MRNA Processing Och Proteinsyntes Flashcards
Samtliga tRNA, rRNA, & mRNA modifieras efter transkription för att erhålla en:
funktionell form
Samtliga tRNA, rRNA, & mRNA modifieras efter transkription för att erhålla en funktionell form
Initialt är storleken på RNA transkriptatet större än slutresultatet, vad beror detta på?
Detta beror på sk. leader sekvenser på 5’ änden & trailer sekvenserpå 3’änden.
Vad är leader- och trailersekvenser för något?
De är två sekvenser av RNA som ej genomgår translation och sitter på varsin sida om en kodande RNA sekvens och de utgör tillsammans en untranslated region (UTR)
Leader-sekvensen är på 5’ ändan av den kodande sekvensen
Trailer-sekvensen är på 3’ ändan av den kodande sekvensen
Ge exempel på post-transkriptionella modifieringar av RNA?
- Trimming av leader och trailersekvenser (tRNA, rRNA)
- tiIlägg av terminala sekvenser (mRNA)
- Modifiering av strukturen på specifika baser, så kallat editing (mRNA, tRNA)
Ge exempel på post-transkriptionell modifiering (processing) av eukaryot mRNA som sker i cellkärnan.
”Processing” (bearbetning) som äger rum i cellkärnan innan mRNAt transporteras till cytosolen:
- 5’-capping av det primära transkriptet
- poly-adenylering av 3’-änden (polyA-tail)
- borttagande av introner genom splicing
Hur bildas the 5’ cap?
7-metylguanosin kopplas till 5’-änden av RNAt med en 5’, 5’-trifosfat-koppling
- Den skapas med en GTP-molekyl, cappen är en metylerad guanidylgrupp på 5’-änden av mRNAt
- Den kan innehålla ytterligare metyleringar på de två nästföljande nukleotiderna på OH-grupper på 2’-kol
- metylgrupperna fås från S-adenosylmethionine (SAMe)
Vad för funktioner har 5’ capping?
- Skyddar RNA från nedbrytning av nukleaser, den gör så att enzymerna inte känner igen mRNAt som RNA
- Skapar en binding-site för ribosomen
Är 5’-capping en flerstegsreaktion?
aaa

När sker 5’ capping?
Nästan direkt efter transkriptionsstart (efter ca. 20-30 nt)
Vad är CBC och hur är det relevant för 5’ capping?
CBC - Cap-binding complex
Det är komplexet som håller fast cappingen i CTD-svansen
Vart binder enzymerna som är involverade i 5’- capping?
Till CTD-svansen på RNA polymeras II

Vad kallas uttryckbara (kodande) DNA sekvenser?
exoner
Vad kallas mellanliggande sekvenser som inte uttrycks (icke-kodande)?
introner
Vad sker med introner och exoner i post-transktriptionell modifiering av RNA-prekursorer?
Exoner sammanfogas
Introner klipps bort via splicing
Kan splicing ske var som helst?
Nej. Det sker endast i specifika säten

Förklara begreppen uppströms och nedströms?
Uppströms = mot 5’ änden
Nedströms = mot 3’ änden
Förklara väldigt grundläggande stegen i splicingmekanismen?

Varför måste splicingmekanismen vara så komplicerad?
- Den är komplicerad pga vi här har höga krav på specificitet
- Det måste ske som det gör för att undvika fel i läsramen
Vad är en spliciosom?
Ett stort protein-RNA komplex som gör så splicing sker
(storlek = 60S)
Vad utgörs spliciosomen av?
snRNPs (“snurps” = small nuclear ribonuclear proteins/particles)
Hur många snRNA känner vi till i eukaryoter? Namn?
Fem stycken - U1, U2, U4, U5, U6
Vilka nukleotidsekvenser brukar markera site of splicing i 5’- och 3’-änden av RNA?
5’ = GU
3’ = AG
Vad är de olika snRNAernas funktion i splicing av mRNA prekursorer?

Vad är funktionen av att U1 och U2 binder in i splicing-reaktionen?
U1 hjälper till att definera 5’ splice-siten
U2 binder nära 3’-ändan av intronet. Effekter av detta:
- skapar en utbuktning som delvis förskjuter och aktiverar en A så den blir en bättre nukleofil
- Det aktiverade A:et skapar 2’5’-fosfodiesterbindningen av lasso-liknande intermidatet i splicing reaktionen


