Le système du complément Flashcards
Quelle est la définition du complément?
- Ensemble de protéines plasmatiques et membranaires, et de récepteurs cellulaires qui assurent un lien entre l’immunité innée et l’immunité adaptative.
- > 30 protéines
- Synthèse des protéines au foie et par les cellules impliquées dans la réponse inflammatoire
Quelles sont les fonctions du complément?
1- Défense naturelle de l’hôte contre l’infection (immunité innée)
2- Maintien en solution et élimination des complexes immuns
3- Régulation de la réponse immunitaire (améliore la production des anticorps)
Comment est-ce que le système du complément est activé ?
- Cascade d’événements (éléments coupés qui activent d’autres éléments pour activer un faible évènement, protéases)
- Amplification d’un faible signal
- Protéines sont clivées en fragments actifs (principalement des protéases)
- Fragments induisent une réponse inflammatoire intense dont le résultat est l’élimination des agents infectieux
Quelles sont les 3 voies d’activation du complément?
3 voies
-voie classique
-voie alternative (nécessite pas d’anticorps)
-voie des lectines (ressemble à la voie classique, pas d’anticorps)
*qui mène à mécanisme commun
Décrit la classification fonctionnelle des protéines du complément.
Liaison au complexe antigène/anticorps et à la surface des pathogènes : C1q
Liaison au mannose sur les bactéries : MBL
Enzymes d’activation : C1r, C1s, C2b, Bd, D, MASP-1, MASP-2
Protéines de liaisons membranaire et opsonines : C4b, C3b
Peptides médiateurs de l’inflammation : C5a, C3a, C4a
Protéiques qui attaquent la membrane : C5b. C6. C7. C8 et C9
Récepteur du complément : CR1, CR2, CR3, CR4, C1qR
Protéines régulatrices du complément : C1INH, C4bp, CR1, MCP, DAF, H, I, P, CD59
Décrit de façon générale la voie classique du complément.
- Via les complexes Antigènes-Anticorps
- Autant par les complexes Ag-Ac solubles que par les complexes Ag-Ac sur une cellule cible (ou pathogène)
- CRP liée à la surface des bactéries peut aussi activer la voie classique
*Composant du processus initial d’activation : C1 (C1q, C1s et C1r), IgM (pentamère) et IgG :
-Liaison de C1q aux IgM et peut aussi se lier aussi aux IgG
Efficacité de l’activation
* IgM > IgG pour la liaison du complément
* C1q se lie au domaine CH2 des Ig et requiert au moins deux régions Fc adjacentes
Nécessite 2 IgG proche pour avoir une liaison avec le complément
* Activation d’un lien “thiol-ester” qui se traduit par une liaison covalente à l’antigène (C1/immunoglobuline)
Quelles sont les protéines impliquées dans la voie classique d’activation du complément et quelle est la séquence d’action des protéines?
C1 (C1q : C1r2 :C1s2)
-C1q : Se lie indirectement via anticorps liés aux pathogènes (ou directement aux surfaces des pathogènes) permettant l’autoactivation de C1r (protéase)
-C1r : Clives C1s en protéase active
-C1s : Clives C4 (et C2)
C4
-C4b : Lie de façon covalente le pathogène et l’opsonise
-Lie C2 pour le clivage par C1s
-C4a : Médiateur peptidique de l’inflammation (activité faible), anaphylatoxine
C2
-C2a : Enzyme active de la voie classique des convertase C3 (et C5)
Complexe C2a et C4b = clive C3 (et C5)
-C2b : Précurseur de la C2 kinine vasoactive
C3
-C3b : Plusieurs molécules de C3b se lie à la surface des pathogènes et agie comme une opsinine. Initie l’amplification via la voie alternative. Se lie à C5 pour le clivage par C2a
-C3a : Médiateur peptidique de l’inflammation (activité intermédiaire)
Décrit la voie d’activation du complément par les lectines.
- Indépendante des Ac
- Activation par la liaison de lectines (MBL/mannose binding lectin) sur des mannoses se retrouvant à la surface d’organismes étrangers
Principalement des levures - La liaison aux pathogènes = changement conformationnel
- MASP-1 clive MASP-2
- MASP2 clivent C4 (MASP1 le fait un peu aussi)
- Complexe C4-C2 forment la C3 convertase
- Après l’activation de C3 convertase, il y a convergence avec la voie classique
*MASP: mannose associated protein
Décrit de façon générale la voie d’activation alternative du complément.
- Ne requiert par la formation de complexes Ag-Ac
- C3 activé est généré de façon spontanée (petite quantité tjrs active)
- Activation par des protéines à la surface d’organismes étrangers
- Production de C3 et de C5 convertases
- Régulation de la progression de l’activation par la surface des cellules hôtes
Quelles sont les protéines impliquées dans la voie alternative d’activation du complément et quelle est la séquence d’action des protéines?
C3 (hydrolyse spontanée)
-C3b : Se lie à la surface du pathogène, lie facteur B pour le clivage par facteur D, C3bBb est la C3 convertase et C3b2Bb est la C5 convertase
Facteur B (B)
-Ba : Petit fragment de facteur B, fonction inconnue
-Bd : Enzyme active de la C3 convertase (C3bBb) et C5 convertase (C3b2Bb)
Facteur D (D)
-D : Sérine protéase plasmatique, clives facteur B quand il est lié à C3b, Ba et Bb
Properdin (P)
-P : Protéine plasmatique avec une affinité pour la convertase C3bBb sur les cellules bactériennes, vient stabiliser le complexe C3 convertase
Comment C3 est activé et quelles sont ses fonctions?
Activation de C3
* Étape critique commune aux 3 voies
* Les C3 convertases clivent le C3 en 2 fragments :
C3a: petit, soluble, anaphylatoxine
C3b: gros fragment qui participe à la cascade d’activation
Fonctions de C3 activé
* C3a favorise l’inflammation
* La fixation de C3b à la surface mène à l’opsonisation (B3b = opsonine dans ce cas)
* La fixation de C3b mène à la clairance des complexes immuns
* Génère l’activité de la C5 convertase
Comment C5 est activé?
Activation de C5
*Formation de C5 convertase fait par l’association de la C3 convertase avec le fragment de C3b
* Le clivage de C5 produit deux fragments :
– C5a: anaphylatoxine la plus importante
– C5b: se lie à la surface cellulaire et sert de noyau pour le complexe d’attaque membranaire (segment terminal)
Qu’est-ce que le complexe d’attaque membranaire (MAC)?
- Derniers éléments de la cascade : C5b, C6, C7, C8, et C9
- Éléments communs aux trois voies d’activation
- Se lient entre eux pour former le MAC
- Le MAC provoque la lyse cellulaire (formation pore qui va favoriser le transport)
Quel est le processus d’action du complexe d’attaque membranaire?
- C5b se lie à C6 et C7
- Le complexe C5b67 se lie à la membrane via C7 (liaison faible)
- C8 se lie au complexe et s’insère dans la membrane cellulaire (liaison + forte, meilleur ancrage)
- Les molécules C9 se lie au complexe et le polymérise
- 1-16 molécules de C9 se lie pour former un pore dans la membrane
Quelles sont les composants terminaux du complément qui forment le complexe d’attaque membranaire?
C5
-C5a : Petit peptide médiateur de l’inflammation (haute activité)
-C5b : initie l’assemblage du système d’attaque membranaire
C6 : Se lie à C5b ; formes un accepteur de C7
C7 : Se lie à C5b6 : complexe amphiphilique qui s’insère dans la bicouche lipidique
C8 : Se lie à C5b67 : initie la polymérisation de C9
C9 : Polymérise C5b678 pour former une membrane de canal d’enjambement, lysant la cellule
Quels sont les rôles biologiques du complément?
- Opsonisation
- Production des anaphylatoxines
- Lyse cellulaire
- Amélioration de la réponse des cellules B
- Contrôle de la formation et clairance des complexes immuns
- Clairance des cellules nécrosées ou en apoptose
- Protection anti-virale
Rôles biologiques du complément: Qu’est-ce que l’opsonisation?
1-Bactérie est entouré du complément par les voies alternatives et MBL
2-Quand seulement C3b se lie à CR1, les bactéries ne sont pas phagocytées
3-C5a va activer les macrophages pour phagocyter via CR1
Rôles biologiques du complément: Qu’est-ce que la production d’anaphylatoxines?
1-Des petits produits du clivage du complément agissent sur les vaisseaux sanguins pour augmenter la perméabilité vasculaire et l’adhésion de molécules
A. Cela va engendrer une perméabilité qui permet l’augmentation d’une fuite des vaisseaux sanguins et une extravasation des molécules du complément et des immunoglobulines
B. Permet aussi d’augmenter la migration des macrophages, leucocytes polymorphonucléaires (PMNs) et lymphocytes. L’activité microbicide des macrophages et PMNs est aussi augmenté
Rôles biologiques du complément: Qu’est-ce que la lyse cellulaire?
Perturbe la régulation des fluides et permet de faire rentrer les fluides dans le pathogène et faire gonfler le microorganisme pathogène pour le faire exploser
Rôles biologiques du complément: Qu’est-ce que l’amélioration de la réponse des cellules B?
Le C3d, un fragment du complément C3, améliore la réponse des cellules B en augmentant l’internalisation et la présentation de l’antigène. Il agit en se liant au récepteur CR2 (CD21) des cellules B, ce qui amplifie leur activation lorsqu’elles reconnaissent l’antigène via leur récepteur BCR (lien entre réponse innée et adaptative, amélioration de la réponse adaptative)
Rôles biologiques du complément: Qu’est-ce que le contrôles de la formation et la clairance des complexes immuns?
Le C3d contribue à la régulation de la formation et à la clairance des complexes immuns, favorisant une réponse anticorps plus efficace.
*formation de plus petit complexe, plus facile à phagocyter
*reconnu par macrophage (phagocytose) et GR (va dans rate et macrophage agissent là)
Rôles biologiques du complément: Qu’est-ce que la clairance des cellules nécrosées ou en apoptose?
Opsonisation de cellules nécrotiques/en apoptose ou fragments autres. Élimination par les neutrophiles (peut-être d’autres monocytes/macrophages) vu présence de C3b
Rôles biologiques du complément: Qu’est-ce que la protection anti-virale?
Le complément peut être activé par différentes voies pour renforcer la protection antivirale. Il favorise l’opsonisation des particules virales, permettant leur reconnaissance et leur élimination. De plus, il peut induire la formation d’agrégats viraux, empêchant ainsi le virus d’atteindre sa cible cellulaire. Enfin, le complément peut conduire à la lyse directe du virus ou à sa phagocytose par les cellules immunitaires.
Pourquoi le complément ne s’attaque pas à nos propres tissus ?
Présence de régulateurs de l’activation qui :
-Dissocient les convertases
-Dégradent les facteurs à la surface cellulaire
-Agissent comme des co-facteurs de la dissociation et de la dégradation
-Il existe des régulateurs spécifiques pour certaines voies
Quel est le rôle de C4BP dans la voie classique?
Le C4BP est une protéine sérique qui, en présence d’une convertase à la surface cellulaire, induit sa dissociation, permettant ainsi le relargage d’un fragment de la convertase dans la circulation (dégradation / inactivation complète). L’autre fragment restant à la surface cellulaire devient alors une cible pour la dégradation par le Facteur I. Ce processus est amplifié par des molécules régulatrices du soi présentes à la surface cellulaire, telles que CR1, MCP et DAF.
Quel est le rôle du facteur H dans la voie alternative?
Le facteur H reconnaît la C3 convertase de la voie alterne et induit la dissociation du facteur Bb à la surface cellulaire. Le fragment restant devient alors une cible pour la dégradation par le Facteur I. Ce processus est renforcé par des molécules régulatrices du soi présentes à la surface cellulaire, telles que CR1, MCP et DAF.
Quel est le rôle de C1-INH dans la voie classique?
Défait le complexe C1q, C1r et C1s. Dissocie C1r et C1s, perdant ainsi la fonction du C1q
Quelles sont les protéines régulatrices des voies classiques et alternatives?
Peuvent inhiber la cascade ou la favoriser (voir facteur néphritique)
Inhibiteur de C1 : Se lie à C1rc et C1s actives, les retirant de C1q
C4BP : Se lie à C4b, le déplaçant de C2b ; cofacteur pour le clivage de C4b par I
CR1 (récepteur du complément 1) : Se lie à C4b, le déplaçant de C2b, ou se lie à C3b pour déplacer Bb ; cofacteur de I
Facteur H (H) : Se lie à C3b pour déplacer Bb ; cofacteur de I
Facteur (I) : Sérine protéase qui clive C3b et C4b ; aidé par H, MCP, C4BP ou CR1
Facteur d’accélération de la dissociation (DAF) : Protéine membrane qui déplace Bb de C3b et C2b de C4b
Protéine de cofacteur membranaire : protéine membrane qui promu l’inactivation de C3b et C4b par I
CD59 (protectin) : Empêche la formation de complexe d’attaque membrane sur les cellules autologues ou allogènes. Très exprimé sur les membranes.,
Facteurs néphritiques : Stabilize la convertase C3 (va donc amplifier la cascade d’activation du complément)
Nomme les méthodes d’analyse pour le complément.
- Méthodes fonctionnelles pour l’activité totale
- Méthodes immunologiques pour doser un élément en particulier
- Activité spécifique d’un facteur
- Analyse des produits d’activation
- Dosage des autoanticorps anti-complément
- Expression des marqueurs de surface et identification de la déposition du complément à la surface cellulaire (cytométrie de flux)
- Séquençage génétique
- Monitoring de l’éculizumab (Sainte-Justine le fait au Québec)
Analyse du complément: Quelles sont les méthodes fonctionnelles?
- Activité totale d’une voie
-CH50, AH50, ELISA - Activité d’un élément d’une voie
-Reconstruire l’activité hémolytique d’un sérum déficient - Activité de C1-INH
-Essai chromogénique - Compétition entre C1-INH et substrat chromogénique pour la liaison du C1s activé lié à un support
Analyse du complément: Qu’est-ce que le CH50?
- Activation totale de la voie classique
- GR de mouton sensibilisé (Ac anti-GR de mouton) + sérum du patient
- Détermine la dilution du sérum qui donne 50% d’hémolyse
- Variantes: CH100, relâche de marqueur, utilisation de liposomes, cinétique
Analyse du complément: Qu’est-ce que le AH50?
- Activation totale de la voie alternative
- GR de hamster + sérum de patient
- Détermine la dilution du sérum qui donne 50% d’hémolyse
- EDTA pour chélater le calcium et inactiver la voie classique
- Ajout de magnésium pour favoriser la voie alternative
- Variantes: AH100, GR de lapin, de poulet
Analyse du complément: Qu’est-ce que la mesure de l’activité totale par ELISA?
- Alternative aux essais hémolytiques (CH50 et AH50)
- Dosage de facteurs qui se déposent suite à l’activation par des substances immobilisées sur un support
- Voie classique: IgM lié + Ac anti-C9
- Voie alternative: LPS lié + Ac anti-properdine
- Voie des lectines: Mannose lié + Ac anti-C4
*activité totale car Ac vise C9
Analyse du complément: Comment mesure-t-on l’activité d’un élément d’une voie?
- Reconstruire l’activité hémolytique d’un sérum déficient
- 2 façons
Sérum patient + sérum déficient + CH50
Sérum patient + protéine du complément + CH50
Analyse du complément: Quelles sont les considérations analytiques?
- Complément très sensible à l’activation in vitro
-Chaleur
-Exposition longue à température ambiante
-Complexes immuns ou agglutinines froides - Sérum frais et réfrigéré < 48 h ou congelé à - 70°C
Analyse du complément: Quelles sont les méthodes immunologiques pour doser un élément en particulier?
- Néphélémétrie, ELISA, Luminex (avantage = multiplex), RID, Western blot
- C3, C4, facteur B, C1-INH, MBL, properdine, facteur H, etc
Analyse du complément: Comment analyse-t-on les produits d’activation?
- Ac monoclonaux très spécifiques (ELISA)
- Fragments d’activation, complexes
- In vivo = très faible quantité
Activation in vitro = faux positif
Ratio avec le produit natif
Analyse du complément: Comment fait-on le dosage des autoanticorps anti-complément?
- ELISA → mettre antigène au fond du puit
-Ac Anti-C1-INH (angio-oedème acquis) (EXAM)
-C3NeF, C4NeF (MPGN) (EXAM)
-Ac anti-C1q (LED, LES)
Analyse du complément: Comment fait-on le dosage des complexes immuns circulants?
Dans certaines pathologies, les CIC sont mal éliminés et se déposent au niveau de l’endothélium vasculaire provoquant des lésions par activations du système du complément
- Méthodes :
-Basées sur la fixation des CIC sur le C3 (cellules de Raji ou test conglutinine)
-ELISA basées sur la liaison au C1q - Indications (augmentation) : Polyarthrite rhumatoïde, Lupus érythémateux systémique, Glomérulonéphrites, Néoplasies, Infections
*Interprétation: Analyses peu spécifiques ; Nombreuses interférences ; CIC pathogènes ou non? ; CIC ne corrèlent pas avec les CI des dépôts ; Orientation clinique dans un contexte précis ; Dans l’exploration d’une pathologie à CIC, la recherche de marqueurs spécifiques de la maladie est préférable
Analyse du complément: Discute le l’assurance qualité et standardisation par rapport aux dosages liés au complément?
- Peu de méthodes normalisées (maison et RUO)
- Peu de standardisation
- Peu de ressources en assurance qualité (CQE, CQI de tiers)
- Initiatives : International Complement Society (ICS) ; Standardization and Quality Assessment of Complement Measurements ; IUIS Quality Assessment and Standardization Committee ;European Complement Network
Quelles sont les complications cliniques de l’activation du complément?
Une amplification du complément peut entraîner une augmentation du nombre de cellules T et de plaquettes, favorisant ainsi la thrombose et une inflammation accrue, ce qui accentue les dommages cellulaires. Ces dommages peuvent à leur tour augmenter le nombre de cellules altérées, qui seront alors ciblées par l’opsonisation
Quelles sont les pathologies rénales et hématologiques associées à l’activation du complément?
Rénales : néphrite lupique, glomérulonéphrite membranoproliférative, néphrite membraneuse, néphropathie à IgA, syndrome de Goodpasture
Hématologique : anémie hémolytique, hémoglobinurie paroxystique froid et hémoglobinurie paroxystique nocturne
Discute de la déficience en complément.
- Acquise ou héréditaire
Acquise : maladie cause la consommation du complément
Héréditaire : la déficience en complément prédispose à la maladie - Prédisposition à des infections sévères et/ou répétées ou à des maladies autoimmunes
Infection : diminution de la phagocytose et de la lyse
Auto-immune: persistance des complexes auto-immuns
Nomme et décrit 3 maladies du déficits héréditaires en protéines du complément.
Glomérulonéphrite
Voie classique : Déficience en C1q, C1r, C1s, C4 et C2
Voie commune : Déficience en C3
Régulateurs en circulation : Déficience en facteur H
Tous des maladies autosomales récessives
Syndrome hémolytique et urémique atypique :
Régulateurs en circulation : Déficience en Facteur I et H
Régulateurs cellulaires : Déficience en MCP
Autosomales récessives
Hémoglobinurie paroxystique nocturne :
Régulateurs cellulaires : Déficience en DAF/CD59
Acquis
Quelles sont les types de pathologies associées au complément?
- Infectieuses
-Bactériennes
-Virales - Maladies rhumatologiques
- Maladies rénales
- Maladies hématologiques
Quels sont les facteurs déficients dans les infections bactériennes récurrentes?
- Déficience en C3
Infections bactériennes sévères et répétées - Déficience en C5-C9
Neisseria meningitidis - Déficience en properdine
Neisseria meningitidis - Déficience en MBL
Augmentation du risque d’infection - Bilan de base
CH50, AH50, C3, C4, (properdine)
Comment les virus contournent le complément?
Certains virus ont des homologies avec la voie du complément, ce qui permet de la contourner. D’autres virus utilisent le système du complément pour rentrer à l’intérieur des cellules. (passer inaperçu ou contourner activation du complément)
Comment le complément est impliqué dans les maladies rhumatologiques?
- Lupus érythémateux disséminé et systémique (LED, LES)
-Complexes immuns responsables des dommages de plusieurs organes
–Peau et surface des muqueuses, parois séreuse des poumons, du cœur, des reins, du système nerveux, érythrocytes
-Déficience dans la voie classique
-C1q > C4 > C1r/s > C2
-Dosages du complément comme indication de l’activité de la maladie et pour suivi du traitement - Bilan de base:
CH50, C3, C4
Discute des informations générales sur les maladies rénales en lien avec le complément.
- Glomérulonéphrites membranoprolifératives (GNMP ou MPGN)
-Hypocomplémentémie (C3 bas)
-Facteurs néphrétiques (NeF) sont des Ac anti-convertases
–NFa ou C3NeF: Ac anti-C3bBb qui stabilise la C3 convertase alternative
–NFc ou C4NeF: Ac anti-C4b2a qui stabilise la C3 convertase classique
–NFt: Ac qui stabilise les C3 et C5 convertases et le MAC - Syndrome urémique hémolytique (HUS)
Le facteur H est déficient - Néphrite lupique
Manifestions du LED au niveau rénal avec Ac anti-C1q
Qu’est-ce que la glomérulonéphrite membranoproliférative (GNMP)?
*Secondaire (SLE, HCV, etc.) ou Idiopathique
*Caractéristiques :
-Dépôts sous-endothéliaux dans les parois capillaires
-Prolifération cellulaire mésangiale
-Présence en immunofluorescence de dépôts granuleux le long des parois capillaires et dans le mésangium.
*Classification histologique fondée sur la localisation et la nature des dépôts définissant les GNMP (ancienne classification)
-Types I, II et III.
*Classification selon les mécanismes physiopathologiques (nouvelles classifications)
-GNMP associées à des complexes immuns
-GNMP associées à des anomalies du complément
Quels sont les 3 types de glomérulonéphrites membranoprolifératives?
- Type I
-Complexes immuns circulants et dépôts
-C4NeF (Nfc): stabilise la C3 convertase
-Activation de la voie classique (diminution des C3, C4, C2, C1q, B) - Type II ou la maladie des dépôts denses (Dense Deposit Disease [DDD])
-Pas de complexes immuns circulants
-Dépôts de C3 (dépôts denses activeraient le complément)
-C3NeF (NFa): stabilise la C3 convertase
-Déficience en facteur H (nombre, fonction ou anti-facteur H)
-Activation de la voie alternative : (diminution des C3, H) - Type IIIG
-Dépôts de C3, C5 et properdine
-NFt: stabilise les C3 et C5 convertases et le MAC
-Activation de la voie alternative et du MAC: (diminution des C3, C5, MAC) - Analyses dosées : CH50, C3, C4, C5, AH50, C1q, C2, Facteur B, Facteur H et Facteurs néphritiques
Qu’est-ce que le syndrome urémique hémolytique (HUS)?
- Triade: Anémie hémolytique microangiopathique, trombocytopénie, insuffisance rénale aiguë
- Diarrhée (maladie du hamburger)
-E.coli (sécrétion de verotoxine ou shigatoxine). Cette toxine endommage les cellules endothéliales des vaisseaux, déclenchant la cascade du complément et la formation de microthrombus.
- Diarrhée (maladie du hamburger)
- Diarrhée (atypique) → complément impliqué ici
Mutation dans le gène du Facteur H > -Facteur I ou MCP
–Entraine une activité suboptimale et/ou concentration diminuée de ces régulateurs
–Entraîne une activation incontrôlée du complément = microthrombus rénaux
—Diminution du C3 et du Facteur H (C4 normal) puisqu’il y a une consommation excessive de ces facteurs vu l’activation incontrôlée du complément
—Un C4 normal suggère une activation spécifique de la voie alterne du complément
- Diarrhée (atypique) → complément impliqué ici
Comment les maladies du HUS engendre des lésions?
Vu qu’il y a augmentation de la cascade du complément, on va y retrouver plus de C5a et C5b dans la circulation sanguine. Ce sont des anaphylatoxines de la C5 convertase
Rôles C5a : Anaphylatoxine potente, chimiotactise, proinflammatoire, activation endothéliale et prothrombotique
-Engendre une thrombose, inflammation et anaphylaxie
Rôles de C5b : Lyse cellulaire, proinflammatoire, activation plaquettaire, activation endothéliale et prothrombotique
-Engendre une hémolyse, inflammation, thrombose et dommage tissulaire
-*dommage aux vaisseaux, coag, anémie
Comment différencier entre une HUS régulière et atypique ?
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Qu’est-ce que l’angio-oedème?
- 3 types :
-Type I héréditaire : concentration en C1-INH diminuée
-Type II héréditaire : activité de C1-INH diminuée
-Type acquis : Ac anti-C1-INH - Œdème sous-cutané et sous-muqueux
-Enflure près de la bouche
-Mort par œdème au niveau du larynx ou par hypovolémie secondaire à œdème intestinal si non traité - CH50, C3, C4, C1-INH (dosage et activité), Ac anti-C1-INH
- Exploration du complément
-CH50 diminué (pendant la crise)
-C3 normal
-C4, C1q et C2 abaissées
-C1-inh:
–Type I: Dosage Ag abaissé
–Type II: Activité fonctionnelle abaissée
–Type III: Variable
Qu’est-ce que l’hémoglobinurie paroxystique nocturne (PNH)?
- Clinique :
-Mutation du gène PIG-A qui code pour le glycosyl phosphatydyl inositol (GPI)
–GPI sert d’ancrage pour le DAF et CD59 (Protectine)
-Poussées nocturnes d’hémolyse et d’hémoglobinurie par activation du complément
-À la faveur de la baisse nocturne du pH sanguin
-Conséquences : anémie, thrombose sévère, insuffisance rénale chronique, hypertension pulmonaire, ischémie intestinale, insuffisance hépatique et organique
–Processus similaire à HUS pour le développement des maladies (accumulation de C5 anaphylatoxines)
-Atteinte à la survie des patients
Quelles sont les étapes pour l’hémoglobinurie paroxystique nocturne (PNH)?
1- Normal : L’oxyde nitrique produit par les cellules endothéliales diffuse dans la circulation sanguine et dans les cellules musculaires lisses situées autour des vaisseaux sanguins, contribuant à leur relaxation et à la régulation de la pression sanguine.
2- Hémolyse : Chez les patients atteints de la maladie, les globules rouges et les plaquettes ne sont pas protégés contre une activation chronique du complément. Cela entraîne la lyse des globules rouges et l’activation des plaquettes.
3- Manifestations de la maladie :
–Maladies chroniques du rein : La lyse des globules rouges libère de l’hémoglobine et du fer, qui peuvent entraîner des dysfonctionnements rénaux et provoquer des dépôts extensifs d’hémoglobine dans les reins.
–Hypertension pulmonaire : L’hémoglobine libre réagit avec l’oxyde nitrique (NO), le convertissant en NO3-, ce qui réduit la disponibilité de NO. Cette diminution de NO affecte les muscles lisses des vaisseaux sanguins, entraînant une vasoconstriction et une hypertension pulmonaire.
–Thromboembolisme : La réduction de NO favorise l’activation des plaquettes, ce qui conduit à leur adhérence à l’endothélium et à la formation de thromboses.
Quelles sont les analyses pour l’hémoglobinurie paroxystique nocturne (PNH)?
- Test de Ham-Dacie + Sucrose (hyper hémolyse des érythrocytes du patient in vitro en présence de solutions acides)
-Historique
-Seulement les érythrocytes - Cytométrie de flux pour CD16, CD14, DAF et CD59 (dépendent du GPI)
-Remplace le test Ham-Dacie
-D’autres cellules que les érythrocytes
-Les anticorps utilisés ne lient pas avec une forte affinité
-Petites populations de cellules « HPN » ne peuvent pas être détectées (raison de préférer le FLAER)
-Dépistage de l’absence d’une protéine spécifique plutôt que l’absence de l’ancre GPI
-Risque de faux-positifs - « FLAER »
Qu’est-ce que le FLAER?
- “Fluorescently Labelled Aerolysin”
- Variant de l’aérolysine
-Protéine d’origine bactérienne qui lie spécifiquement et avec beaucoup d’affinité l’ancre GPI
–« Aeromonas hydrophila »
—Protéine native lie l’ancre GPI, s’oligomérise et cause la lyse des cellules
–Plus sensible que le CD59
—Petites populations de cellules HPN peuvent être détectées : Détection de populations de granulocytes anormaux à des taux aussi bas que 0.5%
-Couplé au “Alexa fluor® 488” (semblable à la fluorescéine)
–Signal stable et fort
Qu’est-ce que l’Eculizumab?
-Eculizumab = Anti-C5
-Traitement pour HPN et SHUa, et potentiellement GNMP?
-Fait par ELISA (dosage Ste-Justine)
Fait un algorithme pour distinguer:
-Syndrome inflammatoire
-angioeodème
-GNMP
-HUS
-PNH
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