Lab 9: coloration de Gram et méthode du KOH Flashcards

1
Q

À quoi sert la coloration de Gram?

A
  • Cela peut être utile en milieu médical, car permet d”identifier l’agent infectieux, de sa sensibilité aux antibitiques et de sa capacité à sécréter des endotoxines ou exo toxines. On peut déterminer quel type de bactéries il s’agit (Gram + ou -) et de donner le type d’antibiotique pertinent
  • Et en industrie alimentaire, elle permet de trouver l’origine de la contamination
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2
Q

Comment se passe le processus de coloration de Gram?

A

1-Traiter le frottis bactérien par une solution de violet de gentiane

  • Les Gram + et - sont colorés en violet
    2) Traiter le frottis bactérien avec une solution d’iode:
  • complexe VG-iode est formé dans les cellules des Gram + et -, elles demeurent violettes
    3) Soumettre la préparation à l’alcool éthylique:
  • les Gram - se décolorent rapidement sous l’action du solvant, car les lipides sont extraits des parois causant le grossissement des pores et la disparition du complexe VG-iode
  • Les Gram + conservent leur couleur violette, car les parois cellulaires se déshydratent donc les pores se réduisent diminuant la perméabilité de la paroi et de la membrane donc le complexe VG-iode ne peut sortir des cellules
    4) Traiter les frottis à la safranine:
  • Les Gram - deviennent roses, car les cellules prennent le colorant
  • les Gram + restent violettes, car les cellules ne sont pas affectées par la safranine
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