Inmunología Flashcards
Composición del anticuerpo
Cadena pesada H (heavy) y una cadena ligera L (light).
Pueden ser C (constantes) o V (variables).
Funciones de las pruebas de laboratorio
- Identificación de patógenos
- Medir componentes en la sangre
- Examinar detalles microscópicos o la arquitectura de un tejido
Elisa
Ensayo de inmunofluorescencia o inmunoabsorbente ligado a enzimas
Interacciones antígeno anticuerpo
Los anticuerpos usados en las elisas son de origen…
Monoclonal
Elisa en la que se añade un anticuerpo primario marcado con una enzima al antígeno. Proporcionando una señal visible para detectar o cuantificar el antígeno.
Elisa directo
Elisa a la que se añade un anticuerpo primario sin marcar al antígeno. Luego se añade un anticuerpo secundario marcado con una enzima para que se una al anticuerpo primario.
Elisa indirecta
Características de la Elisa indirecta
Alta sensibilidad
Procedimiento muy largo
Posible reacción cruzada del anticuerpo
Elisa en la cual se une el antígeno de interés al anticuerpo y luego se añade el anticuerpo de detección que se unirá al antígeno. Luego se añade un anticuerpo secundario marcado que se unirá al anticuerpo de detección.
Elisa tipo sandwich
Características de la Elisa tipo sandwich
Análisis de muestras complejas
ALTA sensibilidad y especificidad
El antígeno debe ser muy grande para reconocer dos anticuerpos
Método rápido objetivo y CUANTITATIVO de análisis de células, núcleos, cromosomas, mitocondrias u otras partículas en suspensión
Citometría de Flujo
¿Qué es un clúster de diferenciación?
Proteínas en la superficie celular (de membrana)
Puede ser específica para una células o para un linaje celular
¿Qué nos ayuda a identificar la citometría de flujo?
Diferentes poblaciones celulares simultáneamente
¿Cómo deben encontrarse las células para la citometría’
Se deben encontrar en un medio líquido (buffer de fosfatos) con lo que las células son alineadas en fil
¿Qué se puede conocer gracias a la citometría de flujo?
El tamaño y la granularidad
Proteínas que se expresan (marcadores)
Ejemplo de citometría de flujo
Cuantificación de Linfocitos C4 en pacientes con VIH. (Para saber la cantidad de linfocitos CD4)
Anticuerpos implicados en la respuesta inmune aguda viral
IgM
Anticuerpos involucrados en las respuesta inmune de memoria viral
IgG
¿Qué tipo de prueba son los análisis nucleicos/ proteínas?
Pruebas cualitativas
¿Qué es una sonda?
Secuencia de nucleótidos
Southern Blot
Se usa para detectar una secuencia específica de ADN en una muestra de sangre o tejido
Northern Blot
Se usa para detectar una secuencia de ARN específica en una muestra de sangre o tejido.
Western Blot
En vez de sondas se usan anticuerpos monoclonales. Se usan para detectar una proteínas específica en sangre o tejidos.
Pasos del southern blot
- Aislar ADN
- Enzimas de restricción para cortar una muestra de ADN en fragmentos
- Electroforesis (para separar los fragmentos)
- Desnaturalizar DNA
- Papel filtro de nitronucleasa: los fragmentos de ADN son transferidos del gel a la superficie de una membrana
- Hibridación: la membrana se expone a una sonda de ADN marcada por un químico. Si la sonda se une a la membrana entonces la secuencia de la sonda está en la muestra.
