instrumentering PENTRA XL 80 Flashcards
hvile tre måleprisinpper brukes i pentra?
– Motstand (impedans)
* Hva måles?
– Cytokjemi (spesifikk farging)
* Hvilke celler farges og hvorfor?
– Optisk måling (absorbans)
* Hvilken informasjon gir cellenes absorbans?
hvilke kanaler deles prøvene inn i etter innsuging?
- RBC/PLT-kanal
– Teller antall erytrocytter og trombocytter - Hb-kanal
– måler Hb - BASO-kanal
– Teller antall leukocytter og basofile - LMNE (matrix) kanal:
– Diff.telling av Lymfo, Mono, Neutro, Eos, ALY og LIC
hvorfor har man flere kanaler som prøvene innsuges i?
Har 4 kanaler i stedet for et siden
hver celletype/analytt trenger en egen reagens
og egen måte å bli telt på.
hva er impedanse prinsippet?
Når en celle passerer gjennom et tynt
kapilær får man en motstand/impedanse, spenningen øker og man kan vite hvor stor
cella er avhenge av cellestørrelse, da større
celler vil gi mer motstand/spenning
hva er prinsippet til RBC/PLT kanalen?
– Blod blandes med fortynningsvæske i RBC/PLT
målekammer
– Fortynningen suges gjennom aperturet
– RBC og PLT telles samtidig v.h.a.
motstandsprinsipp
– Cellene plottes i histogrammer etter størrelse
– EVF (erytrocytt volum fraksjon: hvor stor andel av fullblod som består av erytrocytter) (HCT)
beregnes ved at alle pulshøydene til
RBC legges sammen
– RBC parametrene MCV, MCH, MCHC og RDW
beregnes
– PLT parametrene PCT, PDW og MPV beregnes
hvordan utføres Hb-måling og hva kan være mulig feilkilde, hvorfor?
- Cyanidfri kromogen metode. Modifisert
cyanmethemoglobin metode. Erytrocyttene lyseres og løsningen måles spektrofotometrisk (absorbans) ved 555nm - Mulige feilkilder: WBC↑↑, lipemiske prøver, HbF
Mye hvite blodceller, lipider, vil føre til
blakking som videre gir mindre transmisjon
HbF kan gi problemer da blodcellene som er
her krever mer for å bli lysert, hvis de
ikke blir lysert vil de ikke bli lest
hvordan blir leukocytter differensialtelt?
- Differensialtellingen skjer ved å kombinere to kanaler:
– BASO-kanal
– LMNE-kanal
begge måler totalt antall leukocytter - Følgende leukocytt-typer bestemmes: Neutrofile, basofile,
eosinofile, lymfocytter, monocytter, LIC, ALY - Totalantall og prosentdel i blod
hva er prinsippe for Baso-kanalen?
- Blodet blandes med ”BASOLYSE” i BASO-kammer
– Erytrocytter lyseres slik at de ikke interfererer med målingene
– Alle leukocytter (bortsett fra basofile) strippes for membran og cytoplasma - Basofile og leukocyttkjerner telles med motstandsprinsipp: for en volumforskjell da det bare er de basofile som
fortsatt har membran og cytoplama intakt, noe som gjør dem større enn de andre cellene
og lettere å differensiere på et cytogram - Resultatet (dvs basofile og total WBC) plottes i et histogram
- Totalantall for WBC rapporteres fra denne kanalen (default)
hva er prinsippe til LMNE (Matrix) kanalen?
- Telling av Lymfo, Mono, Neutro, Eos, ALY og LIC
- Blodet blandes med et farge- og fikserings reagens
”EOSINOFIX” i LMNE-kammer
– Lysering av RBC
– Leukocyttene fikseres i opprinnelig form og størrelse
– Eosinofile farges spesifikt - Cellefortynningen ledes gjennom flowcellen og cellene måles på to måter:
– Motstandsmåling → cellenes volum
– Absorbansmåling → cellenes struktur/kompleksitet
forklar prinsippe bak LMNE-kanalens flowcelle
Celle-fortynningen ledes gjennom flowcellen ved
hjelp av to hjelpeløsninger (en av dem er shiet løsningen).
Leukocyttene legger seg på rekke og rad
- og måles en og en.
Alle celler måles to ganger:
-absorbansmåling
-motstandsmåling
* Den første tellingen skjer ved motstandsprinsipp når cellene passerer en
kapillæråpning, og cellenes volum registreres.
* Den andre målingen skjer ved at cellene bestråles med monokromatisk lys
(tungsten lampe). Cellene vil i varierende grad absorbere og spre lys, og dette
gjenspeiler cellenes struktur og kompleksitet.
hvordan plottes resultatene av LMNE-kanalen i en matrix og hva er det som bestemmer hvor i matrixen en cellepopulasjon skal?
- Motstands- og absorbansverdi for hver
enkelt celle plottes i en ”matrix/cytogram”, med
motstand (volum) på x-akse og
absorbans (kompleksitet) på y-akse - Matrix er inndelt i ”bokser” som
tilsvarer ulike cellepopulasjoner.
Cellene er ulike i struktur og
kompleksitet og vil i ulik grad
absorbere og spre lys
Pentra måler disse forskjellene
og grupperer cellene i
populasjoner på bakgrunn av
målingene. dvs at en celle med mye granula og lappedelt kjerne vil spre lyse mer (mer absorbans svs mindre transmisjon) vil komme høyere på matrixen, men har de lite volum vil de
komme langt til venstre for matrixen
hvor havner lymfocytter i matrixen/cytogrammet?
- Små celler (= liten motstand)
- Tett, rund kjerne og homogen
struktur (=liten lysspredning og absorbans) - Lymfocyttene havner dermed i nedre
del av både absorbans og volum akse (matrix)
hvor havner monocytter i matrixen?
- Store celler (= stor motstand)
- Stor kjerne med noe uregelmessig
form og struktur (= middels absorbans
og lysspredning)
havner dermed langt til høyre og noe høyere opp
enn lymfocytter
hvor havner nøytrofile granulocytter i matrixen?
- Middels store celler
- Lappedelt kjerne, og granula i
cytoplasma gir stor lysspredning og
absorbans.
så de havner midt mellom lymfo og monocytter,
men høyere opp i y-aksen enn begge
hvor havner eosinofile granulocytter i matrixen?
- Middels store celler
- Lappedelt kjerne, granula i cytoplasma
som farges spesifikt gir høy absorbans
spesifik farging vil gi dem høyest absorbans som vil si at
de kommer rett over nøytrofile granulocytter i matrixen
hva er det ALY og LIC står for?
ALY= atypisk lymfocytt
LIC= large immature cell
hvor vil LIC havne i matrixen?
- Umodne celler er vanligvis store
- Umodne celler har stor kjerne og
uregelmessig kjernestruktur - Kan være blaster, myelocytter,
metamyelocytter
og vil derfor havne lengst til høyre i matrixen,
men varierende scattering så alt fra samme y-verdi som
lymfocytter til nøytrofile granulocytter
hvor havner ALY i matrixen?
- Store/middels store celler
- Homogen kjerne
- Kan være reaktive/aktiverte lymfocytter,
plasma celler, (eller små blaster)
og vil derfor havne i midten nede, samme y verdi som lymfocytter
hvilke type alarmer/flagg kan man få under analysering?
– Resultat utenfor referanseområdet
– Avvik mellom paralleller
– Unormal cellemorfologi
– Forekomst av celler i områder hvor
det normalt ikke skal være celler
– Tekniske problemer
hvis du får et flagg som sier at det er en celle som
strekker seg over flere områder, men du er usikker på hvilke celler dette
kam være, hva må du gjøre da?
For å finne ut av hvilke celler probleme
kommer fra, ser at vi har en cellepopulasjon
som strekker seg over flere grenser, må vi
se på blodutstryk, det er ofte svaret
hvordan kan du enkelt skjønne hva flaggene sier?
Hver alarm gir mening, eks LL1 (left lympho)
det vil si at det er noe på venstre delen
av lymfocytt grensa. NE=neutro eosino, som vil
si en populajson som er på grensa mellom
neutrofile og eosinofile. har Ln som vil si
left neutro, Rn som vil si right neutro osv
hva betyr det når noe ender på cytosis/phili og
Penia?
Cytosis/phili er mye
Penia vil si at det er lite
hva er en typisk ting å se ved leukemi?
høye nivåer av en type leukocytt og lave nivåer av
erytrocytter, Hb og andre leukocytter, siden det blir mindre plass for å produsere dem.
hvordan er referanse området for diff% hos voksne?
Nøytrofile granulocytter 39 – 73 %
Lymfocytter 18 – 48 %
Monocytter 5 – 13 %
Eosinofile granulocytter 0 – 8 %
Basofile granulocytter 0,2 – 1,3 %
(LUC large unstained cells) 0,0 – 4,4 %
