Microbiote Flashcards
C’est quoi les 4 niveaux d’analyse omique ?
Génomique
ARNm (transcriptomic)
Protéomique
Metabolomique
On fait quelle technique pour anaylyser les gènes et les ARNm?
Séquencage
On fait quel technique pour les protéine et métabolite ?
Spectrométrie de masse
du gènes, ARNm, protéine et métabolite, plus qu’on avance, on passe du… au …
Encodage de l’information
au phénotype
ADN est un polymère ?
Oui. de 4 monomère (ACTG)
Pour séquencer un polymère, on doit faire quoi?
détecter le monomère à chaque position
C’est quoi le séquencage de Sanger ?
Méthode de séquencage ou un puit est un nucéotide -> electrophorese sur gel
Le génome humain a été identifé dabord avec quelle technologie ?
Nucloétide fluorescent
c’est quoi la technique par détection de nucléotide fluo?
basé sur la méthode de sanger
-> elecrophorese + fluorescence
Chaque nucléotide est associée à une couleur et plus automatisé
C’est quoi le séquencage parallèle ?
Maintenant, on peut séquencer plusieurs séquence en même temps
(ex. méthode de Sanger mais 100 fois en même temps au lieu d’une fois après l’autre
Comment on fait le séquencage en parallèle ?
Bactérie
-> extraction ADN microbien
-> fragmente
-> séquencage de type ‘‘shot gun’’
C’est quoi un séquence de type shotgun
on casse la séquence en plein de fragment et séquence chaque bout
Pourquoi séquencer ?
-> cataloguer variation entre personne de la même espèce
-> Caractériser les différence entre les cellules d’une même personnes
-> Décrire les mécanisme cellulaire (ex. endroit transcription des chromosomes)
C’est quoi les 4 types d’expérience pour séquencer ?
- Transcriptomique
- MrRNomique (petit ARN)
- Epigenomique
- Genomique (ADN)
En résumé, à quoi sert le séquencage transcriptome (RNA-Seq)
- profil d’expression des ARNm
- Variant d’épissage
- Expression propre à certaine allèles
- Expression des micro ARN
En résumé, à quoi sert le séquencage de l’épigénome ChIP-Seq
- site actif dans la transcription
- interaction ADN-Port
- Modif des histones
- nucléosome
En résumé, à quoi sert le séquencage métagénome ?
Diversité des microbes
Échantillon hétérogènes
À quoi sert la protéomique ?
Analyser élément de structure (quel gène est exprimer -> prot)
*prot sont plus facile à identifier
C’est quoi les deux approches à la protéomique ?
Savoir c’est quoi et la quantité avec un extrait enrichie.
C’est quoi les étape de la protéomique ?
- préparer les échantillons (digerer les protéines)
- LC/MS (chromatographie + spectrométrie) = chaque pic est différente selon taille et charge
- Analyse
Commen fonctionne l’étape LC/MS de la protéomique ?
Protéine est digéré en peptide
-> envoyé en MS pour observer les peptide
-> peptide envoyer en MSMS pour les refragmenté en acide aminé et connaitre la séquence du peptide
V/F: proteomique mesure tout
Non. Portrait global
V/F: si on évalue les protéine associé dans le cytosquelette, on sait que ces protéines sont spécifique à cette endroit et ne se retrouve pas ailleurs
Faux.
-> dépend contexte cellulaire. associé mais p-e pas exclusif
c’est quoi ‘‘gene ontology’’ ?
Gene Ontology est un projet bio-informatique destiné à structurer la description des gènes et des produits géniques dans le cadre d’une ontologie commune à toutes les espèces.
-> gérer et enrichir son vocabulaire contrôlé décrivant les gènes et leurs produits,
-> gérer les annotations, c’est-à-dire les informations rattachées aux gènes et à leurs produits,
C’est quoi le métabolomique
mesure des molécules dans un fluide biologique
Peut mesurer l’abondance de la protéine ou de l’Enzyme (recherche le lien entre un phénotype et le métabolisme)
Le génotype peut changers selon quoi?
Dépend de la régulation
Pourquoi on dit que le métabolomique donne une photo du métabolome ?
Génome reste le même, mais exprimé différemment selon moment.
-> change vite
-> pas oublié le contexte exemple, prélèvement sanguin = stresser
À quoi sert la spectrométrie de masse?
Méthode qui permet de mesurer les molécule/métabolite dans une échantillon
->selon leur masse ou charge = permet identifier et quantifier.
V/F: les métabolite vont voyager à différentes vitesses selon leur M/z ?
C’est quoi m/z ?
Vrai.
-> ratio masse/charge dans les conditions de l’xpérience
Dans le spectroscopie de masse, comment ça marche pour l’analyse
Entre l’échantillon,
- passe une source d’ions et d’aimant = sépare selon leur charge
Pourquoi il y a différent pic dans la spectroscopie de la dopamine ?
parce que molécule entière et molécule fractionné
Différence entre métabolomique ciblée et non ciblée
ciblée: sait on cherche quoi
-> ex. cherche dopage dans le sang
-> niveau de X truc spécifique
Non ciblée: prend tissus ou wtv, envoie dans spectroscopie pour séparer et voir si besoin de refragmenté pic
pas de cible et non selectionnante
-> globalement, il y a quoi?
c’est quoi métabolomique en 3D%
ionise directement le tissus et vois dans l’espace c’est quoi la distribution des métabolite dans le tissus.
Différence entre microbiome et microbiote ?
Microbiome: microbiote et environnement (peut aussi être le matériel génétique contenu et génotype)
Microbriote; Ensemble des organisme vivant (virus compris) dans un environnement
NE SONT PAS INTERCHANGEABLE
V/F: différent microbe pour différente partie du corps
Vrai
V/F: Les endroits du corps humain (ex. bouche) sont similaire entre différente personne
Faux
-> différente
Il y a combien de bactéries par cellule humaine ?
1,3
Il y a 1,3 micro-organismes par cellule humain
non. bactéries
Il y a environs combien d’Espece microbienne dans l’intestin
1000
-> si chaque on 2000 gènes
= 2 millions de gène dans l’intestin
Dans notre corps, il y a plus de gènes humain que bactérien.
Faux
20 000 comparé à 2 millions
-> certain appel ça notre 2iem génome
C’est quoi l’abondance relative ?
distribution relative (proportion population) des espèces dans le microbiome
= on compte
c’est quoi la richesse du microbiome ?
Nombre d’espece trouvé dans un microbiome
-> important d’avoir une grande richesse pour plus de diversité
c’est quoi l’équitabilité du microbiome ?
Répartition des individus dans le microbiome
(+uniforme, + équitable = mieux)
Pourquoi c’est important d’avoir un microbiome équitable ?
parce que c’Est plus stable et santé
V/F: dans un microbiome,
On veut que toutes les bactéries soit très abondante
Faux.
Quelques une très abondante et beaucoup peu abondante
C’est quoi qui forge la diversité microbienne?
Combinaison des notions d’équitabilité et de richesse.
C’est quoi les 3 questions qu’on se pose pour l’étude du microbiome ?
Qui : quelle bactéries sont là
Quoi: elle font quoi (impact santé)
Comment: Par quel mécanisme ? (plus difficile question)
C’est quoi l’approche 16S ?
Facon de compter les bactéries en terme de proportion du nombre de bactérie
-> prend un échantillon et amplifie avec PCR + séquencage