Hibridoma Flashcards
¿Qué son los hibridomas?
Células diseñadas para producir anticuerpos monoclonales en grandes cantidades mediante la combinación de linfocitos B con células de mieloma inmortal.
¿Qué son los anticuerpos monoclonales?
Anticuerpos producidos por una única clona de linfocitos B, que reconocen un solo epítopo de un antígeno con la misma afinidad.
¿Qué son los anticuerpos policlonales?
Anticuerpos producidos por más de una clona de linfocitos B, cada uno reconoce un antígeno distinto o diferentes epítopes de un mismo antígeno.
¿Cómo se obtienen los anticuerpos policlonales?
Se obtienen inmunizando un animal con el antígeno de interés purificando los anticuerpos que produce.
¿Cuál es la estructura básica de un anticuerpo?
4 cadenas polipeptídicas:
- 2 cadenas pesadas.
- 2 cadenas ligeras: region variable (Unión al antígeno) y region constante (función estructural)
¿Cuáles son los pasos para producir anticuerpos monoclonales mediante tecnología de hibridoma?
- Inmunización: Ratones se inmunizan con el antígeno.
- Fusión celular: Linfocitos B del bazo se fusionan con células de mieloma.
- Cultivo en medio HAT: Las células fusionadas sobreviven y se seleccionan.
- Clonación: Se seleccionan y clonan in vivo o in vitro las células productoras del anticuerpo deseado.
¿Qué es el medio HAT y por qué es importante?
El medio HAT (hipoxantina, aminopterina y timidina) selecciona solo las células híbridas al inhibir el crecimiento de células no fusionadas.
¿Por medio de qué se fusionan los linfocitos B con las células del mieloma?
Por electrofusión o polietilinglicol
Tecnología del Ribosoma Display
- Aislamiento del gen del anticuerpo: mediante PCR
- Generación del transcrito in vitro a ARNm
- En un medio con ribosomas y proteínas el ARNm se traduce en anticuerpo funcionales sin necesidad de células
¿Cuáles son los tipos de anticuerpos monoclonales según su origen?
- Murinos (-momab): 0% humanos, alta inmunogenicidad.
- Quiméricos (-ximab): 66% humanos, inmunogenicidad moderada.
- Humanizados (-zumab): 90% humanos, baja inmunogenicidad.
- Humanos (-mumab): 100% humanos, muy baja inmunogenicidad.
¿Cuál es la vía de administración de anticuerpos monoclonales?
Vía intravenosa
Subcutánea
Intramuscular
¿Cómo actúan los anticuerpos monoclonales?
Se unen a:
- Receptores de membrana.
- Proteínas circulantes o de superficie.
Causan efectos directos o indirectos sobre la función del tejido.
¿Qué técnicas modernas se usan para producir anticuerpos monoclonales?
- Visualización de fagos: Inserción de genes en bacteriófagos para expresar anticuerpos en bacterias.
- Ribosoma display: Traducción in vitro de ARNm en un medio con ribosomas y proteínas.
