ÖFall 2 (Karin Herpes) Flashcards
Hur verifieras diagnosen EBV?
Diagnosen verifierades genom 1) typisk blodbild med ett stort antal lymfocyter, förändrade som vid virusinfektion samt 2) specifik serologi.
Serologi i form av Monosticon®- snabbtest - bygger på heterofila antikroppar, som ej är specifika. Det finns ett flertal specifika antikroppar (EBV-serologi) med unik temporal profil, vilket leder till en säkrare diagnos.
Vad visar ett blodutstryk på en EBV-patient?
En massiv aktivering och proliferation (celldelning) sker av cytotoxiska CD8 T-celler. Det ökade antalet T-celler leder till ökat antal mononukleära celler i blodet (mononukleära celler inkluderar lymfocyter och monocyter). Vid aktivering och proliferation blir T-cellerna större (lymfoblaster), därav benämningen atypiska lymfocyter.
De aktiverade T-cellerna angriper de virusinfekterade B-lymfocyterna. Infektionen kontrolleras så småningom av specifika CD8 T-celler, som avdödar B-cellerna. I situationer av stress nedregleras adaptiv immunitet inklusive T-celler, vilket tillåter EBV att gå in i en lytisk cykel, dvs. virus utsöndras igen.
Förklara uppkomsten av symtomen vid EBV?
Mycket av symtomen orsakas av cytokinfrisättning, vilket bl.a. ger feber och illamående. Mjälten blir ödematös och ofta palpabel som hos Karin. Cytokiner (från aktiverade T-celler och sekundärt aktiverade monocyter) inkluderar IL-1, IL-6 och tumörnekrotisk faktor (TNF) som påverkar temperaturregleringscentra i hypotalamus och ger feber, men även långvarig trötthet. IL-6 ger illamående.
Feber = höjning av kroppstemperaturen.
o Sker i respons på pyrogener som verkar genom att stimulera prostaglandinsyntes i hypotalamus.
o Bakteriella produkter (t.ex. LPS) kan vara exogena pyrogener som stimulerar leukocyter att frisätta cytokinerna IL-1 och TNF (endogene pyrogener). Dessa ökar mängden cyclooxygenas som konverterar AA till prostaglandiner.
o I hypotalamus stimulerar prostaglandinerna (ffa. PGE2) produktionen av neurotransmittorer vilka nu förskjuter nivån för kroppstemperaturen (höjer den)
Förklara kort hur EBV kan ge upphob till malign transoformation av en cell?
EBV är ett bra exempel på transformerande onkogena virus. Virala nukleära proteiner har transformerande egenskaper genom att bl.a. ingripa i de cellcykelkontrollerande Rb-proteinerna (retinoblastomproteinet).
Då kan det utvecklas t.ex. ett polyklonalt B-cells lymfom.
Vilka 4 egenskaper har de humana herpesvirusen genemsamt?
1) dsDNA nukleinsyra
2) Höje.
3) Ikosadeltahedral kapisd
4) replikationssätt, viralt DNA-polymeras för replikation INNUTI cellkärnan. Avknoppning, cellys eller cell-till-cell-bryggor
5) förmåga att etablera latent och återkommande infektion
- Cell-medierad immunitet är viktig.
- EBV och HHV är associerade med cancer hos människa.
Hur sker replikationen av HSV-1?
- Inbindning. HSV-1 binder till heparansulfat (en proteoglykan) och sedan penetrerar cellen mha nectin-1 (en adhesionsmolekyl på cellen)
- Detta leder till fusion av hölje och plasmamembran (sammansmältning och avklädning) och kapsiden frisätts till cytoplasman tillsammans med virala proteiner. Kapsiden dockar till cellkärnan och mha en kärn-por levereras genomet in i kärnan
- Transkription och Translation (3 faser). Det virala genomet (dsDNA) transkriberas utav viralt DNA-beroende RNA-polymeras. - Immediate early protein (DNA-bindningsproteiner som stimulerar DNA-syntes och transkiption av virala gener). - Early protein (enzymer inkluderat DNA-beroende DNA-polymeras). - Late proteiner (strukturella proteiner Capsidproteiner som transporteras in i kärnan till DNA:t in i kärnan, fylls med viralt DNA. Knoppas in och sedan ut ur ER och in i cytoplasman. Tegmentumproteinr associerar. Knoppas in och ut genom goli för att erhålla glykoproteininnehållande-hölje).
- Utfall av infektion regleras utav viralkodade och cellulära kärnfaktorer. Samspelet mellan dessa avgör om infektionen blir lytisk, persistent eller latent.
Under en LATENT infektion så kommer endast regionen av genomet att transkriberas som vilken genererar latancy-associated transcriptas (LATs). Dessa RNA-segment som bildas translateras inte till proteiner utan kodar fungerar som mico-RNA vilka förhindrar uttryck av viktiga early gener. Transkription av LATs och uppkomst av latency beror på vilka virala gener som neuronet är kapabel att transkibera.
Övergång till massivt genuttryck resulterar i lysis och celldöd.
Viruset frisätts genom exocytos (avknoppning), cellys, eller genom cell-till-cell-bryggor (syncytia: sprids mellan celler (intracellulära bryggor/gap juncions/smälter ihop celler, detta gör att de undviker antikroppar).
HSV infection of neurons may result in virus replication or establishment of latency, depending on which viral genes the neuron is capable of transcribing. Transcription of the LAT and no other viral gene will result in latency.
Hur ser det patogena förloppet ut vid HSV?
HSV initierar infektion genom mukosamembran eller hål i huden. Båda virus infekterar och replikerar i mukosa-epitelceller och orsakar sjukdom vid siten, och sedan latency i innerverande neuron (HSV1 mun, HSV2 genitalia).
HSV kan orsaka lytisk infektion i de flesta celler och latent i neuron. Cytolys sker genom virus-inducerad hämmning av cellulär syntes av makromolekyler, degradering av värd-DNA, membran och cytoskelett rubbning. Visuella förändringar inkluderar förändrad kärnstruktur och kromatinet.
HSV kan intiera syncytia-formation. Gör att cellerna i vävnaden smälter samman och ser runda ut.
HSV vid infektions-siten infekterar innerverande neuron och rör sig genom dem i retrogard riktning till ganglion, (trigeminal ganglia för oral HSV1 och sakral för HSV2).
CD8 T-celler och interferon-y är viktiga för att kvarhålla latency. Vid reaktivering replikerar viruset och återgår till ursprunglig infektions-site och producerar vesiklar (blåsor, som innehåller vironer).
NK-celler, TH1 hjälparceller och CD8 CTL behövs för att undertrycka infektionen.
På vilka 5 sätt kan HSV undfly immunförsvaret?
- Viruset blockerar interferon-y från att initiera stoppa viral proteinsynts. (dock står det inte att HSV använder samma NS1-protein som Influensa gör).
- (Viktigaste). Viruset kodar för ett protinen som blockerar TAP-kanalen (transporter-assocciated-with-processing), vilket blockerar tillförsel av peptider till ER, vilket därmed blockerar deras assocciering med MHC I, vilket därmed förhindrar igenkänning av virusantigen på MHC I molekylen på cellytan av virusinfekterade celler av CD8 T-celler. Ingen avdödning av infekterade celler av CD8+ och NK-cellern.
Från föreläsningen ” HSV kodar för proteiner som blockerar transport av virala peptider till ER. => ingen laddning av MHC I molekyler med viralt antigen => ingen avläsning av NK och CTL => ingen avdödning av infekterade celler. MHC I som inte blir laddad blir degradering av lysosomerna.” - Viruset kan undfly antikropps-neutralisering genom att spridas genom direkt kontakt mellan celler, genom bildning av syncytia (intracellulära bryggor, likt gap-juctions).
- HSV-genomet kodar även för glykoproteiner som fungerar som virala vidhäftningspunkter, fusionsproteiner, strukturella proteiner, immun-escape proteiner (t.ex. cG och gE/I). Komplementproteinet C3 binder till cG och på så sätt minskar mängden fritt C3 i serum. Antikroppar av typen IgE/I binder till gE/I och på så sätt upptäcks inte viruset av immunförsvaret . Detta är exempel på hur herpsesviruset reducerar antiviral repons med antikroppar (humoral respons)
- Den ultimata undanflykten är mekanismen att gå in i latens i neuron.
Berätta hur reaktiveringen av EBV kan ske och se ut?
Återaktivering kan initieras pga. flera olika stimuli.
Till exmepelvis stress, trauma, feber, UV-strålning. Infektionen kontrolleras av specifika CD8 T-celler, som avdödar B-cellerna. I situationer av stress nedregleras adaptiv immunitet inklusive T-celler, vilket tillåter EBV att gå in i en lytisk cykel, dvs. virus utsöndras igen. Stimuli triggar viral replikation i en individuell nervcell innuti en nervbunt, vilket tillåter viruset att spridas tillbaka ner längs nerven och orsaka syr/blåsor vid samma dermatom och plats varje gång reaktivering sker.
Vad är den klinska bilden av HSV?
HSV1 och 2 är vanliga humana patogener som kan orsaka smärtfulla men benigna manifestarioner och återkommande sjukdom. Klassisk manifestation är en klar vesikle på en rödfärgad bas (droppe på ett rosblad), men kan vid svår sjukdom ge sår. Båda virus kan orsaka morbitidet (sjukdomsfrekvens i befolkning) och mortalitet om infektionen drabbar ögonen eller hjärnan eller infekterar en immunosuppresserad patient eller litet barn.
Hur behandlas HSV? och hur diagnostiseras det?
HSV kodar för målenzymer för många antivirala droger. Framförallt nukleotid-analoger som hämmar viralt DNA-polymeras, ett enzym som krävs för viral replikaiton. Behandling förkortar primär och rekativerad infektion. Inga läkemedel kan eliminera latent infektion.
Diagnos sätts genom att använda immunofluorescence för att finna virala antigen eller DNA genom att använda PCR ifrån isolerade virus från en vesikel.
Berätta vad du kan om viruset Varicella Zoster!
VZV orsakar vattkoppor (varicella) och vid reaktivering orsakar det bältros (herpes zoster). Ett alfta-herpesvurs som är likt HSV på många sätt inkl. 1) förmågan etablera latent infektion i neuron och återkommande sjukdom, 2) vikten av cell-medierad immunitet i kontroll av sjukdomen och 3) de karaktäristiska blåsorna. Precis som HSV använder VZV ett thymidin-kinas och är känslig för antivirala droger. Olika HSV, så sprider VZV främst via respiraotiska vägar och efter lokal replikation i luftvägarna, genom viremi från hudblåsor till HELA kroppen.
Viruset infekterer T-celler och dessa kan röra sig (home) till huden och överföra viruset till hudepitelceller.
Viruset blir latent i dorsalrotsganglion eller kranialnerver efter primär infektion. Viruset kan rekaitveras i äldre individer när deras immunitet minskar/urholkas eller saknar cellulär immunitet. Vid rekativering replikerar sig viruset längs nervvägen till huden, vilket orsakar vesikulära blåsor längs hela dermatomets längd, kallat herpes zoster.
Beskriv utförligt och berätta om de diagnostiska metoderna som finns och används vid EBV?
- Heterofila antikroppar: (Dessa antikroppar är alltså riktade mot ett stort antal antigen som förekommer hos flera arter). Påvisning av antikroppar sker med något av de många snabbtest som finns på marknaden (t ex monospot). Testen bygger på att heterofila antikroppar agglutinerar (klibba samman) röda blodkroppar från andra djurarter. Sensitiviteten ligger runt 70 % och falskt positiva svar kan förekomma.
- Specifik EBV-serologi: Serologi har högst specificitet och bör användas i oklara fall. Analysen inkluderar påvisande av antikroppar mot viruskapsidantigen (EBV-VCA) och viruskärnantigen (EBNA). EBV-VCA av IgM-typ bildas tidigt i förloppet, strax efter de heterofila antikropparna, och är diagnostiska för akut EBV-infektion. Nivåerna sjunker inom ett par månader efter den akuta sjukdomen. EBV-VCA IgG kvarstår livslångt. EBNA IgM och IgG bildas flera månader efter insjuknandet och talar således för genomgången infektion.
There are several serology techniques that can be used depending on the antibodies being studied. These include: ELISA, agglutination, precipitation, complement-fixation, and fluorescent antibodies
ELISA = Enzyme-linked immunosorbent assay. Antigens from the sample are attached to a surface. Then, a matching antibody is applied over the surface so it can bind to the antigen. This antibody is linked to an enzyme, and in the final step, a substance containing the enzyme’s substrate is added. The subsequent reaction produces a detectable signal, most commonly a color change in the substrate. En antikropp med enzymmarkör. Då antingen enzymet eller antikroppen binds till ett adsorberande substrat behåller båda sin biologiska aktivitet. Förändringen i enzymaktivitet till följd av enzym-antikropp-antigenreaktionen är proportionell mot mängden antigen och kan mätas med spektrofotometri eller med blotta ögat.
- PCR kan utföras på blod, andra kroppsvätskor och biopsier.
Vad är serologi och vad kan det användas till?
Serology is the scientific study of serum and other bodily fluids.
In practice, the term usually refers to the diagnostic identification of antibodies in the serum.
Serological tests may be performed for diagnostic purposes 1) when an infection is suspected, and in many other situations, such as 2) checking an individual’s blood type. Serology blood tests help to 3) diagnose patients with certain immune deficiencies associated with the lack of antibodies. Serological surveys are often used by 4) epidemiologists to determine the prevalence of a disease in a population.
Vilka är labratoriefynden vid EBV?
- LPK - kan stiga
- I blodutstryk ses atypiska, viruspåverkade lymfocyter med basofil cytoplasma. Detta är ett typiskt, men inte patognomont, fynd för mononukleos.
- Mild neutropeni och trombocytopeni är vanligt.
- CRP - normalt eller lätt till måttligt förhöjt.
- Leverstatus är i stort sett alltid påverkat, oftast med förhöjda transaminaser. Även ALP och bilirubin är förhöjt i ca hälften av fallen.
