et vaginal -Traitement médicamenteux en cours -Examen des urines
Dans quels cas il y a augmentation majeure de la CRP (avec atteinte tissulaire)?
-Infections bactériennes
-Néoplasies (Lymphome, Hodgkin, sarcome)
-Traumatismes (Chirurgie, brûlures)
-Nécroses tissulaires (Infarctus du myocarde)
-Maladie inflammatoire (Arthrite rhumatoïde, Crohn)
Différencie le profil inflammatoire aigue et chronique.
comment la CRP permet un diagnostic différentiel?
CRP N ou subN
-Infections virales
-Angine instable
-Auto-immunité
CRP ↑↑↑
-Infections bactériennes
-Infarctus du myocarde
-Inflammation
Quel est le suivi thérapeutique de l’inflammation?
-Antibiothérapie au cours d’une infection bactérienne
–↓ CRP 24 à 48h après antibiothérapie
–Continuer jusqu’à normalisation
-Traitement anti-inflammatoire
–Associer un autre marqueur (ex.: haptoglobine), car CRP non-modifiée par les AINS
Quel est le profil d’un syndrome inflammatoire aigu et chronique en électrophorèse des protéines?
-Aigu : ↑ des zones a1 et a2, ↓ albumine
-Chronique : ↑ des zones a1, a2 et gamma, ↓ albumine
Que retrouve-t-on à l’interprétation de l’électrophorèse des protéines en cas d’inflammation?
-Élévation des protéines de l’inflammation (AAG, AAT, Hapto)
-Hypoalbuminémie concomitante.
-Profil électrophorétique compatible avec un état inflammatoire aigu.
Quelles sont les causes de changement dans les pics d’électrophorèse lors de l’inflammation?
↓ de l’albumine
↑ des α1-globulines:
-α1 glycoprotéine acide
-α1 antitrypsine
-α1 antichymotrypsine
↑ des α2-globulines:
-↑ de l’haptoglobine
Taux stable de β-globulines:
-↓ de la transferrine
-↑ des fractions du complément
Augmentation polyclonale des γ-globulines :
-Maladies systémiques et les pathologies infectieuses.
Quel est le principe du dosage de protéines spécifiques?
Principe = immunodosage
-Ag = protéine dosée
-Ac = réactif
-Formation du complexe Ag-Ac = précipité en suspension dans un milieu liquide
Dosage = Mesure photométrique du précipité (engendre une solution trouble)
Qu’est-ce que la protéine C-réactive (CRP)?
*Marqueur non spécifique de l’inflammation, le plus utilisé:
-Amplitude élevée : Augmentation rapide jusqu’à 1000x les valeurs normales (Normal: < 5 mg/L).
-Cinétique rapide :
–Synthèse hépatique débute 6-8 h après le début de l’infection et atteint son pic après 36-50 h.
–Élimination hépatique.
–Demi-vie de 19h
*Décrite en 1930: se lie aux parois cellulaires du polysaccharide C de Streptococcus pneumoniae.
*Se lie également aux polysaccharides présents sur plusieurs bactéries, champignons et parasites, ainsi qu’aux produits de dégradation tissulaire.
*Complexe active la voie classique du complément, résultant en sa phagocytose.
*Synthétisée principalement dans les hépatocytes, en réponse à différentes cytokines (IL-6, IL 1, TNFa)
Quel est le rôle de la CRP-hs dans les maladies cardiovasculaire?
*Inflammation chronique joue un rôle central dans le développement de l’athérosclérose.
*Des études épidémiologiques ont démontré qu’une augmentation de la CRP est associée avec un risque accru de MCV, même chez un individu sans histoire de MCV.
*Nécessite l’utilisation d’essais hautement sensibles, avec une limite de détection < 0,3 mg/L.
Qu’est-ce que l’étude Jupiter conclue avec la CRP et les statines?
Étude : L’administration d’une statine la Rosuvastatine(Crestor), vs placebo, chez des individus apparemment en bonne santé: LDL-cholestérol bas, hsCRP élevée (≥2 mg/L).
Objectifs principaux: Mesure du nombre d’évènements ou de décès liés à une cause cardiovasculaire.
Conclusions :
-Diminution de 47% des infarctus, ACV et mortalité cardiovasculaire dans le groupe recevant le médicament.
-CRP élevée associée à un risque augmenté, même si LDL est bas.
-Statines induisent une baisse des taux de CRP.
Comment la CRPhs est lié au risque de MCV?
-HsCRP = < 1mg/L ; Risque cardiovasculaire = Faible
-HsCRP = 1-3mg/L ; Risque cardiovasculaire = Modéré (Risque 50% plus élevé que faible)
-HsCRP = > 3mg/L ; Risque cardiovasculaire = Élevé (Risque 2x plus élevé que modéré)
Quelle est la variation biologique de la CRP?
*Bien que la CRP soit une protéine de phase aiguë, la hsCRP démontre une faible variabilité intra-individuelle chez le patient stable.
*L’AHA recommande l’utilisation de 2 mesures de hsCRP à plus de 2 semaines d’écart, avec la moyenne utilisée pour l’évaluation du risque.
*hsCRP> 10 mg/L : Peut refléter une infection subclinique.
–Reprendre lorsque le patient est stabilisé
–2 mesures avec 1 intervalle d’au minimum 1 mois
–Prendre la plus basse valeur pour l’estimation du risque
Discute des points suivants pour le dosages des cytokines:
-Applications cliniques
-Types d’échantillons
-Considérations préanalytiques
-Considérations analytiques
Applications cliniques :
*Détection précoce d’une infection néonatale (IL-6, IL-8)
*Sepsis/choc septique (IL-6 et TNFa: pronostic)
*Arthrite rhumatoïde (IL-6 et TNFa: activité de la maladie)
*Transplantation (IL-6: rejet, infection, IL-2: immunosuppression)
*Allergie (IL-4)
*Cancer (IL-2: cytotoxicité, récepteur soluble IL-2: pronostic cancer du poumon, IL-6: réponse au traitement IL-2 cancer rénal et mélanome)
Types d’échantillons :
*Plasma, urine (transplantation rénale), liquide amniotique (invasion bactérienne en cours de travail), fluide synovial (arthrite rhumatoïde), LCR (méningite, sclérose en plaque).
Considérations préanalytiques :
*Demi-vie très courte (moins de 10 minutes)
*Rythme circadien (Ex.: IL-6, pic le matin chez les patients avec arthrite rhumatoïde)
*Récepteurs solubles, autoanticorps, protéines de liaisons…
*Cytokines peuvent continuer à être produites après la collecte
*Tubes peuvent être contaminés par des microorganismes, stimuli potentiels des cytokines
*Cytokines peuvent être dégradées dans le tube
*Cytokines peuvent se lier à leurs récepteurs dans le tube
Considérations analytiques :
*Dosage 1x/mois
*Nécessite une journée de travail
*Dans ces conditions: Quasi-impossible de sortir un résultat en STAT
*Analyse non spécifique à une pathologie
*À la frontière entre recherche et clinique
Quels sont les cytokines dosées chez MAYO et au CHUM?
Mayo medical laboratories:
*IL-1a, IL-1b, IL-2, IL-4. IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, TNFa
CHUM :
*IL-6 et TNFa : deux cytokines pro-inflammatoires
*Immunoessai sur Évolis (BioRad)
*Autres méthodes : Multiplex (70 cytokines en simultanée), cytométrie de flux, HPLC. IL-6 peut être dosé sur multianalyseurs.
*Collecte des échantillons: Tubes EDTA, centrifugation à 4ºC, congélation immédiate du plasma.
Quel est le lien entre les cytokines et SARS-CoV-2?
-Réaction inflammatoire incontrôlée avec hausse démesurée de cytokines et chemokines (cytokine storm et CRS: Cytokine releasing syndrome) → Atteinte pulmonaire, dysfonction des organes et pronostic défavorable.
Qu’est-ce que le Syndrome de libération des cytokines?
Cytokines en circulation font une rétroaction positive sur les cellules immunitaires, amenant un recrutement continuel aux sites d’inflammation, avec hausse exponentielle de l’inflammation et des atteintes aux organes cibles.
Étiologies :
-Infectieuse : Influenza, SARS-CoV-2, Epstein-Barr virus, Cytomegalovirus, Streptoque A.
-Auto-immune : lupus, arthrite rhumatoïde juvénile.
-Autre: Réponse à une greffe
Quel est le lien entre IL-6 et SARS-CoV-2?
*Taux IL-6 jusqu’à 3X supérieurs chez:
–Patients admis aux soins intensifs
–Syndrome de libération de cytokines
–Syndrome de détresse respiratoire
–Mort
*Mesure de IL-6 (>24 pg/ml): Risque accru d’hypoxie nécessitant hospitalisation
*Combinaison de plusieurs cytokines (IL-6, IL-10 et IL-8 pour ↑ sens. et spéc.
*Médicaments :
–Siltuximab (neutralise Il-6)
–Sarilumab/Tocilizumab(Antagoniste récepteur IL-6)
Comment IL-6 est dosé au CHUM (2020)?
*Covid-19: Dosage envisagé pour le diagnostic (tempête inflammatoire) et le traitement (anti-IL6 et IL6R).
*Besoin d’un TAT rapide (<24h)
*Évolis → Multi-analyseur(E411, Roche diagnostics)
*Offre de service optimale pour la clinique et la recherche
Qu’est-ce que le projet de recherche du CHUM en Nov 2021 a permis de montrer en lien avec IL-6 et la covid?
-Chercheur du service de cardiologie : CHUM Novembre 2021
-Objectif: Établir la valeur du GDF-15 et de l’IL-6 pour prédire le pronostic chez les patients diagnostiqués avec une infection à la Covid-19.
-GDF-15: cytokine inductible par le stress et un marqueur des lésions cellulaires et de l’inflammation. Associé à une mauvaise issue de l’insuffisance cardiaque, de l’insuffisance rénale et du syndrome de détresse respiratoire aiguë.
-Interleukine-6: Associé à un mauvais pronostic. Tocilizumab (antagoniste des récepteurs de l‘IL-6) est un traitement actuellement explorés pour protéger les patients contre le syndrome de libération de cytokines observé lors de sévères COVID-19.
Quel est l’intérêt de doser le TNF?
*Évaluation des patients avec suspicion d’infection systémique (bactérie gram-négatives) et désordres inflammatoires chroniques.
*Suivi thérapeutique : Certolizumab (anti-TNF) et Etanercept (inhibe production TNF).
*Covid-19 : Hausse associée à un mauvais pronostic.
*Marqueur d’ACV ? Pronostique et cible thérapeutique
Qu’est-ce qu’un sepsis?
*Sepsis : état aigu de dysrégulation de la réponse de l’organisme à une infection (bactérienne, virale, fongique) entraînant la perte de fonction des organes et un risque vital pour le patient.
-48,9 millions de cas de sepsis et 11 millions de décès enregistrés en 2017.
-Aux États-Unis, coût moyen du sepsis est estimé à plus de 32 000$ par patient.
*Présence concomitante d’une infection et d’un syndrome de réponse inflammatoire systémique (≥2 des critères suivants):
-Température>38°C ou<36°C
-Fréquence cardiaque>90/minute
-Fréquence respiratoire>20/minute ou PaCO2<32 mmHg
-Numération des globules blancs>12×109/L ou < 4×109/L (ou>10% de formes immature
*Sepsis sévère : Sepsis + évidence de dysfonction des organes en lien avec le passage de la phase d’hyper-inflammation à une phase compensatoire d’immunosuppression (anti-inflammatoire).
-Peut apporter à la vort
-On estime que de 30 à 50% des personnes qui contractent un sepsis en meurent
Comment se comporte la procalcitonine dans des conditions physiologiques vs pathologiques?
Précurseur de la calcitonine, laquelle est sécrétée par les cellules C de la thyroïde.
Situation physiologique
-Seule la calcitonine mature est sécrétée.
Conditions pathologiques (cancer, sepsis, trauma sévère) :
-Taux sanguin de PCT peut être augmenté de 102 à 104 fois.
-La calcitonine mature ne montre aucune augmentation.
-PCT synthétisée dans le foie, le poumon, l’intestin et le tissu adipeux, et sécrétée intacte dans la circulation.
-Considérée comme un marqueur de l’infection bactérienne
Quelle est la cinétique d’expression de la procalcitonine et de la CRP lors de l’infection bactérienne?
*PCT détectable en 4h, pic à 14h, ½ vie de 20-24h
*CRP détectable en 6-10h, pic à 24-48h, ½ vie de 12-24h
Quels sont les intérêts de doser la PCT vs la CRP dans l’inflammation?
Taux augmentés en réponse à une infection et/ou inflammation
*PCT plus sensible et spécifique à une infection bactérienne que CRP.
*Augmentation au cours des infections bactériennes, parasitaires et fongiques, mais pas au cours des infections virales ou des pathologies inflammatoires non infectieuses.
Augmentation non spécifique à une infection (donc augmentation possible en absence) :
*Synthèse CRP stimulée par les cytokines inflammatoires, même en absence d’infection.
*PCT peut être augmenté en présence de trauma, chirurgie.
Quelles sont les indications pour doser la PCT?
Sepsis
*Augmentation proportionnelle à la gravité du sepsis
*Baisse rapide en réponse à un traitement efficace.
PCT et méningite
*Distinction entre méningite bactérienne et virale est importante.
*La forme bactérienne nécessite une prise en charge en urgence.
PCT et infections respiratoires
*Dosage de PCT dans un groupe de patients hospitalisés pour une infection pulmonaire permet de réduire de 50% l’usage d’antibiotique.
Quel est le lient entre la PCT et l’antibiothérapie?
*Le traitement des infections bactériennes, telles que la méningite, la pneumonie ou le sepsis, nécessite des antibiotiques.
*Utilisation croissante associée à l’émergence de bactéries multi-résistantes.
*Solution: limiter la prescription d’antibiotiques non nécessaires, soit dans les cas d’infection virale ou d’inflammation d’origine non infectieuse.
Quelle es la méthode de dosage de la PCT?
Méthode quantitative automatisée :
-Trousse PCT sensitive Kryptor, de Brahms
-Sensibilité fonctionnelle: 0,06 ng/ml
Méthode semi-quantitative :
-PCT-Q rapid, de Brahms
-Résultat en 30 minutes
Valeurs de référence :
< 0,5 ng/ml : négatif
> 0,5 ng/ml : douteux
> 2 ng/ml : positif
> 10 ng/ml : positif fort
Quels sont les seuils décisionnels de la PCT?
<0,1 ng/ml = normal (antibiotique déconseillé)
0,1 – 0,5 ng/ml = Faible risque de sepsis ou de choc sepsis
0,1 – 0,25 = antibio déconseillé ; 0,25-0,5 ng/mL = antibio conseillé
> 2 ng/ml = Risque élevé de sepsis sévère et/ou de choc septique (infection systémique probable) (antibio conseillé)
2-10 ng/ml= réponse inflammatoire significative, probablement due à une infection bactérienne systémique
> 10 ng/mL Réponse inflammatoire systémique en rapport avec un sepsis sévère ou un état choc septique
NOTES:
*<0,5 ng/ml: n’exclus pas une infection localisée ou systémique naissante.
*0,5 –2 ng/ml: doit être interprété en fonction du contexte clinique.
*Réaliser un nouveau dosage dans les 6-24h pour PCT<2 ng/ml.
Selon l’article publié par le CHUM, quelle était l’utilisation du dosage de la PCT?
Objectif: Évaluer l’utilisation du dosage de la PCT sur le plan des indications, de l’utilisation d’un algorithme décisionnel, de la durée de l’antibiothérapie et du taux de mortalité pour les patients traités au CHUM. 20/07/2014 –12/01/2015 (6 mois): 1530 dosages de PCT
Études: 500 dossiers, 722 dosages
Indication: Infection respiratoire: 69,8%, Sepsis: 8%
Respect de l’algorithme: 52,4%
Répercussions : Réduction de la durée de l’antibiothérapie ; Non associée à une hausse de décès. ; FP 4,4% ; FN 13,6%
Qu’est-ce que la calprotectine fécale?
*Marqueur non invasif de l’inflammation intestinale.
*Protéine dérivée des neutrophiles et monocytes. Elle représente 60% du contenu cytosolique des neutrophiles.
*Sa concentration dans les selles est le reflet indirect des processus inflammatoires dans le tube digestif.
*Permet de discriminer entre une atteinte organique (Ulcérations dans le contexte d’une maladie inflammatoire chronique de l’intestin –MICI) et une atteinte fonctionnelle (Ex.: colon irritable).
En rapport avec la calprotectine fécale, discute de:
-préanalytique
-analytique
-suivi thérapeutique
*Non spécifique pour les MICI, elle peut s’élever dans d’autres pathologies (Ex.: infection intestinale, colite ischémique, néoplasie).
*Indépendant de l’alimentation.
*Prise d’AINS (anti-inflammatoires non stéroïdiens) et d’aspirine peut être associée à élévation de la calprotectine fécale.
*Suivi thérapeutique : Corrèle avec le degré d’inflammation Concentration basse (< 50 μg/g) : maladie quiescente Concentration élevée (> 150/250 μg/g) : maladie active
*Identification des récidives, via des dosages répétés: Concentration élevée chez un patient asymptomatique (> 150/250 μg/g) témoigne d’un risque accru de rechute dans les 3 à 4 mois et doit orienter vers une consultation
