Advia 2120 Flashcards
hvilke måleprisnipper har Advia 2120 og hvor mange kanaler har den?
- Advia gjør en 5-parts differensialtelling av leukocytter, bruker blant annet peroxidase farging
- I tillegg telles blaster og atypiske lymfocytter (=LUC Large Unstained Cells).
- Måler og bestemmer erytrocytter og blodplater basert på størrelse og celleinnhold
- 3 ulike måleprinsipper benyttes:
– Lysspredning
– Spesifikk farging
– Absorbansmåling - Instrumentet har 5 kanaler
– RBC+PLT, Baso, Perox, Retic og Hb - 2 flowceller benyttes til måling av cellenes lysspredning og absorbans
- Hb måles med en modifisert Cyanmethemoglobinmetode
hva gjør en blodfordelingsventil?
Blodfordelingsventilen deler prøven opp i 5 alikvoter (deler) for de ulike målingene. Reagens og prøve blir levert til de 5 ulike kamrene i UFC-blokka for mixing og aspirering (også måling I Hb-kanalen/kammeret)
hvorfor er kamre til peroxidase analyser annerledes enn de andre?
dette er fordi andre enzymer enn peroxidase må bli fjernet for at vi skal få et godt resultat. kamre vil bli varmet til 70 grader slik at de andre enzymene denaturerer men ikke peroxidase, deretter kan reaksjonene skje. alle leukocytter inneholder dette enzymet som da vil reagere med substrat som blir tilsatt.
hva er isovolumetrisk sfæring av RBC?
Isovolumerisk sværing vil si at et reagens vil endre erytrocytter så istedenfor å se vanlig ut blir de sværisk, som en kule
Det gjør at vi kan måle både på innhold og størrelse
hva er måleprinsippet i RBC/PLT kanalen?
- Blod og reagens blandes i reaksjonskammeret
- RBC og PLT blir “sfæret” og fiksert
- Cellene føres en og en gjennom BASO-flowcellen sammen med en sheath løsning som gjør kun en og en celle passerer laserlyset
- I flowcellas “vindu” bestråles cellene med monokromatisk laserlys
- Cellene vil absorbere og spre lys
- Cellenes lysspredning måles i 2 vinkler
- ved 2-3 grader (lav vinkel) vil cellen detektere cellens volum mens i 2-15 grader (høy vinkel) vil cellen detektere cellens Hb-innhold. i praktisk gjøres dette ved å plassere en dark stop (skyteblink) som hindrer at annet lys enn det som er i disse vinklene kan passere og deretter bli målt.
hva er graden av lyspredning avhenge av i rbc/plt kanalen på advia?
- Graden av lysspredning er avhengig av:
– Cellestørrelse
– Hemoglobin-innhold i erytrocyttene
– Blodplatenes refraktive index (tørrstoffinnhold) - Spredt lys måles i to vinkler:
– lav vinkel lightscatter; 2-3º (korrelerer med cellestørrelse)
– høy vinkel lightscatter; 5-15º (korrelerer med celleinnhold)
hvorfor er advia bedre til å skille mellom plater og erytrocytter enn det pentra er?
advia måler på innhold og størrelse så den er bedre enn pentra for å skille mellom plater og erytrocytter. Kan ha store plater og små erytrocytter som pentra ikke kan skille siden den bare går på størrelse (resitans), advia vil se på innhold og kan derfor se forskjellen
hvordan klassifiseres erytrocytter på advia?
- RBC VHC Advia fremstiller et lineært
cytogram hvor RBC deles inn i 9 områder
etter volum og HB-konsentrasjon. volum på y aksen og Hb konsentrasjon på x aksen - Hb-konsentrasjon:
– Hypokrom (lengst til venstre)
– Normokrom (32-36 g/dL)
– Hyperkrom (lengst til høyre) - Volum:
– Mikrocytter (lavest)
– Normocytter (82-98 fl)
– Makrocytter (høyest)
det vil si at en celle som ligger lengst til høyre og lavest vil bli klassifisert som en hyperkrom mikrocytær celle
hvordan får man en 5 parts differensialtelling av leukocytter i advia?
kombinerer måleprinsipper på baso og perox kanalen.
hva er prinsippe for baso kanalen i adiva?
- Blod og reagens blandes i reaksjons-kammeret
- RBC/PLT lyseres
- Leukocyttene, unntatt basofile, “strippes” for cellemembran og cytoplasma
- Cellene/cellekjernene føres enkeltvis gjennom flowcella hvor de bestråles med laserlys
- Lysspredning (lightscatter) måles i 2 vinkler. høy vinkel sier noe om kjerne struktur og lav vinkel sier noe om volum
hvilke kategorier inndeles resultatene i baso kanalen i?
Cellene separeres i mononukleære celler(MN) dvs monocytter og lymfocytter, polymorfnukleære (PMN) dvs nøytrofile og eosinofile granulocytter, blaster og basofile granulocytter
i et baso cytogram vil blaster som egentlig er store celler havne nede til venstre i diagrammet, hvorfor?
Blaster er store men den er ikke like tett i kjernen som eks lymfocytter og granulocytter og vil dermed slippe gjennom mer lys, havner derfor mer nede
hva er måleprinsippe i peroksidasekanalen?
- Erytrocytter lyseres, og uønskede enzymer inaktiviseres ved oppvarming ca 72⁰C
- Leukocyttene fikseres og farges ved å tilsette et
substratreagens - Celler som inneholder peroksidase gir spalting av substrat og farges brun
- Cellene føres gjennom flowcelle og bestråles av en tungsten-halogen lampe
- I PEROX-flowcella måles lysspredning (høy vinkel, sier noe om størrelsen på cellen) og absorbans
hvilke celler vil farges mest av perox kanalen?
eosinofile vil farges mye mer enn andre granulocytter, i tilfelle der man har umodne celler kan man også få en del absorbans da de inneholder mye peroxidase
hvordan registreres resultate av perox kanalen?
- Resultatet plottes i et cytogram med
– lysspredning (volum) på y- aksen
– absorbans (peroxidaseinnhold) på x-aksen - Cellene kan dermed klassifiseres som
– lymfocytter,
– eosinofile,
– monocytter,
– neutrofile
– LUC (= Large Unstained Cells, dvs atypiske lymfocytter eller blaster) - Totalt leukocytt-antall registreres også
