Outils et recherche?? Flashcards
Définition artéfact
Structure artificielle qui apparait dans une lecture au microscope
Comment prouver qu’une structure n’est pas un artéfact?
- Préparer les échantillons de pls facons
- Différents fixateurs ou sans fixateur
Grossissement stérile vs efficace
Stérile c’est agrandir une image et ne pas voir plus de pixel, efficace c’est que ca devient encore plus clair et précis
Explique la limite de résolution et de (d)
Expression quantitative de la capacité de grossissement efficace d’un appareil optique
d est la distance minimale entre 2 points qui peuvent être distingué
Inconvénients (3) des microscopes à lumière UV
- Utilisation du quartz au lieu du verre
- Miroir à première surface
- Invisible pour l’œil humain
** Encore utilisé dans les microscopes électronique/photonique et avec la fluorescence
Microscopes photonique vs microscope électronique à transmission
Meilleure res. et grossissement efficace plus fort chez MET
Contraintes du MET
Coût très cher
Faire le vide
Préparations très minces
C. mortes
Explique l’utilisation du MET
- Faire le vide, pour s’assurer que les électrons ne vont pas se frapper ensemble
- Électrons voyagent à travers des structure et part électromagnétisme concentre les électrons sur le spécimen
- Électrons frappent le spécimen qui arrive sur la plaque fluorescente
- Électrons reguider sur une plaque phosphorescente
Explique la préparation de l’épaisseur du spécimen
- Fixation
- Déshydratation (Alcool remplace H2O)
- Intermédiaire (Toluène remplace alcool)
- Inclusion (Paraffine remplace toluène)
- Spécimen mis dans la paraffine
- Microtome fait des coupes très fine du spécimen
**La paraffine vient coller les coupes ensembles
Explique l’ultramicrotome
- Fixation
- Déshydratation (Alcool remplace H2O)
- Intermédiaire (Glutaraldéhyde remplace alcool)
- Inclusion (Tétroxyde d’osmium remplace glutaraldéhyde)
- Spécimen mis dans du plastique (oxyde de propylène qui se mélange mieux que la résine)
- coupe du bout du plastique
- Coupe du spécimen et dépot dans le ‘boat’ où il flotte
Explique le cryodécapage
- Préparation d’un spécimen en azote liquite
- Fracture par microhache (du bloc de glace)
- Sublimation de l’eau du cytoplasme
- Dépot de platine/carbone qui va faire un moule sur le bloc de glace
Comparaison coupe vs fracture
Fracture il y a du relief
Phénomène additif de la fluorescence
En gros, les couleurs primaires peuvent s’ajouter et montrer de nouvelles couleurs si des structures colorés de 2 ou plus de couleurs
Explique les 2 fluorescence
En lumière bleu
1. Lumière passe par filtre excitateur bleu, pour que juste le bleu passe.
2. La lumière bleue passe à travers le spécimen.
3. On passe à travers un filtre orange qui fait des couleurs rouge jaune et verte.
En UV
1. UV Passe à travers plusieurs filtre
2. Passe à travers le spécimen
3. Passe à travers filtre d’arrêt, et les couleurs bleus, rouges, jaunes et vertes passent.
Explique un exemple de l’immunofluorescence